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骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞聯(lián)合纖維蛋白膠修復(fù)大鼠牙槽骨缺損的研究

發(fā)布時(shí)間:2020-05-05 16:10
【摘要】: 牙周病是一種慢性進(jìn)行性疾病,可導(dǎo)致牙周支持組織的破壞,最終導(dǎo)致牙齒喪失。牙周病治療的目的不僅在于控制炎癥,更在于使已經(jīng)破壞的牙周組織再生以形成新附著。外傷、腫瘤、先天性唇腭裂等均可引起牙槽骨的缺失。牙周的重建包括因炎癥破壞吸收的硬組織(牙槽骨與牙骨質(zhì))和軟組織(牙周膜與牙齦)。只有重建了牙周軟硬組織,才能恢復(fù)原有的牙周結(jié)構(gòu),才能較好的行使其功能。 組織工程技術(shù)為重建牙周軟硬組織,修復(fù)牙槽骨缺損提供了可能。組織工程有三大要素:種子細(xì)胞,支架材料和細(xì)胞因子。對(duì)于骨組織工程而言,種子細(xì)胞要求具有成骨潛能。目前,骨種子細(xì)胞可來(lái)源于骨膜、骨松質(zhì)、骨髓以及骨外組織來(lái)源的成骨細(xì)胞等。骨髓之所以具有成骨能力,是由于骨髓內(nèi)有具有多項(xiàng)分化潛能的基質(zhì)干細(xì)胞,在有誘導(dǎo)物如骨形態(tài)發(fā)生蛋白(bone morphogenetic protein, BMP)或某些特殊條件下,可促進(jìn)其向成骨方向分化。增殖能力以及多項(xiàng)分化潛能是種子細(xì)胞所具備的基本特點(diǎn)。骨組織工程的支架材料目的有三點(diǎn):首先能夠很好的作為載體攜帶種子細(xì)胞植入目的區(qū)域,修復(fù)骨缺損,強(qiáng)調(diào)其支架的功能;其次是具有良好的生物相容性或生物可降解性,對(duì)機(jī)體無(wú)不良影響,不會(huì)影響到機(jī)體的再生;以上兩點(diǎn)也是支架材料所必需具備的基本特征;再次,良好的支架材料能夠促進(jìn)再生和重建,就骨組織工程而言,能夠具有良好的骨誘導(dǎo)性和骨傳導(dǎo)性,支持骨細(xì)胞的生長(zhǎng)及其功能分化。細(xì)胞因子在組織工程中的作用不可忽視,多種細(xì)胞因子參與了骨形成這一過(guò)程。因此,選取合適的種子細(xì)胞和支架材料,并找到具有明顯生物學(xué)效應(yīng)的細(xì)胞因子是研究者的目標(biāo),也是研究者完美修復(fù)骨缺損的唯一途徑。 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞具有以下特點(diǎn):增殖分化傳代能力強(qiáng)、可塑性強(qiáng)、具有多項(xiàng)分化潛能,對(duì)受植區(qū)環(huán)境適應(yīng)能力強(qiáng)、取材簡(jiǎn)便,對(duì)機(jī)體損傷小、少見免疫排斥反應(yīng),臨床應(yīng)用廣泛,是一種較為成熟的組織工程種子細(xì)胞。 骨組織工程中支架材料種類較多,常用聚羥基乙酸(PGA)、聚乳酸-聚乙醇酸共聚物(PLGA)作為細(xì)胞外基質(zhì)(ECM)的替代物,還有生物活性的磷酸三鈣( TCP)、羥基磷灰石(HA)也作為支架材料用于組織工程中。天然的細(xì)胞外基質(zhì)主要有膠原、藻酸鹽、骨基質(zhì)明膠等。纖維蛋白凝膠(Fibrin glue, FG)主要是由天然的細(xì)胞外基質(zhì)構(gòu)成,其生物相容性、可塑性良好,具有一定的彈性和黏附能力,易被組織吸收,并且具有一定的物理強(qiáng)度,是良好的支架材料。 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(Bone Marrow Mesenchymal Stem Cells, BMSCs)以及FG已較為廣泛的應(yīng)用于臨床及實(shí)驗(yàn),用于骨組織工程修復(fù)長(zhǎng)骨缺損,但口腔牙槽骨是人體中最活躍的骨質(zhì),破骨與成骨維持一個(gè)動(dòng)態(tài)的平衡,同時(shí)有牙根存在其牙槽窩中,由于口腔獨(dú)特的微環(huán)境,目前還沒有應(yīng)用BMSCs聯(lián)合FG修復(fù)牙槽骨缺損的報(bào)道。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)建立牙槽骨創(chuàng)傷模型,探討利用BMSCs和FG復(fù)合物修復(fù)牙槽骨,觀察其成骨效應(yīng)和修復(fù)效果。 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞聯(lián)合纖維蛋白膠修復(fù)大鼠牙槽骨缺損 目的:通過(guò)構(gòu)建大鼠牙槽骨缺損創(chuàng)傷模型,以BMSCs和FG作為種子細(xì)胞和支架材料修復(fù)大鼠牙槽骨缺損,探討聯(lián)合BMSCs和FG修復(fù)大鼠牙槽骨缺損的效果。 方法:45只SD大鼠隨機(jī)分成A、B、C三組,建立大鼠上頜牙槽骨缺損創(chuàng)傷模型,制備BMSCs和FG復(fù)合物備用,A組實(shí)驗(yàn)組植入BMSCs和FG復(fù)合物,B組為陰性對(duì)照組單純植入FG,C組為空白對(duì)照組。術(shù)后觀察大體標(biāo)本骨修復(fù)效果,并制作上頜牙槽骨實(shí)驗(yàn)區(qū)切片HE染色及Micro-CT掃描檢測(cè)成骨效應(yīng)。 結(jié)果:從大體標(biāo)本可以看到,實(shí)驗(yàn)組成骨明顯,6周時(shí)骨缺損已修復(fù),與周圍正常牙槽骨界限不清,陰性對(duì)照組與空白對(duì)照組只有少量骨生成,骨缺損仍然存在;HE切片可見實(shí)驗(yàn)組術(shù)后3周新生骨小梁形成,6周可見新骨形成增加,新生骨小梁均勻,陰性對(duì)照組及空白對(duì)照組無(wú)明顯新生骨小梁,有纖維組織修復(fù);Micro-CT掃描結(jié)果與大體標(biāo)本和HE切片結(jié)果一致。 結(jié)論:骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞、纖維蛋白膠取材方便,兩者在骨修復(fù)方面均有其獨(dú)特的優(yōu)勢(shì),應(yīng)用骨髓間充質(zhì)細(xì)胞聯(lián)合纖維蛋白膠可較好的修復(fù)大鼠牙槽骨缺損,不僅提高了新骨生成量,而且加快了骨缺損的修復(fù)速度,是修復(fù)小范圍骨缺損理想的種子細(xì)胞與支架材料。
【圖文】:

骨缺損


骨缺損建立初期

骨缺損


空白對(duì)照6周
【學(xué)位授予單位】:第四軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2010
【分類號(hào)】:R781.4

【共引文獻(xiàn)】

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1 路曉淼;王恩群;;神經(jīng)生長(zhǎng)因子對(duì)骨髓基質(zhì)細(xì)胞成骨分化影響的研究進(jìn)展[J];安徽醫(yī)藥;2009年02期

2 張文鵬;葉發(fā)剛;y囇澡,

本文編號(hào):2650413


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