模擬低氧對舌鱗癌SCC-15細(xì)胞系中SOX2和OCT4表達(dá)的影響
本文選題:舌腫瘤 + 細(xì)胞低氧; 參考:《第二軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報》2017年07期
【摘要】:目的研究模擬低氧條件對舌鱗癌SCC-15細(xì)胞增殖、周期、凋亡的影響,及SOX2和OCT4蛋白、mRNA的表達(dá)變化。方法體外培養(yǎng)舌鱗癌SCC-15細(xì)胞,加入模擬低氧物去鐵胺(desferrioxamine,DFO)模擬低氧環(huán)境,為模擬低氧組,同時設(shè)置不加DFO的常氧組為對照,采用CCK-8法檢測SCC-15細(xì)胞的增殖率;流式細(xì)胞技術(shù)檢測SCC-15細(xì)胞的周期和細(xì)胞凋亡率;蛋白質(zhì)印跡法檢測常氧組和模擬低氧組SCC-15細(xì)胞中低氧誘導(dǎo)因子1α(HIF-1α)、SOX2及OCT4蛋白的表達(dá);qPCR檢測常氧組和模擬低氧組SCC-15細(xì)胞中HIF-1α、SOX2及OCT4mRNA的表達(dá)。結(jié)果與常氧組相比,模擬低氧組SCC-15細(xì)胞的增殖受到抑制(P0.05),G1期細(xì)胞所占比例上升、S+G2期細(xì)胞所占比例下降(P0.05),細(xì)胞凋亡率未見明顯變化(P0.05);蛋白質(zhì)印跡法結(jié)果顯示,與常氧組比較,模擬低氧組SCC-15細(xì)胞中HIF-1α、SOX2、OCT4蛋白的表達(dá)均升高,且HIF-1α、OCT4蛋白的升高幅度大于SOX2蛋白,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05,P0.01);qPCR結(jié)果顯示,兩組SCC-15細(xì)胞中HIF-1αmRNA水平差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05),而模擬低氧組SCC-15細(xì)胞中SOX2、OCT4mRNA的表達(dá)水平高于常氧組(P0.05)。結(jié)論 DFO可以有效模擬低氧環(huán)境,促進(jìn)SOX2和OCT4的蛋白和mRNA表達(dá)水平升高。
[Abstract]:Objective to study the effects of simulated hypoxia on the proliferation, cell cycle and apoptosis of SCC-15 cells, and the changes of SOX2 and OCT4 mRNA expression in SCC-15 cells. Methods SCC-15 cells of tongue squamous cell carcinoma were cultured in vitro. The simulated hypoxic environment was simulated by adding the simulated hypoxic substance desferrioxamine DFOO. The proliferation rate of SCC-15 cells was detected by CCK-8 method in the normoxic group without DFO as the control group. The cell cycle and apoptosis rate of SCC-15 cells were detected by flow cytometry. The expression of hypoxia inducible factor-1 偽 (HIF-1 偽) and OCT4 protein in SCC-15 cells was detected by Western blot. The mRNA expression of HIF-1 偽, OCT4 and HIF-1 偽 in SCC-15 cells in normoxic and simulated hypoxia groups were detected by qPCR. Results compared with normoxic group, the proliferation of SCC-15 cells in simulated hypoxia group was inhibited. The expression of HIF-1 偽 and SOX2OCT4 protein in SCC-15 cells was higher than that of SOX2 protein in simulated hypoxia group, and the difference was statistically significant (P 0.05) and P0.01OCT4 / OCT4 protein expression was higher than that of SOX2 protein, the results of QPCR showed that the expression of HIF-1 偽 was significantly higher than that of SOX2 protein in SCC-15 cells. There was no significant difference in HIF-1 偽 mRNA level between the two groups, but the expression level of SOX2OCT4 mRNA in SCC-15 cells of simulated hypoxia group was higher than that in normoxic group. Conclusion DFO can effectively mimic hypoxic environment and promote protein and mRNA expression of SOX2 and OCT4.
【作者單位】: 第二軍醫(yī)大學(xué)附屬公利醫(yī)院口腔科;
【基金】:上海市浦東新區(qū)衛(wèi)生和計劃生育委員會青年科技基金項目(PW2014B-24) 第二軍醫(yī)大學(xué)附屬公利醫(yī)院院級優(yōu)秀青年基金項目資助(GL2014Q-19)~~
【分類號】:R739.86
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