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β-磷酸三鈣復(fù)合成骨細(xì)胞特異性多肽植入兔拔牙窩的實(shí)驗(yàn)研究

發(fā)布時(shí)間:2020-03-20 20:26
【摘要】:拔牙位點(diǎn)保存術(shù)(ARP Alveolar ridges preservation/site preservation)是指在拔牙期間或拔牙術(shù)后,采取的能減少牙槽骨吸收以保存軟硬組織解剖形態(tài)并能促進(jìn)牙槽骨新骨形成的方法。骨組織工程(Bone tissue engineering,BTE)應(yīng)用組織工程技術(shù)在體外人工培養(yǎng)具有生物活性的組織,再將其植入體內(nèi)缺損組織,以恢復(fù)、維持、或改善缺損組織并使其重建功能。成骨細(xì)胞特異性多肽是本課題組前期研究成果,以人顱骨成骨細(xì)胞為陽(yáng)性靶細(xì)胞,人牙齦成纖維細(xì)胞為陰性吸附細(xì)胞,采用以噬菌體為載體的噬菌體隨機(jī)肽庫(kù)篩選方法,對(duì)噬菌體展示十二肽庫(kù)進(jìn)行全細(xì)胞差減篩選獲得的。氨基酸序列為VLAVPWSEPGYL,具有結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、易消毒儲(chǔ)存、良好的生物相容性等優(yōu)點(diǎn)。本實(shí)驗(yàn)將β-磷酸三鈣與成骨細(xì)胞特異性多肽復(fù)合植入兔拔牙窩內(nèi),以評(píng)價(jià)該成骨細(xì)胞特異性多肽在拔牙窩位點(diǎn)保存中的成骨作用,以期為位點(diǎn)保存技術(shù)提供新的方法及種植術(shù)區(qū)骨量不足的問(wèn)題提供新的思路和方法。具體內(nèi)容如下:第一部分:β-磷酸三鈣/成骨細(xì)胞特異性多肽復(fù)合材料的制備以二甲基亞砜(1ul/mg)為溶劑溶解多肽粉劑,加入去離子水配制多肽質(zhì)量濃度為160ug/ml,無(wú)菌條件下在超凈工作臺(tái)上0.22um濾膜過(guò)濾除菌。將β-TCP支架放到成骨細(xì)胞特異性多肽多肽溶液中,輕微震蕩以確保成骨細(xì)胞特異性多肽多肽溶液充分吸附到β-TCP中,室溫條件下放置24h,植入拔牙窩缺損區(qū)。掃描電鏡見(jiàn)β-磷酸三鈣的三維空間及微小空隙。第二部分:建立兔拔牙窩位點(diǎn)保存缺損動(dòng)物模型27只健康新西蘭兔,建立右下頜中切牙拔牙窩位點(diǎn)保存缺損模型。隨機(jī)分組,實(shí)驗(yàn)組植入β-磷酸三鈣/成骨細(xì)胞特異性多肽復(fù)合物,材料組植入β-磷酸三鈣(骨粉),空白組不植入任何材料及藥物。術(shù)后4、8、12周活體行CBCT掃描、離體標(biāo)本口腔X線掃描、HE染色檢測(cè)成骨效果。結(jié)果表明:1:術(shù)后4、8、12周X線測(cè)量剩余牙槽嵴相對(duì)長(zhǎng)度(剩余牙槽嵴相對(duì)長(zhǎng)度=拔牙側(cè)剩余牙槽長(zhǎng)度/非拔牙側(cè)剩余牙槽長(zhǎng)度)可見(jiàn):實(shí)驗(yàn)組剩余牙槽嵴相對(duì)長(zhǎng)度大于材料組及空白組,材料組大于空白組,且各組之間的比較具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。2:術(shù)后4、8、12周活體CBCT橫截面重建可見(jiàn):隨著時(shí)間推移,實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組材料逐漸降解,新生骨量增加,骨密度增高。12周時(shí)實(shí)驗(yàn)組材料已完全降解,拔牙窩基本修復(fù),新生骨與周?chē)琴|(zhì)基本融合;對(duì)照組支架材料仍有少量未降解,新生骨密度較周?chē)9琴|(zhì)低,但優(yōu)于空白組。3:術(shù)后4、8、12周組織形態(tài)學(xué)觀察可見(jiàn):實(shí)驗(yàn)組拔牙窩內(nèi)成骨細(xì)胞較活躍,新生骨量明顯強(qiáng)于材料組及空白組。結(jié)論:成骨細(xì)胞特異性多肽可促進(jìn)兔拔牙窩的骨再生與修復(fù),達(dá)到拔牙窩位點(diǎn)保存的目的。
【學(xué)位授予單位】:安徽醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2018
【分類(lèi)號(hào)】:R782.11

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào):2592150

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