【摘要】：目的：通過分析牙周炎患者血漿內毒素與冠心病及其危險因素的相關性及牙周炎主要致病菌牙齦卟啉單胞菌(P.g)脂多糖(LPS)對人臍靜脈內皮細胞(HUVEC)細胞間連接蛋白VE-cadherin表達及細胞增殖和調亡的影響,探討血漿牙周炎致病菌內毒素在牙周炎患者罹患冠心病中的作用及相關機制。 方法：1.臨床研究采用病例對照研究設計,于2012年5月-7月在天津醫(yī)科大學第二醫(yī)院干部保健科進行體檢的1089人中,選取牙周炎患者201人,并根據是否存在冠心病將其分為病例組(牙周炎合并冠心病)和對照組(牙周炎不合并冠心病),同時納入43例健康查體對象設為空白組。通過鱟試劑動態(tài)濁度法與ELISA法分別測定血漿內毒素及同型半胱氨酸含量,并根據血漿內毒素四分位數將病例組人群進一步分成Q1組(0%且≤25%)、Q2組(25%且≤50%)、Q3組(50%且≤75%)和Q4組(75%且≤100%)。同時,對全部納入對象中的男性和老年(年齡≥65歲)亞組人群分別進行了進一步相關研究。 2.實驗研究：在體外將P.g菌LPS與HUVEC共培養(yǎng),根據P.g菌LPS濃度分為空白對照組、10pg/mL組、50pg/mL組、100pg/mL組及1ng/mL組。分別培養(yǎng)2h、6h、12h及24h后,采用Western blot和RT-PCR分別檢測VE-cadherin蛋白及mRNA表達情況。培養(yǎng)28h后采用MTT法及流式細胞儀分別測定細胞增殖活力及凋亡情況,并通過Western blot檢測caspase-3激活情況。 結果：1.在全部入選研究對象中,3組人群的年齡、內毒素、收縮壓(SBP)、總膽紅素(STB)、同型半胱氨酸(Hcy)、總膽固醇(TC)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)、極低密度脂蛋白膽固醇(VLDL-C)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)差別均有統計學意義(P0.01)。在病例組人群中,舒張壓(DBP)、LDL-C及STB在血漿內毒素水平四分位組間的差異均有統計學意義(P0.05),其中LDL-C隨內毒素水平升高呈逐漸增高的趨勢；血漿內毒素與TC和LDL-C之間存在正相關(r分別為0.438、0.457,P均為0.000),校正年齡因素影響后,它們之間仍然存在正相關(r分別為0.349、0.423,P分別為0.003、0.000)。血漿HCY及內毒素水平增加、年齡增長和舒張壓升高可能是牙周炎患者罹患冠心病的促進因素,而女性性別優(yōu)勢可能是其抑制因素。 2.在男性亞組中,3組人群的年齡、內毒素、SBP、DBP、STB、Hey、TC、LDL-C、VLDL-C、HDL-C差別均有統計學意義(P0.05)。在男性病例組人群中,不同血漿內毒索水平四分位組間STB的差異有統計學意義(P0.01)；血漿內毒素與TC和LDL-C之間存在正相關(r分別為0.427、0.452,p均小于0.000),校正年齡因素影響后,它們之間J仍然存在正相關(r分別為0.361、0.454,P分別為0.006、0.000)。血漿Hcy及內毒素水平增加和年齡增長可能是促進男性牙周炎患者罹患冠心病的影響因素,而血漿Fbg水平增加可能是其抑制因素。 3.在老年亞組中,3組人群的年齡、內毒素、SBP、STB、Hcy、TC、LDL-C、 HDL-C差別均有統計學意義(P0.05)。在老年病例組人群中,STB和DBP在血漿毒素水平四分位組間的差異均有統計學意義(P0.05)；血漿內毒素與TC和LDL-C之間存在正相關(r分別為0.418、0.443,P均小于0.000),校正年齡因素影響后它們之間仍然存在正相關(r分別為0.320、0.399,P分別為0.008、0.001)。老年牙周炎患者罹患冠心病的易患因素可能是血.漿Hcy及內毒素水平增加,而其抑制因素可能是女性性別優(yōu)勢。 4.濃度為1ng/mL時,P.g菌LPS能以時間依賴方式下調HUVEC細胞VE-cadherin蛋白及mRNA表達；100pg/mL濃度的P.g菌LPS僅在處理24h后才表現出上述下調作用；而10pg/mL和50pg/mL濃度的P.g菌LPS對HUVEC細胞VE-cadherin蛋白及mRNA表達無明顯影響。 5. HUVEC細胞增殖活力在10pg/mL組與空白對照組之間的差異沒有統計學意義(P0.05),細胞凋亡和caspase-3激活程度在這兩組間也沒有明顯差異；50pg/mL組、100pg/mL組和1ng/mL組HUVEC細胞增殖活力明顯低于空白對照組及10pg/mL組(P0.01),并且隨著P.g菌LPS濃度增加,HUVEC細胞增殖活力逐漸減低,而HUVEC細胞發(fā)生凋亡及caspase-3激活程度卻逐漸增加。 結論：1.血漿中牙周炎致病菌內毒素水平增加可能是促使牙周炎患者罹患冠心病的影響因素,并且牙周炎致病菌內毒素可能是通過與血.漿TC、LDL-C和Hcy及年齡增長等因素協同作用共同促進冠心病的發(fā)生與發(fā)展。 2.牙周炎主要致病菌P.g菌脂多糖可能是通過抑制HUVEC細胞增殖和誘導HUVEC細胞凋亡的機制,直接引起血管內皮損傷,從而促進動脈粥樣硬化病變的發(fā)生發(fā)展。 3.P.g菌LPS可能不是通過直接影響HUVEC細胞VE-cadherin表達的途徑增加內皮細胞間通透性,以利于動脈粥樣硬化病變的形成。 4.P.g菌LPS可能是通過激活caspase-3途徑誘導HUVEC細胞產生凋亡的。
【學位授予單位】：天津醫(yī)科大學
【學位級別】：博士
【學位授予年份】：2013
【分類號】：R541.4;R781.42

【參考文獻】

相關期刊論文 前10條

1 孫蕓蕓,蔣文玲,羅憲玲,陳紀言;冠心病患者血清中肺炎衣原體免疫復合物及抗體檢測的臨床分析(英文)[J];第一軍醫(yī)大學學報;2004年04期

2 吳娟;孫衛(wèi)斌;季勇;林良緣;;牙齦卟啉單胞菌促進人臍靜脈內皮細胞一氧化氮的生成[J];南京醫(yī)科大學學報(自然科學版);2009年02期

3 張冬梅;潘亞萍;林莉;趙戩;李琛;;牙齦卟啉單胞菌侵入對血管內皮細胞E選擇素表達的影響[J];上�？谇会t(yī)學;2008年02期

4 田娜;歐陽翔英;;牙齦卟啉單胞菌胞外蛋白對牛主動脈內皮細胞存活的影響[J];上�？谇会t(yī)學;2008年04期

5 張冬梅;趙戩;潘亞萍;林莉;李琛;;P. gingivalis感染對血管內皮細胞VCAM-1表達的影響[J];實用口腔醫(yī)學雜志;2009年03期

6 宋紅;馬秦;呂昕;趙蕊妮;;牙齦卟啉單胞菌對心血管內皮細胞黏附和入侵的研究[J];心臟雜志;2010年05期

7 周小波;吳慧琴;張雪梅;王高頻;段培峰;;血管內皮炎癥與動脈粥樣硬化[J];中國心血管病研究;2008年04期

8 臧嬋媛;康毅;溫克;婁建石;;1-磷酸鞘氨醇對血小板活化因子所致大鼠腸系膜微血管通透性增高的影響[J];中國病理生理雜志;2010年04期

9 中國心臟調查組;胡大一;潘長玉;;中國住院冠心病患者糖代謝異常研究——中國心臟調查[J];中華內分泌代謝雜志;2006年01期

10 毛松,前野伸昭,小田宏;多粘菌素B和熱處理對牙齦卟啉單胞菌誘導ECHUV產生sICAM-1的影響[J];牙體牙髓牙周病學雜志;2002年01期

，

本文編號：2657462