【摘要】：目的:研究不同濃度的鮭降鈣素在不同時(shí)間點(diǎn)對(duì)鼠源成牙骨質(zhì)細(xì)胞株OCCM-30的增殖、分化、礦化、凋亡及細(xì)胞周期的影響,為鮭降鈣素是否能夠干預(yù)牙根吸收及其可能的干預(yù)機(jī)制提供前期實(shí)驗(yàn)研究基礎(chǔ)。方法:將體外培養(yǎng)的鼠源成牙骨質(zhì)細(xì)胞株OCCM-30分為6組,加入不同濃度鮭降鈣素(0.1IU/L、1IU/L、10IU/L、100IU/L、1000IU/L)培養(yǎng)的OCCM-30作為實(shí)驗(yàn)組,只加入培養(yǎng)液的OCCM-30作為對(duì)照組。本實(shí)驗(yàn)對(duì)以下項(xiàng)目進(jìn)行檢測(cè):MTT法在不同的時(shí)間(24h、48h、72h)檢測(cè)細(xì)胞的增殖情況;微量酶標(biāo)法檢測(cè)不同時(shí)間點(diǎn)(48h、72h)OCCM-30的堿性磷酸酶(ALP)活性;茜素紅法在第14天測(cè)定細(xì)胞礦化結(jié)節(jié)的含量;使用流式細(xì)胞儀對(duì)培養(yǎng)至第三天的OCCM-30的凋亡及周期進(jìn)行檢測(cè)。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)利用SPSS 18.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。結(jié)果:1.OCCM-30的MTT檢測(cè)結(jié)果:不同濃度的鮭降鈣素作用OCCM-30 24h、48h、72h后,各實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組吸光度值分析結(jié)果顯示:鮭降鈣素作用24h的細(xì)胞增殖差異并不顯著,僅100IU/L組有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),能夠促進(jìn)OCCM-30的增殖;作用48h,10IU/L、100IU/L、1000IU/L的鮭降鈣素對(duì)OCCM-30細(xì)胞增殖有促進(jìn)作用;作用72h,僅有0.1IU/L的鮭降鈣素對(duì)OCCM-30的增殖促進(jìn)作用不顯著,其余濃度(1IU/L、10IU/L、100IU/L、1000IU/L)均明顯促進(jìn)OCCM-30的增殖,且100IU/L促進(jìn)作用最為明顯,差異具有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01),并且在72小時(shí)內(nèi),鮭降鈣素對(duì)OCCM-30的促增殖作用隨著時(shí)間的延長(zhǎng)而增強(qiáng)。2.微量酶標(biāo)法檢測(cè)堿性磷酸酶(ALP)活性結(jié)果:不同時(shí)間點(diǎn)(48h、72h)鮭降鈣素對(duì)OCCM-30細(xì)胞ALP活性呈現(xiàn)促進(jìn)作用,但低濃度無(wú)顯著意義,一定濃度(10-1000IU/L)明顯促進(jìn),其中100IU/L的鮭降鈣素對(duì)OCCM-30細(xì)胞ALP活性的促進(jìn)作用最為明顯,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)。并且72h的OCCM-30的ALP活性均大于48h,說(shuō)明OCCM-30的ALP活性隨時(shí)間增加而提高。3.茜素紅染色實(shí)驗(yàn)測(cè)定礦化實(shí)驗(yàn)結(jié)果:OCCM-30在經(jīng)礦化誘導(dǎo)后可以生成礦化結(jié)節(jié),但低濃度鮭降鈣素(0.1IU/L、1IU/L、10IU/L)的促進(jìn)作用不明顯,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;高濃度鮭降鈣素(100IU/L、1000IU/L)促進(jìn)礦化的作用具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01),且在100IU/L組達(dá)到峰值,表明100IU/L的鮭降鈣素是促進(jìn)OCCM-30礦化的適宜濃度。4.細(xì)胞凋亡實(shí)驗(yàn)結(jié)果:血清饑餓可以引起OCCM-30細(xì)胞的凋亡,而加入不同濃度的鮭降鈣素可以抑制OCCM-30的凋亡,并且抑制效果隨著鮭降鈣素濃度升高而升高,1000IU/L鮭降鈣素抑制細(xì)胞凋亡的效果最為明顯,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)。5.細(xì)胞周期實(shí)驗(yàn)結(jié)果:不同濃度的鮭降鈣素(1IU/L、10IU/L、100IU/L、1000IU/L)均能夠提高細(xì)胞的增殖指數(shù)(PI),且100IU/L的鮭降鈣素對(duì)OCCM-30的增殖指數(shù)提高最為明顯,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)。結(jié)論:1.一定濃度的鮭降鈣素對(duì)OCCM-30的增殖、分化具有促進(jìn)作用,且隨著時(shí)間的增加,鮭降鈣素的促增殖、促分化作用逐漸增強(qiáng)。2.礦化誘導(dǎo)可以刺激OCCM-30生成礦化結(jié)節(jié),且一定濃度的鮭降鈣素對(duì)OCCM-30的礦化結(jié)節(jié)生成具有促進(jìn)作用。3.血清饑餓可以引起OCCM-30的凋亡,鮭降鈣素對(duì)OCCM-30凋亡的抑制作用呈濃度依賴性。4.不同濃度的鮭降鈣素可以影響OCCM-30的細(xì)胞周期,上調(diào)細(xì)胞增殖指數(shù)。
【圖文】：

圖 1 OCCM-30 鏡下圖（100×） 圖 2 OCCM-30 鏡下圖（200×）鮭降鈣素對(duì) OCCM-30 增殖的影響用 MTT 法測(cè)定 OCCM-30 的吸光度，將測(cè)得的結(jié)果計(jì)算后，不同時(shí)間

圖 1 OCCM-30 鏡下圖（100×） 圖 2 OCCM-30 鏡下圖（200×）鮭降鈣素對(duì) OCCM-30 增殖的影響用 MTT 法測(cè)定 OCCM-30 的吸光度，將測(cè)得的結(jié)果計(jì)算后，不同時(shí)間
【學(xué)位授予單位】：南昌大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：R783.5

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本文編號(hào)：2635299