【摘要】：目的：本研究建立偏側(cè)咀嚼動物模型,檢測偏側(cè)咀嚼過程中雙側(cè)咬肌細(xì)胞線粒體滲透性轉(zhuǎn)換孔道開放程度、線粒體損傷情況、咬肌細(xì)胞凋亡情況以及葡萄糖轉(zhuǎn)運體4表達(dá)情況,并探究其中的相關(guān)關(guān)系,進一步研究偏側(cè)咀嚼致咬肌功能紊亂的機制,為臨床上治療偏側(cè)咀嚼引起的咬肌損傷提供新的思路。 方法：8周齡雌性Wistar大鼠48只,體重約為250-300g,按照隨機實驗原則分為對照組(每周組6只)和實驗組(每周組6只),實驗組大鼠拔除左側(cè)上頜磨牙建立偏側(cè)咀嚼模型,對照組不拔牙。模型建立之后的2周、4周、6周、8周分批處死大鼠,取雙側(cè)咬肌組織,對相關(guān)的指標(biāo)進行檢測。應(yīng)用分光光度法檢測線粒體滲透性轉(zhuǎn)換孔道開放程度的改變；應(yīng)用透射電子顯微鏡觀察咬肌線粒體形態(tài)數(shù)目的改變,計算線粒體損傷指數(shù)；用熒光定量PCR (real-time PCR)法檢測咬肌組織中GLUT4mRNA的相對表達(dá)量;用細(xì)胞凋亡-Hoechst染色試劑盒檢測細(xì)胞凋亡情況。比較實驗組拔牙側(cè)、實驗組非拔牙側(cè)以及對照組大鼠咬肌各項指標(biāo)之間的差別,并分析線粒體損傷指數(shù)、MPTP開放程度以及細(xì)胞凋亡指數(shù)之間的相互關(guān)系。 結(jié)果： (1) MPTP開放程度的變化：實驗組拔牙：側(cè)、實驗組非拔牙側(cè)以及對照組在各周組的差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義(p0.05),且MPTP開放程度為實驗組拔牙側(cè)實驗組非拔牙側(cè)對照組,其中4周組MPTP開放程度最高,8周組最低。 (2)線粒體損傷指數(shù)的變化：線粒體損傷指數(shù)實驗組拔牙側(cè)、實驗組非拔牙側(cè)與對照組僅在2周組、4周組時的差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(p0.05)，，且線粒體損傷指數(shù)評分為對照組實驗組非拔牙側(cè)實驗組拔牙側(cè),其中4周組評分最低,而第6周、第8周無明顯差異(p0.05)。 (3)GLUT4mRNA的相對表達(dá)量：4周組較2周組表達(dá)量增加并達(dá)到最大,而6、8周組表達(dá)量下降。2周、4周組對照組與實驗組拔牙側(cè)；實驗組拔牙側(cè)與非拔牙側(cè)；對照組之間均有明顯差異(p0.05)。6周、8周各組無明顯差異(p0.05)。 (4)凋亡指數(shù)的變化：細(xì)胞凋亡指數(shù)在第4周有較明顯的變化,隨后在6周、8周呈現(xiàn)增加趨勢,但增加趨勢沒有4周明顯。2周組以及6周組拔牙側(cè)、非拔牙側(cè)細(xì)胞凋亡指數(shù)明顯大于對照組(p0.05)；4周組各組間無統(tǒng)計學(xué)差異(p0.05)；8周組非拔牙側(cè)凋亡指數(shù)明顯增加,與對照側(cè)有顯著性差異(p0.05)。 結(jié)論：偏側(cè)咀嚼引起咬肌組織中MPTP開放程度的改變,細(xì)胞內(nèi)外相關(guān)因子發(fā)生變化失去平衡導(dǎo)致組織線粒體損傷、細(xì)胞出現(xiàn)明顯的凋亡,同時引起GLUT4的表達(dá)變化,影響咬肌的能量代謝。MPTP作為重要的信號通道,與線粒體損傷以及細(xì)胞凋亡密切相關(guān),參與細(xì)胞的能量代謝的調(diào)控,其開放程度可能影響咬肌的功能狀態(tài),研究其開放機制的調(diào)控可為臨床上治療TMD引起的的咬肌功能紊亂綜合癥提供新的理論依據(jù)。
【學(xué)位授予單位】：山東大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號】：R783.5

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：2622834