【摘要】： 目的 新材料應用于人體前必須經(jīng)過全面的生物學檢測,現(xiàn)利用凋亡相關因子caspase-3的表達強度輔以時間梯度分析自制齒科合金生物相容性,以期使之應用于臨床,使國內(nèi)產(chǎn)品得以推廣發(fā)展。并嘗試從凋亡的角度,在分子水平上對口腔材料生物相容性檢測方法做一定補充;探討caspase-3表達強度與口腔材料生物相容性的關聯(lián),以期使之成為評價口腔材料生物相容性指標之一。 材料與方法 1、細胞培養(yǎng) L929細胞用含10%胎牛血清的RPMI 1640細胞培養(yǎng)基在37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)并傳代。 2、細胞形態(tài)學檢測 設立陰性對照組及實驗組(鎳鉻合金組、銀鈀合金組、鈷鉻合金組、2號合金組、3號合金組),用6種液體分別培養(yǎng)L929細胞48h后,在熒光顯微鏡下對活細胞、凋亡細胞、壞死細胞進行觀測。 3、Caspase-3分光光度法檢測 設立陰性對照組及實驗組(鎳鉻合金組、銀鈀合金組、鈷鉻合金組、2號合金組、3號合金組),用6種液體分別培養(yǎng)L929細胞4h、7h、24h、48h后,收集細胞,提取蛋白,染色后用酶標儀測定OD值,計算caspase-3活化度。 結(jié)果 1、各實驗組加樣培養(yǎng)48h后細胞形態(tài)。 熒光顯微鏡下觀察,可見各組細胞量上有差異,各組內(nèi)均有大量凋亡細胞,鎳鉻合金組內(nèi)可見橙色的壞死細胞或凋亡晚期細胞。 2、6種液體作用下caspase-3活化情況 各實驗組caspase-3活性比較有差異(P＜0.05)。Caspase-3活化度大小,由高到低:鈷鉻合金組＞2號合金組＞3號合金組＞銀鈀合金組＞鎳鉻合金組。 3、4h、7h、24h、48h點caspase-3活化情況 各時間點caspase-3活化度比較有顯著性差異(P＜0.01),活化度由大到小依次為:4h、48h、7h、24h。 結(jié)論 1、各實驗組生物相容性由好到差依次為:鈷鉻合金與2號合金＞3號合金＞銀鈀合金＞鎳鉻合金。 2、2號合金與3號合金可考慮應用于臨床。 3、凋亡相關因子caspase-3在時間梯度的輔助下有可能成為評價金屬材料生物相容性的參考指標之一。
【圖文】：

2號合金組(x4OO)3號合金組(x400)陰性對照組(x400)圖1，各實驗組加樣培養(yǎng)48小時后細胞形態(tài)二、各實驗組4個時間點oD值及caspase一3活化度在4個時間點測定各實驗組OD值(見表2)，并做OD值柱形圖(見圖2)。

各實驗組加樣培養(yǎng)48小時后細胞形態(tài)二、各實驗組4個時間點oD值及caspase一3活化度在4個時間點測定各實驗組OD值(見表2)，并做OD值柱形圖(見圖2)。其中:4h與48h點，各組OD值均高于陰性對照組;7h點，鎳鉻合金組、銀鈕合金組OD值小于陰性對照組;24h點，鎳鉻合金組與3號合金組OD值小于陰性對照組。表2，各實驗組4h、7h、2411、4sh點OD值 4h7h24h48h鎳鉻合金 0.102870.073580.070750.08153銀把合金 0.101950.084730.087210.09163鉆鉻合金 0.169970.092520.087750.114882號合金 0.133050.115470.079950.106833號合金 0.137210.098510
【學位授予單位】：中國醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2009
【分類號】：R783.1

【參考文獻】

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本文編號：2636108