【摘要】：目的:利用舌癌細(xì)胞系HN12探索激活蛋白激酶C(protein kinase C,PKC)對(duì)口腔鱗癌細(xì)胞上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的影響。方法:采用質(zhì)粒pCMV6-AC-GFP-P120~(ctn)轉(zhuǎn)染HN12細(xì)胞,使HN12過(guò)表達(dá)P120-連環(huán)蛋白(P120-catenin,P120~(ctn)),再加入蛋白激酶C(protein kinase C,PKC)激活劑佛波酯(phorbol 12-myristate 13-acetate,PMA),采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR、Western blot檢測(cè)PMA處理前后PKC、P120~(ctn)、E-cad的mRNA和蛋白表達(dá),通過(guò)Transwell細(xì)胞侵襲及細(xì)胞遷移試驗(yàn)等方法檢測(cè)細(xì)胞的遷移和侵襲能力。結(jié)果:當(dāng)PKC被PMA活化時(shí),細(xì)胞形態(tài)發(fā)生改變,細(xì)胞中P120ctn的表達(dá)顯著降低,E-鈣黏蛋白(E-cadherin,E-cad)也隨之降低,間質(zhì)標(biāo)記蛋白N-鈣黏蛋白(N-cadherin,N-cad)和波形蛋白(Vimentin,Vim)的mRNA和蛋白表達(dá)水平顯著升高,腫瘤細(xì)胞的遷移和侵襲能力顯著提高(P0.05)。結(jié)論:PKC可能通過(guò)磷酸化調(diào)節(jié)P120~(ctn)的表達(dá),參與細(xì)胞黏附的調(diào)控,促進(jìn)EMT,在口腔鱗癌細(xì)胞的遷移和侵襲過(guò)程中發(fā)揮作用。
[Abstract]:Aim: to explore the effect of activated protein kinase (C (protein kinase) on epithelial-interstitial transformation (epithelial-mesenchymal transition,EMT) of oral squamous carcinoma cells (OSCC) by using tongue cancer cell line HN12. Methods: HN12 cells were transfected with plasmid pCMV6-AC-GFP-P120~ (ctn), and HN12 was overexpressed by P120-cateninine (P120-cateninine) P120 ~ (ctn), and then added into phorbol 12-myristate 13-acetate PMA. The mRNA and protein expression of PKC,P120~ (ctn) E-cad before and after PMA treatment were detected by real-time fluorescence quantitative PCR,Western blot. The ability of cell migration and invasion was detected by Transwell cell invasion and cell migration assay. Results: when PKC was activated by PMA, the cell morphology was changed, and the expression of E-cadherin (E-cadherin E-cad) was decreased, and the mRNA and protein expression of N-cadherin (N-cadherin N-cad) and vimentin (Vimentin,Vim) were increased significantly. The ability of migration and invasion of tumor cells was significantly increased (P0.05). ConclusionPKC may play a role in the migration and invasion of oral squamous carcinoma cells by regulating the expression of P120 ~ (ctn) through phosphorylation, which may play an important role in the regulation of cell adhesion and promote the migration and invasion of oral squamous carcinoma cells.
【作者單位】： 廈門(mén)醫(yī)學(xué)院口腔醫(yī)學(xué)系;
【基金】：廈門(mén)醫(yī)學(xué)院自然科學(xué)基金(編號(hào):Z2013-02)
【分類(lèi)號(hào)】：R739.8

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本文編號(hào)：2254212