發(fā)布時(shí)間：2020-05-12 21:14

【摘要】：目的：引導(dǎo)骨組織再生技術(shù)(guided bone regeneration, GBR)為骨量不足患者行種植牙修復(fù)提供了可能。在GBR技術(shù)中,引導(dǎo)骨再生屏障膜對(duì)骨再生的成功起著關(guān)鍵作用。本研究將中分子量的幾丁糖與膠原材料按不同比例混合,經(jīng)真空凍干技術(shù)制成均勻膜,通過掃描電鏡觀察、拉伸試驗(yàn)評(píng)價(jià)其物理性能；通過細(xì)胞毒性試驗(yàn)、大鼠背部皮下埋置及顱骨臨界骨缺損模型評(píng)價(jià)膜的生物相容性、降解性能及體內(nèi)引導(dǎo)骨再生能力,從而綜合評(píng)價(jià)本研究研制的幾丁糖-膠原凍干膜成為可降解GBR膜的潛力。 方法：(1)將1%和2%的幾丁糖乙酸溶液與0.1%膠原溶液按體積比2：1混合,經(jīng)過真空冷凍干燥技術(shù)分別制成幾丁糖-膠原E膜和H膜。通過掃描電鏡對(duì)兩種凍干膜的表面形貌進(jìn)行觀察,同時(shí)與國產(chǎn)海奧膠原膜(煙臺(tái)正海生物技術(shù)有限公司,中國)的表面形貌進(jìn)行比較；通過拉伸試驗(yàn)測定幾丁糖-膠原膜的彈性模量和抗拉強(qiáng)度；(2)制備幾丁糖-膠原E膜和H膜的浸提液,用其培養(yǎng)MC3T3-E1細(xì)胞,通過MTT法測定浸提液的細(xì)胞毒性；(3)將消毒的E膜和H膜裁剪成1.0×1.0cm2大小,植入大鼠背部皮下,4w及8w后通過大體和組織切片觀察,評(píng)價(jià)膜的組織學(xué)反應(yīng)及降解情況；(4)在大鼠頂骨雙側(cè)制備臨界骨缺損(d=5mm),隨機(jī)覆蓋幾丁糖-膠原H膜、海奧膠原膜及不覆蓋膜,6w后取材,制作石蠟切片進(jìn)行HE染色和Masson三色染色,鏡下觀察和比較不同組別骨再生程度,計(jì)算新生骨面積百分比和缺損關(guān)閉率并進(jìn)行相互比較。 結(jié)果：(1)幾丁糖-膠原E膜和H膜質(zhì)地均勻,表面平整,有一定的韌度和強(qiáng)度,掃描電鏡觀察其表面富含孔隙結(jié)構(gòu),平均孔徑為12±2um,H膜的平均厚度大于E膜,且強(qiáng)度和韌度均優(yōu)于E膜；拉伸試驗(yàn)測得H膜的彈性模量為15.7±7.65MPa,抗拉強(qiáng)度為0.693±0.280MPa。(2)與常規(guī)培養(yǎng)基相比,E膜和H膜浸提液對(duì)MC3T3-E1細(xì)胞的生長沒有抑制作用,2%幾丁糖制成的H膜浸提液使MC3T3-E1細(xì)胞濃度在第4-7天時(shí),明顯高于1%幾丁糖制成的E膜和常規(guī)培養(yǎng)基。(3)兩種膜植入大鼠背部皮下后未引起局部紅腫、感染等炎癥反應(yīng),組織學(xué)觀察僅見少量中性粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞聚集,膜表面包裹纖維結(jié)締組織。隨著時(shí)間延長膜內(nèi)炎癥細(xì)胞逐漸減少,纖維包膜變薄,膜內(nèi)發(fā)生緩慢降解,但8w后兩種膜仍基本保持原有的形狀和厚度。(4)大鼠顱骨臨界骨缺損試驗(yàn)6w后,H膜覆蓋骨缺損的基底部可見一層新生骨組織,新生骨面積百分比為29.18±3.78%,明顯高于空白組(9.09±3.56%,P0.01),海奧膠原膜組新生骨面積百分比為34.15±3.33%,高于空白組(P0.01),但與H膜相比無明顯差異(P0.05)；H膜組和海奧膠原膜組骨缺損內(nèi)新生骨組織已幾乎相互連接,缺損關(guān)閉率分別為97.5±1.89%,98.0±1.89%,高于空白組(35.4±6.66%,P0.01)。 結(jié)論：2%中分子幾丁糖溶液和0.1%膠原溶液按體積比2：1混合后,經(jīng)真空干燥制得的凍干膜具有較強(qiáng)的機(jī)械強(qiáng)度；其細(xì)胞相容性和組織相容性良好；在體內(nèi)緩慢降解并可以維持8w以上；幾丁糖-膠原膜能屏蔽纖維組織,促進(jìn)大鼠顱骨骨缺損愈合,是有潛力的引導(dǎo)骨再生可降解膜。
【學(xué)位授予單位】：浙江大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號(hào)】：R783.6

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1 王華;鄧春富;張，

本文編號(hào)：2660847