脫細(xì)胞真皮基質(zhì)對年輕恒牙牙乳頭干細(xì)胞分化的作用
本文選題:牙乳頭 + 干細(xì)胞 ; 參考:《北京大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版)》2014年01期
【摘要】:目的:獲取年輕恒牙牙乳頭組織,進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)以及與脫細(xì)胞真皮基質(zhì)(acellular dermal matrix,ADM)的復(fù)合培養(yǎng),了解ADM在干細(xì)胞成骨、成脂轉(zhuǎn)化中的作用。方法:利用口腔外科手段獲取年輕恒牙牙乳頭組織,分離培養(yǎng)細(xì)胞,對其進(jìn)行流式細(xì)胞分析,細(xì)胞分為兩組,并通過染色進(jìn)行觀察,利用實時熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)(realtime polymerase chain reaction,real-time PCR)對特定蛋白的RNA水平進(jìn)行分析。將牙乳頭細(xì)胞復(fù)合ADM培養(yǎng),實驗組對培養(yǎng)細(xì)胞進(jìn)行成骨與成脂誘導(dǎo)分化,對照組不進(jìn)行誘導(dǎo),同樣進(jìn)行染色與real-time PCR分析。結(jié)果:牙乳頭細(xì)胞生長活躍,利用流式細(xì)胞分析發(fā)現(xiàn)70.3%細(xì)胞的間充質(zhì)干細(xì)胞表面標(biāo)志物Stro-1表達(dá)呈陽性,有96%細(xì)胞CD105表達(dá)呈陽性,經(jīng)過誘導(dǎo)后,實驗組細(xì)胞與成骨相關(guān)的骨鈣素(osteocalcin,OCN)和骨涎蛋白(bone sialoprotein,BSP)的RNA水平,與成脂相關(guān)的肝X-受體α(liver X-recepterα,LXRα)、脂蛋白脂酶(lipoprotein lipase,LPL)、過氧化物酶體增殖物激活受體γ(peroxisome proliferator activated receptorγ,PPAR-γ)和B類清道夫受體1(scavenger receptor class B type 1,SR-B1)的RNA水平均高于未經(jīng)誘導(dǎo)的對照組細(xì)胞。牙乳頭細(xì)胞復(fù)合ADM培養(yǎng)后細(xì)胞仍然生長活躍,兩者緊密貼附,經(jīng)誘導(dǎo)分化,實驗組OCN與BSP的RNA水平高于對照組(P0.05),實驗組LPL的RNA水平高于對照組(P0.05)。結(jié)論:通過口腔外科獲得的年輕恒牙牙乳頭組織含有大量具有成骨能力的干細(xì)胞,將其與具有膠原支架結(jié)構(gòu)的ADM復(fù)合培養(yǎng),發(fā)現(xiàn)ADM可以作為干細(xì)胞生長的支架結(jié)構(gòu),并對干細(xì)胞的成骨誘導(dǎo)起到一定作用。
[Abstract]:Objective: to investigate the role of dermal in osteogenesis and adipogenic transformation of adult permanent teeth by cell culture and co-culture with acellular dermal matrix adm. Methods: the papilla tissue of young permanent teeth was obtained by oral surgery and cultured cells were isolated and analyzed by flow cytometry. The cells were divided into two groups and observed by staining. The RNA level of specific protein was analyzed by real time polymerase chain real-time PCR. Dental papilla cells were cultured with ADM. The cultured cells were induced by osteogenesis and adipogenic differentiation in the experimental group, but not in the control group. The same staining and real-time analysis were carried out in the control group. Results: dental papilla cells were active in growth. The expression of Stro-1 on mesenchymal stem cell surface was positive in 70.3% of the cells, and CD105 was positive in 96% of the cells. The RNA levels of osteocalcin (OCN) and sialoprotein (BSPP) of osteoblast-associated osteocalcin in experimental group were observed. The levels of LXR 偽, lipoprotein lipase, peroxisome proliferator activated receptor 緯 -PPAR- 緯 and 1(scavenger receptor class B type 1 SR-B1) were significantly higher in lipopolysaccharide (LXR), lipoprotein lipase, peroxisome proliferator activated receptor 緯 (PPAR- 緯) and class B scavenger receptor (1(scavenger receptor class B type 1r-B1) than in uninduced control cells. After the dental papilla cells were cultured with ADM, the cells were still active. The mRNA levels of OCN and BSP in the experimental group were higher than those in the control group (P 0.05), and the levels of LPL RNA in the experimental group were higher than those in the control group (P 0.05). Conclusion: the dental papilla of young permanent teeth obtained by oral surgery contains a large number of osteogenic stem cells. It is found that ADM can be used as a scaffold for stem cell growth by co-culture with ADM with collagen scaffold. It also plays a certain role in osteogenesis induction of stem cells.
【作者單位】: 北京大學(xué)口腔醫(yī)學(xué)院·口腔醫(yī)院口腔頜面外科;
【分類號】:R781
【共引文獻(xiàn)】
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,本文編號:2029141
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