【摘要】：目的： 觀察睡眠剝奪后大鼠顳下頜關(guān)節(jié)髁突表面軟骨組織結(jié)構(gòu)的病理變化及絲裂原活化蛋白激酶激酶4(MKK4)和c-fos基因表達(dá)的變化,明確睡眠剝奪對(duì)大鼠顳下頜關(guān)節(jié)的影響,探討睡眠剝奪造成顳下頜關(guān)節(jié)損傷的可能機(jī)制,揭示睡眠與顳下頜關(guān)節(jié)紊亂病的發(fā)病之間存在的聯(lián)系。 方法： 將120只成年雌性Wistar大鼠隨機(jī)分為6組：睡眠剝奪2天組(SD2d組)、睡眠剝奪4天組(SD4d組)、睡眠剝奪6天組(SD6d組)、睡眠剝奪8天組(SD8d組)、籠養(yǎng)對(duì)照組(CC組)和大平臺(tái)對(duì)照組(LC組),每組20只。 運(yùn)用改良多平臺(tái)法構(gòu)建大鼠睡眠剝奪模型,剝奪大鼠的快速動(dòng)眼睡眠,各睡眠剝奪組大鼠分別于刺激施加相應(yīng)天數(shù)后處死,CC組和LC組與SD8d組一起處死。處死前,運(yùn)用曠場(chǎng)試驗(yàn)對(duì)大鼠的精神狀態(tài)進(jìn)行評(píng)估。取血標(biāo)本測(cè)定大鼠血清中皮質(zhì)酮(CROT)和促腎上腺皮質(zhì)激素(ACTH)的水平變化,對(duì)模型的預(yù)測(cè)效度進(jìn)行評(píng)估。取顳下頜關(guān)節(jié)制作病理切片,HE染色觀察下頜髁突表面軟骨及關(guān)節(jié)盤(pán)的形態(tài)學(xué)變化,免疫組織化學(xué)染色及實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)下頜髁突表面軟骨中MKK4及c-fos的表達(dá)變化。 結(jié)果： 1.曠場(chǎng)試驗(yàn)中,睡眠剝奪各組大鼠的水平得分及垂直得分均明顯高于對(duì)照組大鼠(P0.01)。睡眠剝奪各組大鼠血清中CROT和ACTH的含量與對(duì)照組大鼠相比顯著升高(p0.01)。 2.睡眠剝奪組大鼠隨刺激時(shí)間延長(zhǎng),顳下頜關(guān)節(jié)逐漸出現(xiàn)不同程度的病理性改變。HE染色結(jié)果顯示：睡眠剝奪后,大鼠髁突軟骨表面變得粗糙,出現(xiàn)膠原纖維排列紊亂,纖維斷裂,關(guān)節(jié)盤(pán)出現(xiàn)裂隙等病理性改變,以睡眠剝奪6天組和8天組較為明顯,病變發(fā)生部位與顳下頜關(guān)節(jié)功能相關(guān)。 3.實(shí)時(shí)熒光定量PCR示,CC組與LC組間MMK及c-fos的表達(dá)差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。與對(duì)照組相比,各睡眠剝奪組MKK4及c-fos的表達(dá)均有顯著差異(P0.01)。MKK4的表達(dá)變化呈現(xiàn)隨睡眠剝奪處理時(shí)間延長(zhǎng)而下降的趨勢(shì),其中2天組與4、6、8天組表達(dá)有顯著差異(P0.01),4、6、8天組間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)；各睡眠剝奪組c-fos的表達(dá)變化較對(duì)照組升高,2天組與8天組表達(dá)有顯著差異(P0.01),剩余各睡眠剝奪組間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。 結(jié)論： 1.改良多平臺(tái)法大鼠睡眠剝奪模型通過(guò)剝奪大鼠快速動(dòng)眼睡眠(REM),使大鼠進(jìn)入應(yīng)激狀態(tài),產(chǎn)生焦慮、躁動(dòng)等心理狀態(tài),是一種比較理想的睡眠剝奪動(dòng)物模型。 2.睡眠剝奪會(huì)引發(fā)髁突表面軟骨發(fā)生器質(zhì)性改變,且此改變可能是顳下頜關(guān)節(jié)紊亂病的病理學(xué)基礎(chǔ)。 3.睡眠剝奪可以導(dǎo)致髁突表面軟骨中MKK4表達(dá)降低和c-fos表達(dá)升高,且隨刺激施加時(shí)間的延長(zhǎng),影響更為顯著,這可能成為睡眠剝奪激活髁突表面軟骨破壞的因素之一。
【學(xué)位授予單位】：山東大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號(hào)】：R782.6

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本文編號(hào)：2632475