本文選題：變異鏈球菌 + srtA基因缺失　； 參考：《華西口腔醫(yī)學(xué)雜志》2017年06期

【摘要】：目的利用框內(nèi)缺失法,通過(guò)IFDC2基因盒及融合聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)、同源重組技術(shù)構(gòu)建變異鏈球菌UA159菌株srt A基因缺失株。方法 PCR擴(kuò)增變異鏈球菌UA159菌株srt A基因上下游同源片段及IFDC2基因盒,將這些片段連接、轉(zhuǎn)化入U(xiǎn)A159,替換srt A基因同源片段,篩選、鑒定紅霉素抗性克隆;PCR擴(kuò)增、連接UA159 srt A基因上下游同源片段,將連接片段轉(zhuǎn)化入前述紅霉素抗性克隆中替換IFDC2同源片段,篩選、鑒定抗苯丙氨酸類似物p-chloro-phenylalanine(p-Cl-Phe)克隆。結(jié)果 PCR、瓊脂糖凝膠電泳及DNA測(cè)序結(jié)果均證明srt A基因編碼區(qū)被完全刪除,上下游片段無(wú)縫連接,成功構(gòu)建UA159 srt A基因缺失株。結(jié)論本研究成功構(gòu)建了無(wú)標(biāo)記的變異鏈球菌UA159 srt A基因缺失株,為進(jìn)一步研究該基因在生物膜中的作用及其調(diào)控機(jī)制奠定了基礎(chǔ)。
[Abstract]:Objective to construct srt A gene deletion strain of Streptococcus mutans UA159 strain by using IFDC2 gene box and fusion polymerase chain reaction (PCR). Methods the upstream and downstream homologous fragments of srt A gene and IFDC2 gene cassette of Streptococcus mutans UA159 strain were amplified by PCR. The fragments were ligated into UA159 and transformed into UA159. The upstream and downstream homologous fragments of UA159 srt A gene were ligated and transformed into the aforementioned erythromycin resistant clones to replace the IFDC2 homologous fragments. P-chloro-phenylalanine (p-Cl-Phe) clones resistant to phenylalanine analogue were screened and identified. Results the results of PCR, agarose gel electrophoresis and DNA sequencing showed that the coding region of srt A gene was completely deleted, and the upstream and downstream fragments were seamlessly connected, and UA159 srt A gene deletion strain was successfully constructed. Conclusion this study successfully constructed an unlabeled srt A gene deletion strain of Streptococcus mutans UA159, which laid a foundation for further study on the role of the gene in biofilm and its regulatory mechanism.
【作者單位】： 口腔疾病研究國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室國(guó)家口腔疾病臨床醫(yī)學(xué)研究中心四川大學(xué)華西口腔醫(yī)院牙體牙髓病科;
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金(81570974) 四川省科技計(jì)劃項(xiàng)目基金(2015JY0260)~~
【分類號(hào)】：R780.2

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 李小明;茍建重;;全唾液中變異鏈球菌受體的檢測(cè)[J];西安交通大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2010年02期

2 何永紅;田曉蓓;萬(wàn)呼春;溫艷麗;張菲菲;馬琴睿;;變異鏈球菌蛋白質(zhì)提取方法研究[J];華西口腔醫(yī)學(xué)雜志;2009年01期

3 楊隆強(qiáng);周喬;劉敏川;;變異鏈球菌黏附機(jī)制的研究進(jìn)展[J];國(guó)際口腔醫(yī)學(xué)雜志;2011年02期

4 王舒婷;康瓊屹;馬瑞;夏文薇;;兩種糖對(duì)變異鏈球菌產(chǎn)酸能力影響的比較研究[J];牙體牙髓牙周病學(xué)雜志;2012年01期

5 劉開云;孫紅武;張衛(wèi)軍;鄒全明;;變異鏈球菌防治藥物的研究現(xiàn)狀[J];國(guó)際口腔醫(yī)學(xué)雜志;2012年05期

6 黃萍;萬(wàn)呼春;何永紅;;應(yīng)激狀態(tài)下的變異鏈球菌差異蛋白組學(xué)[J];國(guó)際口腔醫(yī)學(xué)雜志;2014年01期

7 王麗娜;史春;劉啟成;牛衛(wèi)東;;抗菌肽對(duì)高齲患者口內(nèi)變異鏈球菌生長(zhǎng)的影響[J];大連醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);2010年05期

8 黃莉莉;王舒婷;康瓊屹;夏文薇;;兩種糖經(jīng)變異鏈球菌代謝后酸性產(chǎn)物的定量比較[J];牙體牙髓牙周病學(xué)雜志;2013年08期

9 姜葳;梁景平;;變異鏈球菌壓力耐受機(jī)制的研究進(jìn)展[J];國(guó)際口腔醫(yī)學(xué)雜志;2011年01期

10 吳燕玲;周燕;支清惠;陶冶;林煥彩;;縱向研究0-2歲嬰幼兒變異鏈球菌群與早期嬰幼兒齲的關(guān)系[J];現(xiàn)代口腔醫(yī)學(xué)雜志;2011年06期

相關(guān)會(huì)議論文 前7條

1 邱明;黃曉晶;江一平;;變異鏈球菌生物膜成熟初期階段蛋白表達(dá)分析[A];中華口腔醫(yī)學(xué)會(huì)老年口腔醫(yī)學(xué)專業(yè)委員會(huì)換屆選舉暨第四屆全國(guó)老年口腔醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)研討會(huì)論文匯編[C];2008年

2 劉興容;曹元書;;不同齲敏感兒童變異鏈球菌臨床分離株合成胞外多糖能力的實(shí)驗(yàn)研究[A];全國(guó)第三次牙體牙髓病學(xué)臨床技術(shù)研討會(huì)論文匯編[C];2009年

3 王志剛;施俊;劉興容;;不同齲敏感兒童口腔變異鏈球菌不同基因型菌株粘附能力以及蔗糖對(duì)其影響的實(shí)驗(yàn)研究[A];全國(guó)第八次牙體牙髓病學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2011年

4 徐仰龍;楊德琴;;變異鏈球菌管家基因熒光蛋白表達(dá)載體的構(gòu)建[A];全國(guó)第八次牙體牙髓病學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2011年

5 江山;黃曉晶;陳帥;鐘聲;;不同變異鏈球菌菌株單菌種生物膜耐酸能力的差異研究[A];全國(guó)第八次牙體牙髓病學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2011年

6 童忠春;倪龍興;;變異鏈球菌饑餓態(tài)對(duì)耐酸及防齲劑敏感性的體外研究[A];全國(guó)第八次牙體牙髓病學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2011年

7 葛亞麗;;添加納米Ag-TiO_2抗菌劑對(duì)樹脂基托抗菌性及其機(jī)械性影響的研究[A];中華口腔醫(yī)學(xué)會(huì)第14次全國(guó)口腔醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議（2012年會(huì)）論文匯編[C];2012年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前3條

1 毛甜甜;基因工程改性變異鏈球菌替代療法防齲研究[D];武漢大學(xué);2013年

2 潘文婷;新型小分子2-氨基咪唑/三唑防齲作用初探[D];武漢大學(xué);2014年

3 阿亞茲（Ayaz Ahmed）;牙菌斑的分子微生態(tài)結(jié)構(gòu)分析以及乳酸桿菌抑制變異鏈球菌屬形成生物膜的治療作用[D];大連醫(yī)科大學(xué);2012年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 車春曉;針對(duì)變異鏈球菌的人源STAMP（C16LL-37）的生物學(xué)特性[D];蘭州大學(xué);2016年

2 營(yíng)秀;新型優(yōu)化多肽pm11對(duì)口腔常見微生物殺菌作用的初步研究[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2016年

3 吳昕_g;變異鏈球菌中抗壞血酸特異性磷酸轉(zhuǎn)移酶系統(tǒng)相關(guān)基因的初步研究[D];南方醫(yī)科大學(xué);2016年

4 黃珊珊;ClpXP蛋白酶在變異鏈球菌應(yīng)激耐受和生物膜形成中的作用及機(jī)制研究[D];福建醫(yī)科大學(xué);2016年

5 姜秀;耐酸血鏈球菌拮抗變異鏈球菌作用機(jī)制的初步研究[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2017年

6 李鑫楠;石家莊市學(xué)齡兒童齲病細(xì)菌類型的核酸序列分析[D];河北醫(yī)科大學(xué);2017年

7 王志剛;不同齲敏感兒童口腔變異鏈球菌不同基因型菌株粘附能力及蔗糖對(duì)其影響的實(shí)驗(yàn)研究[D];瀘州醫(yī)學(xué)院;2010年

8 李娜;五倍子單寧酸對(duì)變異鏈球菌作用的初步研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2013年

9 李夢(mèng)辭;不同環(huán)境因素對(duì)寡鏈與變鏈雙菌種生物膜形成的影響[D];天津醫(yī)科大學(xué);2014年

10 楊秀娟;赤蘚糖醇和木糖醇對(duì)變異鏈球菌生物膜影響的對(duì)比研究[D];福建醫(yī)科大學(xué);2012年

，

本文編號(hào)：2114167