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膠原蛋白海綿對(duì)拔牙創(chuàng)愈合過程中基因表達(dá)的影響

發(fā)布時(shí)間:2020-03-31 22:49
【摘要】:拔牙創(chuàng)愈合是一個(gè)涉及從血凝塊形成,血凝塊機(jī)化、肉芽組織形成,上皮覆蓋拔牙創(chuàng),最后骨組織開始形成的復(fù)雜的骨愈合過程。在這個(gè)過程中,拔牙創(chuàng)的愈合及牙槽骨的骨量維持對(duì)于種植義齒修復(fù)極為關(guān)鍵。目前文獻(xiàn)中報(bào)道的促進(jìn)拔牙創(chuàng)愈合的方法因手術(shù)方式復(fù)雜,價(jià)格昂貴,患者心理拒絕等因素很難在臨床普及應(yīng)用。因而,探索一種簡便操作,可有效減少骨吸收,縮短修復(fù)等待時(shí)間的方法極為迫切。膠原蛋白海綿有良好的生物相容性、較強(qiáng)的止血效果及吸附功能,便于局部沉積鈣離子和磷酸根離子,能為拔牙后骨腔的血塊凝集提供足夠的立體空間,可有效地促進(jìn)成骨。目前臨床中普遍采用膠原蛋白海綿填塞頜骨囊腫手術(shù)后的骨腔及埋伏牙骨腔取得良好的止血效果,同時(shí)囊腔成骨速度也明顯提高。關(guān)于膠原蛋白海綿促進(jìn)牙槽窩愈合的實(shí)驗(yàn)研究相繼被報(bào)道,但缺乏基因水平研究。本實(shí)驗(yàn)旨在研究膠原蛋白海綿植入對(duì)于牙槽窩組織中堿性磷酸酶(alkalinephosphatase,ALP)基因、Osterix基因、Runt相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子-2(runt-related transcription factor-2,Runx2)基因、血管內(nèi)皮生長因子(vascular endothelial growth factor,Vegf)基因早期表達(dá)水平變化的影響,為探索膠原蛋白海綿促進(jìn)成骨的機(jī)制研究提供了初步的參考資料,進(jìn)而從分子水平為膠原蛋白海綿的臨床應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。研究目的探索膠原蛋白海綿植入對(duì)牙槽窩組織成骨相關(guān)基因的表達(dá)水平變化的影響。研究方法1.建立大鼠拔牙模型:用10%水合氯醛將SD大鼠麻醉后,仰臥位固定于手術(shù)臺(tái)上,術(shù)區(qū)采用碘伏消毒,分離右側(cè)上頜第一磨牙牙齦,用口腔探針的三彎端從上頜第一磨牙腭側(cè)插入根分叉,輕輕撬動(dòng),直至牙齒松動(dòng)脫位,將膠原蛋白海綿放入牙槽窩,至骨水平,縫合固定。左側(cè)為對(duì)照側(cè),同法拔除上頜第一磨牙,復(fù)位縫合,縫線均采用5-0可吸收縫線,均縫合一針。注意觀察大鼠呼吸,避免窒息。老鼠術(shù)后復(fù)蘇良好,飲食活動(dòng)正常。分別在術(shù)后1周、2周、4周、8周各處死老鼠4只,取老鼠拔牙窩的牙槽骨及肉芽組織,進(jìn)行基因檢測。2.運(yùn)用實(shí)時(shí)定量PCR檢測成骨相關(guān)基因表達(dá):按照試劑盒操作步驟,對(duì)樣本進(jìn)行RNA提取,反轉(zhuǎn)錄后得到cDNA,置于冰箱,-20℃保存。之后運(yùn)用實(shí)時(shí)定量PCR法測定相關(guān)基因表達(dá)情況。采用2-△△CT法計(jì)算實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組相關(guān)基因的表達(dá)差異。研究結(jié)果1.ALP基因、Osterix基因、Runx2基因、Vegf基因在實(shí)驗(yàn)側(cè)組織及對(duì)照側(cè)組織中均有表達(dá),且在術(shù)后1周、2周、4周、8周,實(shí)驗(yàn)側(cè)組織各基因表達(dá)水平顯著高于對(duì)照側(cè)。2.實(shí)驗(yàn)側(cè)組織中,ALP基因表達(dá)高峰出現(xiàn)在術(shù)后第2周,Osterix基因、Runx2基因、Vegf基因表達(dá)高峰出現(xiàn)在術(shù)后第4周。結(jié)論1.ALP基因、Osterix基因、Runx2基因、Vegf基因在實(shí)驗(yàn)側(cè)組織及對(duì)照側(cè)組織中均有表達(dá),膠原蛋白海綿填塞拔牙創(chuàng)能夠在一定程度上調(diào)這些基因的表達(dá)水平。2.膠原蛋白海綿填塞拔牙創(chuàng)后ALP基因、Osterix基因、Runx2基因、Vegf基因的表達(dá)量隨時(shí)間推移呈現(xiàn)先上升隨后下降的趨勢。
【圖文】:

膠原蛋白海綿對(duì)拔牙創(chuàng)愈合過程中基因表達(dá)的影響


術(shù)后第1周

膠原蛋白海綿對(duì)拔牙創(chuàng)愈合過程中基因表達(dá)的影響


術(shù)后第2周
【學(xué)位授予單位】:山東大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2019
【分類號(hào)】:R782.11

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本文編號(hào):2609676

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