【摘要】： 遺傳性牙本質(zhì)發(fā)育不全(dentinogenesis imperfecta DGI)是一種常染色體顯性遺傳病，發(fā)病率為1／8000，臨床上將其分為三型，Ⅰ型，DGI—Ⅰ，又名牙本質(zhì)生成不全，患者除牙本質(zhì)生成不全外，常伴有成骨發(fā)育不全的癥狀，其病因?yàn)閺V泛的Ⅰ型膠原基因突變。Ⅱ型，DGI—Ⅱ，又名遺傳性乳光牙本質(zhì)(hereditary opalescent dentin)，外顯率近100％，其病因與牙本質(zhì)的礦化不良有關(guān)。Ⅲ型，DGI—Ⅲ，又名白蘭地型牙本質(zhì)生成不全(dentinogenesis imperfecta，Brandywine type)或稱為隔離群遺傳性乳光牙本質(zhì)(isolate hereditary opalescent dentin)，為孤立發(fā)生于美國(guó)馬里蘭州華盛頓DC的3個(gè)隔離民族群中特殊的遺傳性乳光牙本質(zhì)，該病由Witkop 1956年最初報(bào)道，國(guó)內(nèi)未見報(bào)道。 2001年我國(guó)學(xué)者成功克隆了DGI—Ⅱ的致病基因-DSP基因。在上海中國(guó)科學(xué)院孔祥銀研究組收集的6個(gè)DGI-Ⅱ家系中有3個(gè)在DSP基因找到了突變，但來自岳陽、寧南、大連的3個(gè)家系在DSP基因并未找到與表型相符的突變。因此我們對(duì)這三個(gè)家系分別選取了4q21區(qū)域的高雜合度STRP微衛(wèi)星標(biāo)記進(jìn)行連鎖分析，以了解DGI-Ⅱ在我國(guó)患者中的基因定位情況。同時(shí)還對(duì)4q21區(qū)域的候選基因進(jìn)行了PCR和DNA測(cè)序，為進(jìn)一步尋找致病基因奠定基礎(chǔ)。 第四牟醫(yī)人學(xué)博十學(xué)位論文 1遺傳性牙本質(zhì)發(fā)育不全＊型三例家系致病基因的連鎖分析 我們對(duì)大連家系選取4qZI區(qū)域的4個(gè)高雜合度STRP微衛(wèi)星標(biāo)記、 岳陽家系選取6個(gè)高雜合度STRP微衛(wèi)星標(biāo)記、四川寧南縣家系選取6 個(gè)高雜合度STRP微衛(wèi)星標(biāo)記進(jìn)行連鎖分析。 結(jié)果顯示岳陽家系在位點(diǎn)D4S451、D452622、DMPI、D451563 值均大于1，提示支持連鎖。而在位點(diǎn)DSPP，Lod （，因此我們進(jìn)行了 多點(diǎn)連鎖分析，提示該區(qū)域與 DG的致病基因相連鎖。單體型分析結(jié) 果顯示該家系致病基因在D45451、D452622、DMPI、D4S1563多態(tài)位 點(diǎn)均發(fā)生了交換。尤其是第4代39號(hào)個(gè)體，第5代19號(hào)個(gè)體在DSPP 發(fā)生交換，這與 2001年報(bào)道的 DGlll致病基因定位 DSP基因不相符， 推測(cè)DGI．11可能具有異質(zhì)性，但僅為推測(cè)。進(jìn)一步的證實(shí)還需遺傳距離 更小的的高度多態(tài)STRP微衛(wèi)星標(biāo)記進(jìn)行深入分析。 寧南家系兩點(diǎn)連鎖分析結(jié)果顯示在位點(diǎn)DSPP、DMPI、SPPI、 D4S1563值均大于1，提示支持連鎖。其多點(diǎn)分析結(jié)果顯示Lod最大值 在位點(diǎn) DSPP與 DMP位點(diǎn)之間。單體型分析結(jié)果顯示在 D45451、 D452690、DMPI、SPPI、D4S1563多態(tài)位點(diǎn)均發(fā)生了交換。因此 DG 11致病基因范圍被界定在D452690與DMPI位點(diǎn)之間。與國(guó)外報(bào) 道相似。 在大連的家系兩點(diǎn)連鎖分析結(jié)果表明在位點(diǎn)D45451、DSPP、SPPI 和 D4S1563，0值由 0至0．4變化時(shí)LOd值均為負(fù)值，無法運(yùn)用 SllALKZ VersionZ．31和CYRILLIC 2．02軟件在該區(qū)域構(gòu)建有序的單體型圖，提 示該家系可能與4qZI區(qū)域不連鎖。但山于該家系樣本信息含量較小，因 此還需要積累更多的家系資料并做進(jìn)一步連鎖分析。 DG致病基因的定位是定位克隆的首要步驟。接下來還需對(duì)岳陽 家系和寧南家系連鎖區(qū)的位置性和功能性基因進(jìn)行篩選。以期最終揭示 這兩個(gè)家系的致病基因。 4 第四軍醫(yī)人學(xué)助＿1：學(xué)位論文 2候選基因篩選 在第一部分實(shí)驗(yàn)確定的連鎖范圍內(nèi)按遺傳距離依次排列著一簇與骨 －牙礦化發(fā)育密切相關(guān)的多個(gè)功能性兼位置性候選基因，依次為：BMP3 （Bone morphogenetlc protein 3），DSPP（Denm slalo phosphoproteln）， DMPI（Denim matrix protein），BSP（Bone slaloprotein 11），SPPI （0幻剛p＊ndn，＊＊N）等：另外還有多個(gè)位置性候選基因：如NUD Tg （nucleoside dlphosphate 11伙ed moiety X－twe motifg），KLHLS（belch－like 8），LOC2207693（similar to heat shock protein 90－beta）等。 為尋找岳陽、寧南家系的DGI－11致病基因，避兔漏檢，本研究對(duì)以 上候選基因均進(jìn)行了DNA測(cè)序檢測(cè)，選取DSPP啟動(dòng)于及DPP基因、 MEPE和BSP基因進(jìn)行報(bào)道。 DSPP基因啟動(dòng)子、DPP基因編碼區(qū)及其臨近內(nèi)含子序列分段PCR 和DNA測(cè)序檢測(cè)結(jié)果顯示：DPP基因編碼區(qū)、DSPP基因啟動(dòng)子內(nèi)未找 到任何基因變化。同時(shí)課題組的其它人員對(duì)DSP基因也進(jìn)行了分段測(cè)序， 結(jié)果也未發(fā)現(xiàn)符合表型的基因突變。這與2001年我國(guó)學(xué)者報(bào)道的DGIJ 的致病基因－DSP不相符。提示DGI－11的致病基因可能具有遺傳異質(zhì)性。 但在DSPP基因其他區(qū)域是否含有符合表型的基因突變，還有待于進(jìn)一 步的研究。 MEPE和BSP基因的編碼區(qū)及其臨近內(nèi)含子序列分段PCR和DNA 測(cè)序檢測(cè)結(jié)果顯示：在MEPE基因發(fā)現(xiàn)C．1027G＞A的堿基變化，此變化 導(dǎo)致MEPE出現(xiàn)V3301的氨基酸變化；在BSP基因發(fā)現(xiàn)C．797G＞A的堿 基變化，該變化導(dǎo)致BSP出現(xiàn)GZ19R的氨基酸變化。但這兩種變化在 家系內(nèi)與表型不存在—一對(duì)應(yīng)關(guān)系。山此排除了MEPE、BSP為兩個(gè) DGI川型家系致病基因的可能。
【學(xué)位授予單位】：中國(guó)人民解放軍第四軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2003
【分類號(hào)】：R781.2

【引證文獻(xiàn)】

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1 軒昆;文玲英;金巖;楊富生;石利強(qiáng);樊淑梅;;3例牙根發(fā)育不良患兒牙齒的病理學(xué)評(píng)估[J];牙體牙髓牙周病學(xué)雜志;2007年07期

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本文編號(hào)：2645356