發(fā)布時(shí)間：2018-06-08 13:57

  本文選題：糖尿病 + 牙齒伸長(zhǎng)運(yùn)動(dòng)�。� 參考：《山西醫(yī)科大學(xué)》2017年碩士論文

【摘要】：目的:建立糖尿病小鼠伸長(zhǎng)運(yùn)動(dòng)實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ?研究糖尿病小鼠牙齒垂直向伸長(zhǎng)過程中Ⅰ型膠原蛋白和富含酸性半胱氨酸的分泌蛋白(SPARC)的表達(dá),探究小鼠牙齒伸長(zhǎng)運(yùn)動(dòng)的機(jī)制以及糖尿病對(duì)其的影響,為臨床上修復(fù)牙列缺損提供理論基礎(chǔ)。方法:60只雄性8周齡C57BL/6J小鼠,體重在19-25g左右。小鼠隨機(jī)分為兩組,即對(duì)照組(正常組)與實(shí)驗(yàn)組(糖尿病組),每組30只;每組再隨機(jī)分為5個(gè)亞組即0天、3天、6天、9天、12天組,每組各6只。實(shí)驗(yàn)組小鼠連續(xù)5天給予腹腔分次注射70mg/kg1%的鏈脲佐菌素(STZ),對(duì)照組注射同等劑量的檸檬酸緩沖液。注射后72小時(shí)后剪尾取血測(cè)量血糖,每周測(cè)量一次空腹血糖和體重,連續(xù)4周,空腹血糖值≥11.1mmol/L為建模成功,建模成功后進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。各組小鼠在3%水合氯醛全麻下行右側(cè)上頜后牙拔除術(shù),壓迫止血拔牙部位。將兩組小鼠分別在0天、3天、6天、9天、12天處死,提取下頜骨。標(biāo)本在4%多聚甲醛溶液中固定24-48小時(shí),10%EDTA脫鈣液脫鈣40-50天,常規(guī)脫水、浸蠟、包埋,切片,HE染色,觀察拔牙后下頜牙齒伸長(zhǎng)運(yùn)動(dòng)過程中牙周圍組織細(xì)胞的變化;免疫組化染色,觀察實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組在SPARC與Ⅰ型膠原蛋白的表達(dá)差異,運(yùn)用免疫組化圖像進(jìn)行結(jié)果分析,測(cè)量表達(dá)面積與表達(dá)強(qiáng)度,計(jì)算平均灰度值與平均光密度(OD),用SPSS19.0統(tǒng)計(jì)學(xué)方法進(jìn)行數(shù)據(jù)處理。結(jié)果:形態(tài)學(xué):鏡下與X線片顯示12天后兩組小鼠下頜磨牙向伸長(zhǎng),實(shí)驗(yàn)組伸長(zhǎng)量小于對(duì)照組(P0.05);體重變化:實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組體重3-6天下降(P0.05),實(shí)驗(yàn)組體重下降程度大于對(duì)照組;9天兩組體重逐漸回升(P0.05),12天時(shí)接近初始體重,實(shí)驗(yàn)組速度慢于對(duì)照組。HE染色:1.牙周膜寬度:實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組左右兩側(cè)第一磨牙根中1/3牙周膜寬度平均值無(wú)明顯變化(P0.05);2.破骨細(xì)胞計(jì)數(shù):實(shí)驗(yàn)組骨基質(zhì)染色不均,骨線不整齊,骨質(zhì)疏松,0天至12天細(xì)胞隨時(shí)間呈增長(zhǎng)趨勢(shì)(P0.05);對(duì)照組0天時(shí)未見明顯破骨細(xì)胞,3-12天破骨細(xì)胞逐漸增多,12天時(shí)最多(P0.05),僅12天時(shí)實(shí)驗(yàn)組小于對(duì)照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),其他各時(shí)間組均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。SPARC與Ⅰ型膠原蛋白免疫組化:隨著時(shí)間增加,平均灰度值逐漸降低,陽(yáng)性表達(dá)逐漸增強(qiáng),SPARC的平均灰度值與Ⅰ型膠原蛋白在不同時(shí)間點(diǎn)上,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。SPARC在0天、3天、6天、9天、12天時(shí),實(shí)驗(yàn)組顯著低于對(duì)照組,實(shí)驗(yàn)組表達(dá)強(qiáng)于對(duì)照組(P0.05);Ⅰ膠原蛋白除第6天外,其他各組實(shí)驗(yàn)組顯著高于對(duì)照組,實(shí)驗(yàn)組表達(dá)低于對(duì)照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。SPARC和Ⅰ型膠原蛋白的OD值隨著時(shí)間的增加不斷增大,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。實(shí)驗(yàn)組Ⅰ型膠原蛋白OD值低于對(duì)照組,SPARC的OD值顯著高于對(duì)照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論:1.對(duì)照組與實(shí)驗(yàn)組小鼠拔除上頜牙后,對(duì)頜牙均有伸長(zhǎng)現(xiàn)象,且糖尿病小鼠骨質(zhì)疏松傾向伸長(zhǎng)量小于正常組。2.SPARC與Ⅰ型膠原蛋白在小鼠牙齒伸長(zhǎng)運(yùn)動(dòng)過程中牙周組織中表達(dá)增強(qiáng),提示可能與牙齒伸長(zhǎng)運(yùn)動(dòng)有重要聯(lián)系。3.糖尿病小鼠骨改建能力減弱,牙齒伸長(zhǎng)運(yùn)動(dòng)過程中破骨細(xì)胞活動(dòng)受限制,Ⅰ型膠原代謝能力下降。
[Abstract]:Objective : To establish an experimental model of elongation exercise of diabetic mice , to study the expression of collagen type 鈪，

本文編號(hào)：1996024