【摘要】： 牙周組織改建是正畸牙齒移動重要生物學(xué)基礎(chǔ)。其中,最重要一個環(huán)節(jié)就是破骨細(xì)胞對骨質(zhì)的吸收。而骨形成蛋白是骨組織中一種重要的骨基質(zhì)蛋白,與骨、牙周組織、神經(jīng)等組織形成有著極為密切的聯(lián)系。本實驗在體外將分離培養(yǎng)出牙周膜成纖維細(xì)胞和從全血中分離出的單個核細(xì)胞進(jìn)行直接共培養(yǎng),探討牙周膜成纖維細(xì)胞在破骨樣細(xì)胞形成過程中作用;探討rhBMP-2對破骨樣細(xì)胞形成的影響及其可能機制。本研究將實驗分為以下兩部分: 一、牙周膜成纖維細(xì)胞對外周血單個核細(xì)胞分化的影響 目的探討牙周膜成纖維細(xì)胞在破骨樣細(xì)胞形成過程中作用;觀察破骨樣細(xì)胞的生長過程。方法本實驗在體外培養(yǎng)及鑒定出牙周膜成纖維細(xì)胞,同時從全血中分離并鑒定具有單個細(xì)胞核特征的細(xì)胞。以含有1ɑ,25(OH)2D3和地塞米松的培養(yǎng)基將牙周膜成纖維細(xì)胞、單個核細(xì)胞分別進(jìn)行單獨或直接共培養(yǎng),每3天對TRAP陽性單個核細(xì)胞和TRAP陽性多核破骨細(xì)胞的數(shù)量及牙本質(zhì)磨片的吸收陷窩數(shù)目和面積分別進(jìn)行記錄、計算。結(jié)果不同時間段間的TRAP陽性單個核細(xì)胞與TRAP陽性多核細(xì)胞數(shù)目相比較,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);同時,不同組間的吸收陷窩數(shù)目和面積比較,差異具有顯著性(P0.001)。牙周膜成纖維細(xì)胞明顯增加了共培養(yǎng)組TRAP陽性多核細(xì)胞數(shù)量、吸收陷窩數(shù)目和面積。然而牙周膜成纖維細(xì)胞組與單個核細(xì)胞組之間的吸收陷窩數(shù)目與吸收陷窩面積差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論外周血單個核細(xì)胞需在牙周膜成纖維細(xì)胞存在的條件下,才能形成多核的破骨樣細(xì)胞。沒有牙周膜成纖維細(xì)胞就沒有TRAP陽性的破骨樣細(xì)胞。同時,在共培養(yǎng)中,可以發(fā)現(xiàn)破骨樣細(xì)胞在體外存活的時間短暫。 二rhBMP-2對破骨樣細(xì)胞生成的調(diào)節(jié)作用 目的探討rhBMP-2對破骨樣細(xì)胞形成的影響及其可能的作用機制。方法以含有1ɑ,25(OH)2D3和地塞米松的培養(yǎng)基將單個核細(xì)胞進(jìn)行單獨培養(yǎng)或與牙周膜成纖維細(xì)胞直接共培養(yǎng)18天,同時加入或不加入rhBMP-2,觀察TRAP陽性單個核細(xì)胞和TRAP陽性多核破骨細(xì)胞的數(shù)量。結(jié)果加入rhBMP-2組與未加入rhBMP-2組的TRAP陽性單個核細(xì)胞與TRAP陽性多核細(xì)胞數(shù)目分別比較,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);共培養(yǎng)組與單個核細(xì)胞組之間的TRAP陽性單個核與多核細(xì)胞數(shù)目相比較,具有顯著性差異(P0.001);牙周膜成纖維細(xì)胞與rhBMP-2之間具有協(xié)同作用(P0.001)。可見rhBMP-2與牙周膜成纖維細(xì)胞在多核細(xì)胞生成具有重要作用;同時,rhBMP-2與牙周膜成纖維細(xì)胞聯(lián)合作用能促進(jìn)多核細(xì)胞的生成。結(jié)論rhBMP-2有促進(jìn)破骨樣細(xì)胞生成的作用,但需要牙周膜成纖維細(xì)胞存在的情況下;rhBMP-2可能是通過牙周膜成纖維細(xì)胞間接作用于外周血單個核細(xì)胞的。
【圖文】：

人牙周膜成纖維細(xì)胞原代培養(yǎng)5天，細(xì)胞開始游離出來(Bar=100μm)

人牙周膜成纖維細(xì)胞原代培養(yǎng)17d后，組織塊周圍，，細(xì)胞已經(jīng)長滿
【學(xué)位授予單位】：福建醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2008
【分類號】：R78

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前5條

1 司曉輝,劉正;骨形成蛋白2基因轉(zhuǎn)染的人牙周膜成纖維細(xì)胞的骨誘導(dǎo)作用[J];華西口腔醫(yī)學(xué)雜志;2003年05期

2 司曉輝,劉正;重組人骨形成蛋白2對人牙周膜成纖維細(xì)胞的生物學(xué)作用[J];華西口腔醫(yī)學(xué)雜志;2002年01期

3 司曉輝!200011,劉正!200011;骨形成蛋白2基因轉(zhuǎn)染的人牙周膜成纖維細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)觀察[J];中華口腔醫(yī)學(xué)雜志;2001年04期

4 楊雁琪,張丁,李小彤,傅民魁;人牙周膜細(xì)胞OPG與RANKL在mRNA水平的表達(dá)[J];口腔正畸學(xué);2002年04期

5 張丁,楊雁琪,李小彤,傅民魁;1alpha,25(OH)_2維生素D_3對OPG、RANKL在人牙周膜細(xì)胞中表達(dá)影響的RT-PCR半定量研究[J];現(xiàn)代口腔醫(yī)學(xué)雜志;2002年06期

本文編號：2670739