【摘要】：齲病是人類最常見的細(xì)菌感染性疾病之一,嚴(yán)重危害口腔健康。防齲亞單位疫苗是預(yù)防齲病的有效途徑。但如何提高防齲亞單位疫苗的免疫效果仍是一個(gè)重要課題。鞭毛蛋白是TLR5的配體,表現(xiàn)出良好的佐劑活性,能有效激活樹突狀細(xì)胞的MyD88依賴型信號(hào)通路,誘導(dǎo)細(xì)胞因子和趨化因子的表達(dá),促進(jìn)T、B淋巴細(xì)胞向引流淋巴結(jié)的遷移,從而增加抗原特異性淋巴細(xì)胞對(duì)抗原的識(shí)別。PIKA與AddaVax佐劑也表現(xiàn)出較好的佐劑活性,已被應(yīng)用于許多疫苗研究。 本研究將鞭毛蛋白、PIKA及AddaVax三種佐劑分別與防齲亞單位疫苗PAc聯(lián)合以不同免疫途徑接種小鼠,探索含鞭毛蛋白、PIKA及AddaVax佐劑的防齲亞單位疫苗的免疫效果,并分析不同佐劑和接種途徑對(duì)防齲亞單位疫苗免疫效應(yīng)的影響。 目的：研究含鞭毛蛋白、AddaVax及PIKA佐劑的防齲亞單位疫苗的免疫保護(hù)效應(yīng)。 材料與方法： 1.分別采用鞭毛蛋白、AddaVax及PIKA佐劑聯(lián)合防齲亞單位疫苗PAc以不同給藥途徑免疫小鼠,并在免疫前及免疫后2、4、6、8、10、12、16及20周收集小鼠的唾液和血液樣本,應(yīng)用ELISA技術(shù)檢測(cè)樣本中特異性抗PAc IgA和抗PAc IgG抗體的濃度,并對(duì)血清中特異性抗體亞型IgG1和IgG2a進(jìn)行檢測(cè),分析IgGl/IgG2a匕值； 2.在末次免疫后8周處死小鼠,取脾,進(jìn)行脾細(xì)胞刺激試驗(yàn),提取脾細(xì)胞總RNA,用RT-qPCR技術(shù)檢測(cè)脾細(xì)胞中的IL-4及IFN-γ mRNA的轉(zhuǎn)錄水平； 3.收集脾細(xì)胞上清,檢測(cè)上清中細(xì)胞因子IL-4及IFN-7的分泌水平。 結(jié)果： 1.在第4和6周時(shí),AddaVax+PAc頰黏膜下注射組與PIKA+PAc滴鼻組唾液抗PAc IgA水平無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p0.05),但該兩組抗體水平均顯著高于其他各組(p0.05)。第8周時(shí),PIKA+PAc滴鼻組抗體水平顯著高于其他各組(p0.01)。 2.所有組的血清抗PAc IgG抗體水平均在第6周時(shí)達(dá)高峰。在除第0周外的其他檢測(cè)時(shí)間點(diǎn),AddaVax+PAc皮下注射組和AddaVax+PAc頰黏膜下注射組小鼠血清抗PAc IgG水平均高于其他四組(p0.01)。AddaVax+PAc皮下注射組與Adda Vax+PAc頰黏膜下注射組比較,除第0、8、10和16周外,其余時(shí)間點(diǎn)都有顯著性差異(p0.05),尤其在抗體水平高峰第6周(p0.01)。各免疫組第0周時(shí)(接種疫苗前)血清IgGl/IgG2a較低,自免疫后第2周呈起逐漸升高的趨勢(shì)。 3.經(jīng)PAc刺激48h后,脾細(xì)胞IL-4mRNA轉(zhuǎn)錄水平在各實(shí)驗(yàn)組之間無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p0.05),但均低于陽性對(duì)照組(p0.01);脾細(xì)胞IFN-γ mRNA轉(zhuǎn)錄在各實(shí)驗(yàn)組之間無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p0.05),但均低于陽性對(duì)照組(p0.01)。 4.經(jīng)PAc刺激48h后,各實(shí)驗(yàn)組的脾細(xì)胞上清IL-4水平均高于陰性對(duì)照組(空白未刺激組)(p0.05)；AddaVax+PAc皮下注射組的IL-4水平顯著高于PIKA+PAc滴鼻組(p0.01),且此兩組的IL-4水平均高于陽性對(duì)照組(conA組)(p0.01)。所有實(shí)驗(yàn)組及對(duì)照組脾細(xì)胞上清的IFN-γ水平之間無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p0.05)。 結(jié)論：以滴鼻途徑,不同佐劑分別與防齲亞單位疫苗PAc共同免疫小鼠后所誘導(dǎo)的免疫效應(yīng)的影響不一樣：PIKA對(duì)防齲亞單位疫苗PAc有較好的黏膜佐劑效應(yīng),可有效促進(jìn)小鼠唾液特異性IgA濃度的升高。經(jīng)AddaVax+PAc以不同免疫途徑接種小鼠時(shí),產(chǎn)生不同的免疫效應(yīng)；經(jīng)注射免疫途徑所產(chǎn)生的免疫效應(yīng)顯著優(yōu)于鼻黏膜滴注途徑。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：武漢大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號(hào)】：R781.1

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 瞿愛東;蛋白質(zhì)亞單位疫苗的前沿設(shè)計(jì)[J];中國(guó)生物制品學(xué)雜志;2002年02期

2 郭雋,孫萬邦,余妍,李成文;CJ亞單位疫苗誘導(dǎo)淋巴細(xì)胞活化的實(shí)驗(yàn)研究[J];中國(guó)衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志;2005年09期

3 董明;Ⅰ、Ⅱ型單純皰疹病毒亞單位疫苗的制備和效力[J];國(guó)外醫(yī)學(xué).預(yù)防.診斷.治療用生物制品分冊(cè);1987年06期

4 蔣常生;;有效的抗包膜動(dòng)物病毒亞單位疫苗[J];國(guó)外醫(yī)學(xué).生物制品分冊(cè);1979年05期

5 蘇雄;;實(shí)驗(yàn)性傳染性牛鼻氣管炎亞單位疫苗的評(píng)價(jià)[J];國(guó)外醫(yī)學(xué).生物制品分冊(cè);1982年03期

6 王善輝;李培鋒;王希良;;人呼吸道合胞病毒亞單位疫苗的研究進(jìn)展[J];微生物學(xué)免疫學(xué)進(jìn)展;2009年01期

7 邵繼平;姜世勃;劉叔文;;基于中國(guó)HIV-1 CRF01_AE重組亞型gp41 NHR結(jié)構(gòu)域亞單位疫苗的研究[J];細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志;2012年12期

8 田文莉;邵銘;祁驥;劉淑珍;谷X;李長(zhǎng)貴;楊旭;李小強(qiáng);;一種用于流感病毒亞單位疫苗純度分析的改進(jìn)方法[J];生物技術(shù)通訊;2013年01期

9 郭海英;郭立君;;巨細(xì)胞病毒亞單位疫苗的研究進(jìn)展[J];中國(guó)生物制品學(xué)雜志;2007年03期

10 田淑芳,龔新昌,王秀平;流行性感冒病毒血凝素亞單位疫苗在小鼠體內(nèi)免疫效果觀察[J];病毒學(xué)報(bào);1986年02期

相關(guān)會(huì)議論文 前10條

1 曹瑞兵;周國(guó)棟;陳溥言;;豬α干擾素對(duì)豬圓環(huán)病毒2型亞單位疫苗的免疫效果的影響[A];中國(guó)畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)家畜傳染病學(xué)分會(huì)第六屆理事會(huì)第二次會(huì)議暨教學(xué)專業(yè)委員會(huì)第六屆代表大會(huì)論文集[C];2006年

2 于光;;Ⅰ型單純皰疹亞單位疫苗初步研究[A];湖北省暨武漢市免疫學(xué)會(huì)第八屆學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2003年

3 田文莉;邵明;祁驥;劉淑珍;谷X;李長(zhǎng)貴;李小強(qiáng);;一種流感病毒亞單位疫苗血凝素含量的分析[A];2011年中國(guó)藥學(xué)大會(huì)暨第11屆中國(guó)藥師周論文集[C];2011年

4 邵繼平;夏承來;姜世勃;劉叔文;;NHR三聚體作為艾滋病亞單位疫苗的研究[A];第十屆全國(guó)抗炎免疫藥理學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2010年

5 李s，

本文編號(hào)：2323953