【摘要】：目的：研究小型豬自體富血小板血漿、牙周膜干細(xì)胞聯(lián)合羥基磷灰石修復(fù)牙周骨組織缺損的作用。方法：全麻下采集貴州小型豬靜脈全血，二次離心法制備PRP，測(cè)定其中TGF-β1和PDGF-AB的含量。采用組織塊法獲得小型豬牙周膜干細(xì)胞(PDLSCs)，用免疫熒光法檢測(cè)STRO-1進(jìn)行鑒定。取第3代小型豬PDLSCs接種在羥基磷灰石支架材料上并加入PRP復(fù)合培養(yǎng)，分別在第1、3、7天用掃描電鏡觀察細(xì)胞在羥基磷灰石上的生長(zhǎng)情況。建立小型豬牙周骨缺損模型：以骨缺損部位加入移植材料的不同分組，A組，牙周骨缺損區(qū)植入PRP/PDLSCs/HA；B組，牙周骨缺損區(qū)植入單純HA支架材料；C組，牙周骨缺損區(qū)不處理，直接縫合。術(shù)后4、8、12周處死動(dòng)物，分別從大體、影像學(xué)、組織學(xué)方面進(jìn)行觀察。結(jié)果：原代培養(yǎng)的小型豬牙周膜干細(xì)胞生長(zhǎng)良好，STRO-1免疫熒光染色陽(yáng)性。掃描電鏡觀察結(jié)果表明，PDLSCs在羥基磷灰石上生長(zhǎng)良好。實(shí)驗(yàn)組A組、B組在術(shù)后4、8、12周均有不同程度的骨組織再生，A組優(yōu)于B組，而空白對(duì)照組只有少量成骨。結(jié)論：小型豬牙周膜干細(xì)胞可以在體外用組織塊法成功的分離培養(yǎng)，并在羥基磷灰石支架材料上良好的生長(zhǎng)，應(yīng)用PRP作為內(nèi)源性生長(zhǎng)因子、PDLSCs作為種子細(xì)胞、HA作為支架材料聯(lián)合構(gòu)建的組織工程骨修復(fù)骨缺損的效果良好，為牙周骨組織修復(fù)和牙周組織工程研究提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
【圖文】：

1.1 血小板計(jì)數(shù)結(jié)果見(jiàn)表 1 血小板計(jì)數(shù)可以看出通過(guò)二次離心法制備獲得的 PRP 中的血小板含量為全血中血小板數(shù)量的 5 倍左右，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P＜0.05。表 1 小型豬全血和 PRP 血小板計(jì)數(shù)（n＝6，×109）Tab.1 The platelet count of miniature swine’s venous blood and PRP樣本 1 樣本 2 樣本 3樣本 4 樣本 5樣本 6 x s全血 193 184 195201 192210 191.33±6.83PRP 910 937 10201250 9741352 1073.83±182.671.2 瑞氏染色PRP 組鏡下可見(jiàn)較多的淡紫色著色的血小板散在分布，其在 1000×光鏡下可見(jiàn)其表現(xiàn)為有一個(gè)中央致密的顆粒區(qū)和周邊淺色的明亮區(qū)。全血組 1000×光鏡下可見(jiàn)大量的紅細(xì)胞，，偶有散在的深染細(xì)胞為淋巴細(xì)胞，可見(jiàn)淡紫色著色的血小板少量分布，見(jiàn)圖 1。

進(jìn)入快速增長(zhǎng)期，傳代后的細(xì)胞和原代一致，細(xì)胞圖 6。型豬牙周膜原代細(xì)胞培養(yǎng)第 9 天（箭頭所示為牙周膜組織riodontal ligament cells isolated from periodontal ligament cultured for 9 d (×100)
【學(xué)位授予單位】：新疆醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號(hào)】：R783.4

【參考文獻(xiàn)】

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1 李金陸,楊圣輝;患牙齦炎的小型豬齦下菌斑內(nèi)菌群的初步分析[J];北京口腔醫(yī)學(xué);1999年02期

2 袁進(jìn);顧為望;;小型豬作為人類疾病動(dòng)物模型在生物醫(yī)學(xué)研究中的應(yīng)用[J];動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展;2011年02期

3 徐燕;葉眉;陳芳;姜大川;孫曉瑜;林瀟;沈繼龍;;富血小板血漿的三次離心法制備及其對(duì)脂肪干細(xì)胞增殖、成骨礦化的影響[J];國(guó)際口腔醫(yī)學(xué)雜志;2011年01期

4 趙瑾,袁曉燕,姚康德;組織工程多孔支架制備技術(shù)進(jìn)展[J];化工進(jìn)展;2002年09期

5 李紅艷;林崇韜;;神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子與牙周組織再生[J];口腔醫(yī)學(xué)研究;2009年01期

6 袁乃梅,董廣英,張賢華,杜巖;中間普氏菌內(nèi)毒素對(duì)人牙周膜細(xì)胞增殖的時(shí)間效應(yīng)和細(xì)胞周期的影響[J];牙體牙髓牙周病學(xué)雜志;2003年10期

7 李乾鳳,周洪,金巖,葉湘玉,金鈁,聶鑫;大鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞與膠原-殼聚糖復(fù)合后修復(fù)牙槽骨缺損的研究[J];牙體牙髓牙周病學(xué)雜志;2004年05期

8 毛天球;骨組織工程的研究[J];中華口腔醫(yī)學(xué)雜志;2001年02期

9 孟煥新,謝昊,陳智濱,王洪君,章魁華,曹采方;小型豬實(shí)驗(yàn)性牙周炎的觀察[J];中華口腔醫(yī)學(xué)雜志;1996年06期

本文編號(hào)：2650683