【摘要】：目的:通過建立改良的大鼠正畸牙移動模型,以弱激光照射大鼠正畸牙牙周組織,探討弱激光照射對牽張側(cè)牙周膜細胞成骨分化的促進作用以及對MAPK信號通路的影響,為弱激光在口腔正畸固定矯治中的應(yīng)用提供理論基礎(chǔ)。方法:1.改良大鼠牙移動模型的建立及弱激光照射43只健康Wistar大鼠,雄性、6周齡,隨機選取3只為空白組,其余大鼠上頜左右兩側(cè)隨機分為0s組、5s組、10s組和20s組。將大鼠兩顆上前牙整體作為支抗,以40g的力牽引雙側(cè)上頜第一磨牙向近中移動�？瞻捉M不作處理。雙側(cè)正畸加力模型建成后,使用波長650nm,功率100mw弱激光治療儀分別以能量密度15.92J/cm2、31.84J/cm2、63.68J/cm2對上頜第一磨牙的頰側(cè)、腭側(cè)、近中側(cè)牙槽粘膜進行照射,0天-6天每天一次。0s組只加力,不照射。2.于激光照射后的第1d、3d、5d、7d、14d各取8只大鼠使用4%中性甲醛溶液經(jīng)心臟灌注處死,空白組隨1d組一塊處死,取包含上頜第一磨牙的牙槽骨制作石蠟切片并進行HE染色,400倍光鏡下對牽張側(cè)牙周膜成骨細胞(osteoblast,OB)計數(shù),使用統(tǒng)計學(xué)軟件SPSS17.0進行統(tǒng)計分析。3.取各組的組織蠟塊切片進行免疫組織化學(xué)染色。400倍光鏡下在每張切片中正畸牙牙周膜張力區(qū)隨機選擇5個視野,采用Image-Pro Plus 6.0圖像分析軟件計算積分光密度值。使用統(tǒng)計學(xué)軟件SPSS17.0進行統(tǒng)計分析比較0s組、5s組、10s組ALP、Runx2及0s組、5s組的p-ERK1/2、p-JNK的表達情況,并做相關(guān)性分析。結(jié)果:1.在加力3d時,0s組、5s組、10s組和20s組OB數(shù)目均有增加,5s組、10s組OB數(shù)量最多,較0s組和20s組差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。5d時,各組OB數(shù)目進一步增加,5s組10s組20s組0s組;除0s組跟20s組比較沒有統(tǒng)計學(xué)差異外,其余各組兩兩比較均有統(tǒng)計學(xué)差異(P0.05)。7d時,5s組和10s組OB數(shù)目達到峰值,5s組10s組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。14d時,5s組和10s組OB數(shù)目開始減少,同時0s組和20s組OB數(shù)目達到峰值,但低于5s組和10s組;5s組10s組20s組0s組,除5s組跟10s組沒有統(tǒng)計學(xué)差異外,其余均有統(tǒng)計學(xué)差異(P0.05)。2.alp主要在成骨細胞以及成牙骨質(zhì)細胞的胞漿及間質(zhì)中表達。0s組3d、5d時alp表達較強,5d時最強;5s組、10s組1d、3d、5d均有大量的alp表達;3d時10s組達到峰值,iod值10s組5s組0s組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(p0.05);5d時0s組、5s組達到峰值,10s組迅速下降低于0s組,iod值5s組0s組10s組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(p0.05)。runx2主要在牙髓細胞和牙周膜細胞胞核中表達。在1d、3d、5d、7d時各組的表達逐漸增強,14d時有所下降。1d、3d時,各組iod值差異不大。5d時,5s組和10s組iod值大于0s組(p0.05),差異有統(tǒng)計學(xué)意義(p0.05);5s組和10s組之間沒有統(tǒng)計學(xué)差異。7d時,iod值5s組10s組0s組,但沒有統(tǒng)計學(xué)差異。14d時,iod值5s組10s組0s組,三組兩兩比較均有統(tǒng)計學(xué)差異(p0.05)。3.p-erk1/2及p-jnk在牙周膜細胞胞核和胞質(zhì)內(nèi)表達。0s組、5s組5d時p-erk1/2陽性細胞數(shù)量較1d、3d時增多,染色變深,5s組陽性表達最顯著;7d時0s組陽性染色進一步增強,5s組則減弱;14d兩組陽性染色均較7d時減弱。3d、5d時iod值5s組0s組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義。1d、3d,14d時,p-jnk在0s組呈弱陽性表達,5s組較0s組陽性表達顯著;5d、7d陽性染色加深;5s組7d時陽性最強,0s組5d時陽性最強;各時間點iod值5s組0s組,除5d時差異無統(tǒng)計學(xué)意義(p0.05)外,其余時間點差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(p0.05)。4.相關(guān)性分析顯示:alp、runx2與p-erk1/2的表達呈正相關(guān)(r=0.399、0.799,p=0.024、0.0000.01);runx2與p-jnk的表達呈正相關(guān)(r=0.794,p=0.0000.01);alp與p-jnk的表達無顯著相關(guān)性,(r=0.262,p=0.1480.05)。結(jié)論:1.llli(能量密度15.92j/cm2和31.84j/cm2)能夠促進大鼠正畸牙牽張側(cè)牙周組織改建及成骨細胞分化;前者的作用更顯著。2.llli(能量密度15.92j/cm2和31.84j/cm2)能夠增強牽張側(cè)牙周膜成骨分化相關(guān)蛋白alp、runx2的表達,前者的作用更顯著。3.15.92j/cm2的llli能夠增強牽張側(cè)牙周膜細胞p-erk1/2、p-jnk的陽性表達。erk1/2、jnk信號通路可能參與了弱激光照射促進正畸牽張側(cè)牙周膜細胞成骨分化及骨改建過程。
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【學(xué)位授予單位】：青島大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R783.5

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1 毛釗;影響牙周膜細胞生物學(xué)功能的相關(guān)因素[J];醫(yī)學(xué)研究生學(xué)報;2003年06期

2 凌均h，

本文編號：2394152