【摘要】：目的:許多研究已經(jīng)證實FOXP3(叉狀頭/翅膀狀螺旋轉(zhuǎn)錄因子3,forkhead box P3)除了在調(diào)節(jié)性T細(xì)胞(regulatory T cells,Tregs)上有表達(dá)之外,在多種腫瘤細(xì)胞中也有表達(dá),并且不同腫瘤細(xì)胞中的FOXP3對腫瘤的進(jìn)展起著不同的作用。中性粒細(xì)胞作為癌微環(huán)境中常見的免疫細(xì)胞,在不同癌微環(huán)境中,其對腫瘤的進(jìn)展也起著不同的作用。然而,FOXP3在中性粒細(xì)胞上的表達(dá)及其功能并未見有相關(guān)研究。因此,本研究主要是探討癌微環(huán)境中的中性粒細(xì)胞FOXP3的表達(dá)對口腔鱗狀細(xì)胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)進(jìn)展的影響。方法:1.將SCC-9(人舌鱗癌細(xì)胞系)細(xì)胞與中性粒細(xì)胞在96孔板中共培養(yǎng)并用人重組白細(xì)胞介素8(Interleukin-8,IL-8)處理;24小時后,CCK-8(細(xì)胞計數(shù)試劑盒,Cell Counting Kit 8)法測定SCC-9細(xì)胞增殖。2.使用IL-8處理中性粒細(xì)胞,12小時后,采用實時熒光定量PCR(Real-time quantitative PCR,RT-q PCR)分析FOXP3 m RNA在中性粒細(xì)胞的表達(dá)。3.將SCC-9細(xì)胞與中性粒細(xì)胞在96孔板中共培養(yǎng)并用P60(FOXP3特異性抑制劑)抑制FOXP3蛋白的作用;24小時后,CCK-8法測定SCC-9細(xì)胞增殖。4.收集OSCC癌組織標(biāo)本,使用免疫熒光組織化學(xué)技術(shù)檢測OSCC癌微環(huán)境中的中性粒細(xì)胞FOXP3蛋白的表達(dá)并分析其與OSCC患者臨床分期之間的關(guān)系。5.使用免疫熒光組織化學(xué)技術(shù)檢測OSCC組織中IL-8蛋白的表達(dá)。結(jié)果:1.中性粒細(xì)胞、IL-8共同促進(jìn)SCC-9細(xì)胞增殖。2.IL-8下調(diào)中性粒細(xì)胞FOXP3 m RNA的表達(dá)。3.中性粒細(xì)胞FOXP3蛋白被抑制后促進(jìn)SCC-9細(xì)胞增殖。4.OSCC癌微環(huán)境中的中性粒細(xì)胞FOXP3蛋白的表達(dá)在臨床Ⅳ期組低于臨床Ⅱ期組(P=0.001)和臨床Ⅲ期組(P=0.008)。5.OSCC癌組織中IL-8蛋白的表達(dá)高于癌旁組織。結(jié)論:癌微環(huán)境中的IL-8可以趨化中性粒細(xì)胞,且由IL-8介導(dǎo)的中性粒細(xì)胞FOXP3表達(dá)的下調(diào)可以促進(jìn)OSCC進(jìn)展。
【圖文】：

胞、IL-8 共同促進(jìn) SCC-9 細(xì)胞增殖環(huán)境中同時存在著中性粒細(xì)胞和 IL-8[23]。胞、IL-8 對 OSCC 細(xì)胞增殖的影響，我們細(xì)胞在 96 孔板中共培養(yǎng)，24 小時之后 CCK們的實驗結(jié)果（如圖 2-1）證實，，IL-8、中胞，共同促進(jìn) SCC-9 細(xì)胞增殖(P < 0.001)。胞共培養(yǎng) 24 小時，與對照組相比差異無統(tǒng)單獨作用于 SCC-9 細(xì)胞 24 小時，與對照組 0.684）。

s. The result confirmed that neutrophils and IL-8 promoted SCent was independently repeated 3 times. Data are mean ± SD中性粒細(xì)胞 FOXP3 mRNA 的表達(dá)，我們的實驗結(jié)果證實 IL-8、中性粒細(xì)胞 IL-8 是否能夠影響中性粒細(xì)胞 FOXP3 的變化是否會對 SCC-9 細(xì)胞的增殖產(chǎn)生影響們用重組人 IL-8 細(xì)胞因子刺激中性粒細(xì)胞測中性粒細(xì)胞 FOXP3 mRNA 的表達(dá)。我們的-8 能夠下調(diào)中性粒細(xì)胞 FOXP3 mRNA 的表達(dá)的 0.246 ± 0.093 倍(P = 0.005)。
【學(xué)位授予單位】：廣西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號】：R739.8

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本文編號：2620295