【摘要】：目的：研究小型豬自體富血小板血漿、牙周膜干細胞聯(lián)合羥基磷灰石修復牙周骨組織缺損的作用。方法：全麻下采集貴州小型豬靜脈全血，二次離心法制備PRP，測定其中TGF-β1和PDGF-AB的含量。采用組織塊法獲得小型豬牙周膜干細胞(PDLSCs)，用免疫熒光法檢測STRO-1進行鑒定。取第3代小型豬PDLSCs接種在羥基磷灰石支架材料上并加入PRP復合培養(yǎng)，分別在第1、3、7天用掃描電鏡觀察細胞在羥基磷灰石上的生長情況。建立小型豬牙周骨缺損模型：以骨缺損部位加入移植材料的不同分組，A組，牙周骨缺損區(qū)植入PRP/PDLSCs/HA；B組，牙周骨缺損區(qū)植入單純HA支架材料；C組，牙周骨缺損區(qū)不處理，直接縫合。術后4、8、12周處死動物，分別從大體、影像學、組織學方面進行觀察。結果：原代培養(yǎng)的小型豬牙周膜干細胞生長良好，STRO-1免疫熒光染色陽性。掃描電鏡觀察結果表明，PDLSCs在羥基磷灰石上生長良好。實驗組A組、B組在術后4、8、12周均有不同程度的骨組織再生，A組優(yōu)于B組，而空白對照組只有少量成骨。結論：小型豬牙周膜干細胞可以在體外用組織塊法成功的分離培養(yǎng)，并在羥基磷灰石支架材料上良好的生長，應用PRP作為內源性生長因子、PDLSCs作為種子細胞、HA作為支架材料聯(lián)合構建的組織工程骨修復骨缺損的效果良好，為牙周骨組織修復和牙周組織工程研究提供了實驗依據(jù)。
【圖文】：

1.1 血小板計數(shù)結果見表 1 血小板計數(shù)可以看出通過二次離心法制備獲得的 PRP 中的血小板含量為全血中血小板數(shù)量的 5 倍左右，差異具有統(tǒng)計學意義，P＜0.05。表 1 小型豬全血和 PRP 血小板計數(shù)（n＝6，×109）Tab.1 The platelet count of miniature swine’s venous blood and PRP樣本 1 樣本 2 樣本 3樣本 4 樣本 5樣本 6 x s全血 193 184 195201 192210 191.33±6.83PRP 910 937 10201250 9741352 1073.83±182.671.2 瑞氏染色PRP 組鏡下可見較多的淡紫色著色的血小板散在分布，其在 1000×光鏡下可見其表現(xiàn)為有一個中央致密的顆粒區(qū)和周邊淺色的明亮區(qū)。全血組 1000×光鏡下可見大量的紅細胞，，偶有散在的深染細胞為淋巴細胞，可見淡紫色著色的血小板少量分布，見圖 1。

進入快速增長期，傳代后的細胞和原代一致，細胞圖 6。型豬牙周膜原代細胞培養(yǎng)第 9 天（箭頭所示為牙周膜組織riodontal ligament cells isolated from periodontal ligament cultured for 9 d (×100)
【學位授予單位】：新疆醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2013
【分類號】：R783.4

【參考文獻】

相關期刊論文 前9條

1 李金陸,楊圣輝;患牙齦炎的小型豬齦下菌斑內菌群的初步分析[J];北京口腔醫(yī)學;1999年02期

2 袁進;顧為望;;小型豬作為人類疾病動物模型在生物醫(yī)學研究中的應用[J];動物醫(yī)學進展;2011年02期

3 徐燕;葉眉;陳芳;姜大川;孫曉瑜;林瀟;沈繼龍;;富血小板血漿的三次離心法制備及其對脂肪干細胞增殖、成骨礦化的影響[J];國際口腔醫(yī)學雜志;2011年01期

4 趙瑾,袁曉燕,姚康德;組織工程多孔支架制備技術進展[J];化工進展;2002年09期

5 李紅艷;林崇韜;;神經營養(yǎng)因子與牙周組織再生[J];口腔醫(yī)學研究;2009年01期

6 袁乃梅,董廣英,張賢華,杜巖;中間普氏菌內毒素對人牙周膜細胞增殖的時間效應和細胞周期的影響[J];牙體牙髓牙周病學雜志;2003年10期

7 李乾鳳,周洪,金巖,葉湘玉,金鈁,聶鑫;大鼠骨髓基質細胞與膠原-殼聚糖復合后修復牙槽骨缺損的研究[J];牙體牙髓牙周病學雜志;2004年05期

8 毛天球;骨組織工程的研究[J];中華口腔醫(yī)學雜志;2001年02期

9 孟煥新,謝昊,陳智濱,王洪君,章魁華,曹采方;小型豬實驗性牙周炎的觀察[J];中華口腔醫(yī)學雜志;1996年06期

本文編號：2650683