【摘要】：目的:探討miR-203對(duì)人舌鱗癌細(xì)胞系Tca8113增殖能力的影響。方法:通過(guò)慢病毒轉(zhuǎn)染技術(shù)構(gòu)建miR-203過(guò)表達(dá)的舌鱗癌細(xì)胞模型。RT-PCR法檢測(cè)miR-203過(guò)表達(dá)慢病毒轉(zhuǎn)染前后miR-203的表達(dá)水平;MTT方法檢測(cè)miR-203過(guò)表達(dá)(micro up組)及陰性對(duì)照(NC組)2組細(xì)胞的增殖能力,連續(xù)檢測(cè)5d,酶標(biāo)儀檢測(cè)A490值,繪制細(xì)胞增殖曲線;PI-FACS細(xì)胞周期檢測(cè)miR-203過(guò)表達(dá)后對(duì)DNA合成和細(xì)胞周期的影響,取處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞,70%乙醇固定1h,細(xì)胞染色,流式細(xì)胞儀檢測(cè)。結(jié)果:成功建立了miR-203過(guò)表達(dá)舌鱗癌細(xì)胞模型。定量PCR結(jié)果顯示,Tca8113細(xì)胞中,micro up組miR-203表達(dá)豐度是NC組的286.262倍,t=-34.879,P=0.001。MTT檢測(cè)結(jié)果表明,與NC組相比,micro up組細(xì)胞增殖能力明顯降低;檢測(cè)第4天micro up組A490值為0.492±0.011,NC組為0.681±0.009,t=-23.463,P0.001。PI-FACS細(xì)胞周期檢測(cè)結(jié)果顯示,micro up組DNA合成前期(G1期)細(xì)胞所占百分率為(58.98±0.56)%,較NC組的(53.86±0.96)%明顯增高,t=-7.989,P=0.001;而DNA合成期(S期)、合成后期(G2期)及有絲分裂期(M期)細(xì)胞所占百分率降低。結(jié)論:miR-203可能通過(guò)將細(xì)胞周期阻滯于G1期,從而抑制舌鱗癌細(xì)胞系Tca8113的細(xì)胞增殖能力。
[Abstract]:Objective: to investigate the effect of miR-203 on the proliferation of human tongue squamous cell carcinoma cell line Tca8113. Methods: Lentivirus transfection technique was used to construct tongue squamous carcinoma cell model with miR-203 overexpression. RT-PCR was used to detect the expression level of miR-203 before and after lentivirus transfection. MiR-203 overexpression (micro up group and negative control group (NC group) were used to detect the proliferative ability of the two groups. After 5 days of continuous detection, the A490 value was detected by enzyme labeling instrument. The cell cycle of PI-FACS was plotted to detect the effect of miR-203 overexpression on the synthesis of DNA and cell cycle. The cells in logarithmic growth phase were fixed with 70% ethanol for 1 hour. The cells were stained and detected by flow cytometry. Results: miR-203 overexpression of tongue squamous carcinoma cell model was successfully established. The results of quantitative PCR showed that the abundance of miR-203 in the micro up group was 286.262 times higher than that in the NC group. The results showed that the proliferation ability of the micro up group was significantly lower than that of the NC group. On the 4th day, the A490 value of micro up group was 0.492 鹵0.011%, which was 0.681 鹵0.009 t ~ (-23.463) (P 0.001) P0.001. Results showed that the percentage of DNA (G _ 1 phase) was (58.98 鹵0.56) in the micro up group, which was significantly higher than that in the NC group (53.86 鹵0.96)%, while the DNA synthesis phase (S phase) and the late synthetic phase (G _ 2) were significantly higher than those in the NC group (P < 0.05). The percentage of mitotic (M phase) cells decreased. Conclusion the cell proliferation of tongue squamous cell carcinoma cell line Tca8113 may be inhibited by blocking cell cycle at G1 phase.
【作者單位】： 首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京同仁醫(yī)院耳鼻咽喉頭頸外科 耳鼻咽喉頭頸科學(xué)教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【基金】：北京市自然基金面上項(xiàng)目(7112029)
【分類號(hào)】：R739.86

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本文編號(hào)：2144325