【摘要】：目的研究腺病毒載體介導的骨形態(tài)發(fā)生蛋白9(BMP-9)對小鼠永生化顱骨間充質祖細胞(i CAL)成骨分化的誘導作用。方法以i CAL為模型,設置綠色熒光蛋白(GFP)對照組和BMP-9誘導組,于誘導后的3、5、7 d對早期成骨分化指標堿性磷酸酶(ALP)活性進行定性和定量檢測;于誘導后的14 d通過茜素紅染色檢測骨鈣結節(jié)形成;熒光定量PCR法和Western印跡檢測成骨細胞分化標志基因Runx2、OCN表達情況。結果 BMP-9誘導組細胞內ALP活性高于GFP對照組,差異具有統(tǒng)計學意義(P0.05);BMP-9誘導組形成較多的鈣鹽結節(jié)沉積;熒光定量PCR檢測結果顯示誘導組中Runx2、OCN的mRNA表達量明顯上調,差異具有統(tǒng)計學意義(P0.05),Western印跡檢測3 d Runx2蛋白表達上調,5 d OCN蛋白表達上調。結論 BMP-9促進小鼠永生化i CAL成骨分化。
[Abstract]:Objective to investigate the effect of adenovirus mediated bone morphogenetic protein 9 (BMP-9) on osteogenic differentiation of mouse immortalized skull mesenchymal progenitor cells (iCAL). Methods using iCAL as model, green fluorescent protein (GFP) control group and BMP-9 induction group were used to determine the activity of alkaline phosphatase (ALP) in early osteogenic differentiation index (ALP) on the 7th day after induction. Bone calcium nodule formation was detected by alizarin red staining on the 14th day after induction, and the expression of the osteoblast differentiation marker gene Runx2OCN was detected by fluorescence quantitative PCR and Western blotting. Results the intracellular ALP activity of BMP-9 induced group was higher than that of GFP control group, the difference was statistically significant (P0.05). The difference was statistically significant (P0.05). Western blot analysis showed that the expression of Runx2 protein was up-regulated on day 3 and OCN protein was up-regulated on day 5. Conclusion BMP-9 promotes osteogenic differentiation of immortalized iCAL in mice.
【作者單位】： 重慶醫(yī)科大學附屬口腔醫(yī)院 口腔疾病與生物醫(yī)學重慶市重點實驗室;重慶醫(yī)科大學口腔醫(yī)學院 重慶市高校市級口腔生物醫(yī)學工程重點實驗室;
【基金】：國家自然科學基金資助項目(81301551) 重慶市基礎科學與前沿技術研究專項資助項目(cstc2013jcyj A10022) 重慶高校創(chuàng)新團隊建設計劃資助項目(KJTD201304)
【分類號】：R782

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本文編號：2131428