【摘要】：目的探討乙肝病毒X蛋白結(jié)合蛋白(HBXIP)對腺樣囊性癌細胞株ACC-2生物學行為的影響及其機制。方法采用siRNA轉(zhuǎn)染法抑制腺樣囊性癌細胞株ACC-2中HBXIP的表達;實時PCR和Western blotting檢測HBXIP基因及蛋白表達水平;MTT法檢測HBXIP-siRNA對細胞增殖的影響;transwell法檢測HBXIP-siRNA對細胞侵襲的影響;劃痕實驗檢測HBXIP-siRNA對細胞遷移的影響;蛋白印跡方法檢測HBXIP-siRNA對PI3K/Akt信號通路中Akt、p-Akt、PI3K、p-PI3K及對S100A4蛋白表達量的影響。結(jié)果HBXIP在ACC-2中高表達,HBXIP-siRNA成功轉(zhuǎn)染細胞株。MTT結(jié)果顯示,48、72、96 h時實驗組中存活的細胞數(shù)低于對照組,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05);劃痕實驗結(jié)果顯示,實驗組細胞遷移率明顯低于對照組(P0.01);transwell小室實驗結(jié)果顯示,實驗組中細胞侵襲個數(shù)明顯低于對照組(P0.01);蛋白印跡結(jié)果顯示,相對于對照組,實驗組細胞中p-Akt、p-PI3K及S100A4的表達量隨著HBXIP基因沉默而相對降低。結(jié)論 HBXIP可促進腺樣囊性癌細胞株ACC-2增殖、遷移和侵襲,其機制可能與促進Akt、PI3K磷酸化及增加S100A4蛋白表達量有關。
[Abstract]:Objective to investigate the effect of hepatitis B virus X protein binding protein (HBXIP) on the biological behavior of adenoid cystic carcinoma cell line ACC-2 and its mechanism. Methods siRNA transfection method was used to inhibit the expression of HBXIP in adenoid cystic carcinoma cell line ACC-2, real-time PCR and Western blotting were used to detect the expression of HBXIP gene and protein, MTT method was used to detect the effect of HBXIP-siRNA on cell proliferation, and transwell method was used to detect the effect of HBXIP-siRNA on cell invasion. The effect of HBXIP-siRNA on cell migration was detected by scratch assay, and the effect of HBXIP-siRNA on Akt,p-Akt,PI3K,p-PI3K and S100A4 protein expression in PI3K/Akt signaling pathway was detected by Western blot. Results HBXIP was highly expressed in ACC-2, and HBXIP-siRNA was successfully transfected into the cell line. The results of MTT showed that the number of cells survived in the experimental group was lower than that in the control group at 48 ~ 72h, the difference was statistically significant (P0.05), and the scratch test showed that the number of cells survived in the experimental group was significantly lower than that in the control group. The cell migration rate in the experimental group was significantly lower than that in the control group (P0.01); transwell chamber experiment results showed that the number of cell invasion in the experimental group was significantly lower than that in the control group (P0.01). In experimental group, the expression of p-AktPI3K and S100A4 decreased with the silencing of HBXIP gene. Conclusion HBXIP can promote the proliferation, migration and invasion of adenoid cystic carcinoma cell line ACC-2, and its mechanism may be related to the promotion of Akt,PI3K phosphorylation and the increase of S100A4 protein expression.
【作者單位】： 中國醫(yī)科大學附屬盛京醫(yī)院口腔頜面外科;遼寧省鐵法煤業(yè)集團總醫(yī)院口腔科;沈陽農(nóng)業(yè)大學畜牧獸醫(yī)學院預防獸醫(yī)學教研室;
【基金】：遼寧省科學技術(shù)計劃(2011010215-404)
【分類號】：R739.87

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本文編號：2292866