【摘要】：目的研究腺病毒載體介導(dǎo)的骨形態(tài)發(fā)生蛋白9(BMP-9)對(duì)小鼠永生化顱骨間充質(zhì)祖細(xì)胞(i CAL)成骨分化的誘導(dǎo)作用。方法以i CAL為模型,設(shè)置綠色熒光蛋白(GFP)對(duì)照組和BMP-9誘導(dǎo)組,于誘導(dǎo)后的3、5、7 d對(duì)早期成骨分化指標(biāo)堿性磷酸酶(ALP)活性進(jìn)行定性和定量檢測(cè);于誘導(dǎo)后的14 d通過(guò)茜素紅染色檢測(cè)骨鈣結(jié)節(jié)形成;熒光定量PCR法和Western印跡檢測(cè)成骨細(xì)胞分化標(biāo)志基因Runx2、OCN表達(dá)情況。結(jié)果 BMP-9誘導(dǎo)組細(xì)胞內(nèi)ALP活性高于GFP對(duì)照組,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);BMP-9誘導(dǎo)組形成較多的鈣鹽結(jié)節(jié)沉積;熒光定量PCR檢測(cè)結(jié)果顯示誘導(dǎo)組中Runx2、OCN的mRNA表達(dá)量明顯上調(diào),差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),Western印跡檢測(cè)3 d Runx2蛋白表達(dá)上調(diào),5 d OCN蛋白表達(dá)上調(diào)。結(jié)論 BMP-9促進(jìn)小鼠永生化i CAL成骨分化。
[Abstract]:Objective to investigate the effect of adenovirus mediated bone morphogenetic protein 9 (BMP-9) on osteogenic differentiation of mouse immortalized skull mesenchymal progenitor cells (iCAL). Methods using iCAL as model, green fluorescent protein (GFP) control group and BMP-9 induction group were used to determine the activity of alkaline phosphatase (ALP) in early osteogenic differentiation index (ALP) on the 7th day after induction. Bone calcium nodule formation was detected by alizarin red staining on the 14th day after induction, and the expression of the osteoblast differentiation marker gene Runx2OCN was detected by fluorescence quantitative PCR and Western blotting. Results the intracellular ALP activity of BMP-9 induced group was higher than that of GFP control group, the difference was statistically significant (P0.05). The difference was statistically significant (P0.05). Western blot analysis showed that the expression of Runx2 protein was up-regulated on day 3 and OCN protein was up-regulated on day 5. Conclusion BMP-9 promotes osteogenic differentiation of immortalized iCAL in mice.
【作者單位】： 重慶醫(yī)科大學(xué)附屬口腔醫(yī)院 口腔疾病與生物醫(yī)學(xué)重慶市重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;重慶醫(yī)科大學(xué)口腔醫(yī)學(xué)院 重慶市高校市級(jí)口腔生物醫(yī)學(xué)工程重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(81301551) 重慶市基礎(chǔ)科學(xué)與前沿技術(shù)研究專項(xiàng)資助項(xiàng)目(cstc2013jcyj A10022) 重慶高校創(chuàng)新團(tuán)隊(duì)建設(shè)計(jì)劃資助項(xiàng)目(KJTD201304)
【分類號(hào)】：R782

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本文編號(hào)：2131428