張應(yīng)力刺激對大鼠髁突軟骨細(xì)胞col-Ⅱ和AGG mRNA表達(dá)影響的實驗研究
發(fā)布時間:2020-03-25 17:47
【摘要】:目的:髁突軟骨是正畸臨床上功能矯形治療的主要“靶點”之一,在矯形力的作用下其能否發(fā)生適應(yīng)性改建在很大程度上決定著功能矯形治療的成敗,一直被國內(nèi)外學(xué)者所關(guān)注。我們的實驗先對SD大鼠顳下頜關(guān)節(jié)髁狀突軟骨細(xì)胞進(jìn)行原代培養(yǎng),探討周期性張應(yīng)力對髁突軟骨細(xì)胞主要細(xì)胞外基質(zhì)Ⅱ型膠原(type-Ⅱ collagen Col-Ⅱ)和聚集蛋白聚糖(aggrecan AGG)合成的影響,為治療給予一定理論上的依據(jù)。 方法:①SD大鼠顳下頜關(guān)節(jié)髁狀突軟骨細(xì)胞體外環(huán)境培養(yǎng)與細(xì)胞鑒定:取2周齡的SD大鼠20只斷頸處死后應(yīng)用機(jī)械分離-酶消化聯(lián)合法分離雙側(cè)髁突軟骨細(xì)胞進(jìn)行原代體外培養(yǎng),甲苯胺藍(lán)染色證明所培養(yǎng)的細(xì)胞合格。②周期性張應(yīng)力刺激模型建立與Col-Ⅱ AGG mRNA半定量分析:采用細(xì)胞牽張加力儀器對所培養(yǎng)的細(xì)胞(第3代)分別加力0h、1h、6h、12h和24h的周期性張應(yīng)力,應(yīng)力拉伸率為10%1HZ。加過力后將不同加力組的細(xì)胞非別放置,提取加力細(xì)胞的總RNA,反轉(zhuǎn)錄PCR技術(shù)測定主要細(xì)胞外基質(zhì)Col-Ⅱ和AGG表達(dá)變化情況。 結(jié)果:①采用機(jī)械分離-酶化學(xué)消化聯(lián)合法獲得數(shù)量足夠的顳下頜關(guān)節(jié)髁狀突軟骨細(xì)胞,經(jīng)過細(xì)胞特異表型的觀察,確認(rèn)我們的細(xì)胞是想要的大鼠顳下頜關(guān)節(jié)髁狀突軟骨細(xì)胞。②半定量PCR顯示:與對照組(0h組)相比,加力1h時Col-Ⅱ和AGG的表達(dá)均增加;加力6h時Col-Ⅱ和AGG表達(dá)均顯著增加(p0.05);細(xì)胞加力的時間到12h時Col-Ⅱ和AGG表達(dá)均開始下降;當(dāng)加力至24h時二者表達(dá)量均顯著降低(p0.05)。 結(jié)論:①采用機(jī)械-酶化學(xué)聯(lián)合法完全可以消化得到大鼠顳下頜關(guān)節(jié)髁狀突軟骨細(xì)胞。 ②Col-Ⅱ AGG等主要的細(xì)胞外的基質(zhì)明顯受到周期性張應(yīng)力刺激的影響。 ③適宜時間的張應(yīng)力刺激可增強(qiáng)Col-Ⅱ AGG的合成有利于髁突軟骨細(xì)胞的增殖及改建;過長時間的張應(yīng)力刺激使基質(zhì)的合成受到明顯抑制不利于髁突軟骨的改建。
【學(xué)位授予單位】:青島大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2012
【分類號】:R783.5
本文編號:2600211
【學(xué)位授予單位】:青島大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2012
【分類號】:R783.5
【參考文獻(xiàn)】
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3 黃生高;王明朗;鐘孝歡;王會欣;;大鼠髁狀突軟骨細(xì)胞體外分離培養(yǎng)和壓力模型的構(gòu)建[J];實用預(yù)防醫(yī)學(xué);2007年04期
,本文編號:2600211
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