本文選題：miR-200b + 舌鱗癌��； 參考：《南華大學》2016年碩士論文

【摘要】：【目的】本研究旨在探討miR-200b在人舌鱗癌組織和細胞中的表達與臨床意義以及生物學意義�！痉椒ā颗囵B(yǎng)正常舌粘膜上皮細胞株(TEC)為對照組(A組),不同舌鱗癌細胞株SCC-9、SCC-2、TSCCa、Tca8113分為B、C、D、E組,作為實驗組,運用實時熒光定量PCR檢測不同舌鱗癌細胞株與正常舌粘膜上皮細胞株中miR-200b的表達。收集62例舌鱗癌組織與癌旁正常組織,其中癌旁正常組織作為對照組(A1組),舌鱗癌組織為實驗組(B1組),運用實時熒光定量PCR檢測62例舌鱗癌組織與癌旁正常組織中miR-200b的表達,并分析miR-200b的表達變化與舌鱗癌患者臨床病理資料的相關(guān)性。運用轉(zhuǎn)染技術(shù)將scramble、control-siRNA、miR-200b mimics、Bmi-1-siRNA分別轉(zhuǎn)染于舌鱗癌Tca8113細胞分成A2、A3、B2、B3四組,其中scramble組(A2組)與miR-200b mimics組(B2組),control-siRNA組(A3組)與Bmi-1-siRNA組(B3組)分別配對,A2、A3為對照組,B2、B3為實驗組。采用Western blot和qRT-PCR檢測miR-200b對Bmi-1基因的蛋白和mRNA表達變化。采用MTT法檢測miR-200b與Bmi-1-siRNA對舌鱗癌Tca8113細胞增殖的影響。采用Transwell侵襲實驗檢測miR-200b與Bmi-1-siRNA對舌鱗癌Tca8113細胞侵襲的影響�！窘Y(jié)果】1.qRT-PCR結(jié)果顯示,與A組比較,B、C、D、E組miR-200b的表達均降低,差異具有統(tǒng)計學意義(P0.05)。與A1組比較,B1組miR-200b的表達亦降低,差異具有統(tǒng)計學意義(P0.05)。相關(guān)性分析顯示,在62例舌鱗癌組織中,miR-200b的表達水平與患者的臨床分期和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移呈負相關(guān)。2.Western blot與qRT-PCR結(jié)果顯示,與A2、A3組比較,B2、B3組均能明顯下調(diào)舌鱗癌Tca8113細胞中Bmi-1的蛋白與mRNA表達水平,差異具有統(tǒng)計學意義(P0.05)。3.MTT結(jié)果顯示,與A2、A3組比較,B2、B3組OD值均明顯減小,差異均有統(tǒng)計學意義(P0.05)。4.Transwell結(jié)果顯示,與A2、A3組比較,B2、B3組穿過基質(zhì)膠的Tca8113細胞數(shù)明顯降低,差異均有統(tǒng)計學意義(P0.01)�！窘Y(jié)論】1.miR-200b在舌鱗癌細胞與組織中的表達均下調(diào),miR-200b在舌鱗癌中表達下調(diào)與患者的臨床分期和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移負相關(guān)。2.miR-200b可通過靶向Bmi-1抑制舌鱗癌細胞增殖與侵襲。
[Abstract]:[objective] to investigate the expression and clinical significance and biological significance of miR-200b in human tongue squamous cell carcinoma tissues and cells. [methods] normal tongue epithelial cells were cultured as control group A, and different tongue squamous cell lines SCC-9 and SCC-2TSCCaTca8113 were divided into two groups. As an experimental group, real-time quantitative PCR was used to detect the expression of miR-200b in different tongue squamous cell carcinoma cell lines and normal tongue mucosal epithelial cell lines. 62 cases of tongue squamous cell carcinoma and adjacent normal tissues were collected, in which the adjacent normal tissues served as control group A 1 and tongue squamous cell carcinoma as experimental group B 1. The expression of miR-200b in 62 cases of tongue squamous cell carcinoma and adjacent normal tissues was detected by real-time fluorescence quantitative PCR. The correlation between the expression of miR-200b and the clinicopathological data of tongue squamous cell carcinoma was analyzed. Scrambleblebleblecontrol-siRNA-miR-200b mimi-1-siRNA transfected into Tca8113 cells of tongue squamous cell carcinoma was divided into four groups: scramble group (A _ 2 group) and miR-200b mimics group B _ 2 group (control group A _ 3) and Bmi-1-siRNA group (B _ 3 group). Western blot and qRT-PCR were used to detect the expression of Bmi-1 protein and mRNA in miR-200b. The effects of miR-200b and Bmi-1-siRNA on the proliferation of Tca8113 cells in tongue squamous cell carcinoma were detected by MTT assay. Transwell invasion assay was used to detect the effect of miR-200b and Bmi-1-siRNA on the invasion of Tca8113 cells in tongue squamous cell carcinoma. [results] the results of 1.qRT-PCR showed that the expression of miR-200b in group A was significantly lower than that in group A (P 0.05). The expression of miR-200b in group B 1 was significantly lower than that in group A1 (P 0.05). Correlation analysis showed that the expression of miR-200b in 62 cases of tongue squamous cell carcinoma was negatively correlated with the clinical stage and lymph node metastasis. 2. Western blot and qRT-PCR showed that the expression of miR-200b was negatively correlated with the clinical stage and lymph node metastasis in 62 cases of tongue squamous cell carcinoma. The expression of Bmi-1 protein and mRNA in Tca8113 cells of tongue squamous cell carcinoma were significantly down-regulated in B _ 2H _ B _ 3 group compared with A _ 2O _ A3 group. The difference was statistically significant (P 0.05). 3. The results showed that the OD value of B _ (2) B _ (2) B _ (3) group was significantly lower than that of A _ (2) A _ (3) group, and the difference was statistically significant (P 0.05 .4.Transwell). The number of Tca8113 cells passing through matrix glue in B _ 2O _ B _ 3 group was significantly lower than that in A _ 2O _ A _ 3 group. [conclusion] the down-regulation of 1.miR-200b expression in tongue squamous cell carcinoma cells and tissues is negatively correlated with clinical stage and lymph node metastasis. 2. MiR-200b can inhibit tongue squamous cell carcinoma through targeted Bmi-1. Cell proliferation and invasion.
【學位授予單位】：南華大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R739.86

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本文編號：1985148