【摘要】： 目的 新材料應(yīng)用于人體前必須經(jīng)過全面的生物學(xué)檢測,現(xiàn)利用凋亡相關(guān)因子caspase-3的表達(dá)強(qiáng)度輔以時(shí)間梯度分析自制齒科合金生物相容性,以期使之應(yīng)用于臨床,使國內(nèi)產(chǎn)品得以推廣發(fā)展。并嘗試從凋亡的角度,在分子水平上對口腔材料生物相容性檢測方法做一定補(bǔ)充;探討caspase-3表達(dá)強(qiáng)度與口腔材料生物相容性的關(guān)聯(lián),以期使之成為評價(jià)口腔材料生物相容性指標(biāo)之一。 材料與方法 1、細(xì)胞培養(yǎng) L929細(xì)胞用含10%胎牛血清的RPMI 1640細(xì)胞培養(yǎng)基在37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)并傳代。 2、細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢測 設(shè)立陰性對照組及實(shí)驗(yàn)組(鎳鉻合金組、銀鈀合金組、鈷鉻合金組、2號合金組、3號合金組),用6種液體分別培養(yǎng)L929細(xì)胞48h后,在熒光顯微鏡下對活細(xì)胞、凋亡細(xì)胞、壞死細(xì)胞進(jìn)行觀測。 3、Caspase-3分光光度法檢測 設(shè)立陰性對照組及實(shí)驗(yàn)組(鎳鉻合金組、銀鈀合金組、鈷鉻合金組、2號合金組、3號合金組),用6種液體分別培養(yǎng)L929細(xì)胞4h、7h、24h、48h后,收集細(xì)胞,提取蛋白,染色后用酶標(biāo)儀測定OD值,計(jì)算caspase-3活化度。 結(jié)果 1、各實(shí)驗(yàn)組加樣培養(yǎng)48h后細(xì)胞形態(tài)。 熒光顯微鏡下觀察,可見各組細(xì)胞量上有差異,各組內(nèi)均有大量凋亡細(xì)胞,鎳鉻合金組內(nèi)可見橙色的壞死細(xì)胞或凋亡晚期細(xì)胞。 2、6種液體作用下caspase-3活化情況 各實(shí)驗(yàn)組caspase-3活性比較有差異(P＜0.05)。Caspase-3活化度大小,由高到低:鈷鉻合金組＞2號合金組＞3號合金組＞銀鈀合金組＞鎳鉻合金組。 3、4h、7h、24h、48h點(diǎn)caspase-3活化情況 各時(shí)間點(diǎn)caspase-3活化度比較有顯著性差異(P＜0.01),活化度由大到小依次為:4h、48h、7h、24h。 結(jié)論 1、各實(shí)驗(yàn)組生物相容性由好到差依次為:鈷鉻合金與2號合金＞3號合金＞銀鈀合金＞鎳鉻合金。 2、2號合金與3號合金可考慮應(yīng)用于臨床。 3、凋亡相關(guān)因子caspase-3在時(shí)間梯度的輔助下有可能成為評價(jià)金屬材料生物相容性的參考指標(biāo)之一。
【圖文】：

2號合金組(x4OO)3號合金組(x400)陰性對照組(x400)圖1，各實(shí)驗(yàn)組加樣培養(yǎng)48小時(shí)后細(xì)胞形態(tài)二、各實(shí)驗(yàn)組4個(gè)時(shí)間點(diǎn)oD值及caspase一3活化度在4個(gè)時(shí)間點(diǎn)測定各實(shí)驗(yàn)組OD值(見表2)，并做OD值柱形圖(見圖2)。

各實(shí)驗(yàn)組加樣培養(yǎng)48小時(shí)后細(xì)胞形態(tài)二、各實(shí)驗(yàn)組4個(gè)時(shí)間點(diǎn)oD值及caspase一3活化度在4個(gè)時(shí)間點(diǎn)測定各實(shí)驗(yàn)組OD值(見表2)，并做OD值柱形圖(見圖2)。其中:4h與48h點(diǎn)，各組OD值均高于陰性對照組;7h點(diǎn)，鎳鉻合金組、銀鈕合金組OD值小于陰性對照組;24h點(diǎn)，鎳鉻合金組與3號合金組OD值小于陰性對照組。表2，各實(shí)驗(yàn)組4h、7h、2411、4sh點(diǎn)OD值 4h7h24h48h鎳鉻合金 0.102870.073580.070750.08153銀把合金 0.101950.084730.087210.09163鉆鉻合金 0.169970.092520.087750.114882號合金 0.133050.115470.079950.106833號合金 0.137210.098510
【學(xué)位授予單位】：中國醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2009
【分類號】：R783.1

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：2636108