本文選題：人乳牙牙髓干細(xì)胞 + CM-DiI��； 參考：《口腔醫(yī)學(xué)研究》2016年03期

【摘要】：目的:篩選CM-DiI用于人乳牙牙髓干細(xì)胞標(biāo)記的最佳濃度,并對(duì)標(biāo)記后細(xì)胞的生物學(xué)行為進(jìn)行評(píng)價(jià),為下一步細(xì)胞活體移植和體內(nèi)示蹤打下基礎(chǔ)。方法:酶解組織塊法培養(yǎng)人乳牙牙髓細(xì)胞并純化,免疫組化鑒定細(xì)胞來(lái)源,進(jìn)行細(xì)胞體外多向誘導(dǎo)分化能力實(shí)驗(yàn)。將第3代細(xì)胞分別使用濃度2mg/L、3mg/L及4mg/L的CM-DiI進(jìn)行標(biāo)記,比較標(biāo)記后細(xì)胞乳酸脫氫酶釋放率及細(xì)胞增殖情況,并觀察經(jīng)體外多次傳代后細(xì)胞熒光的表達(dá)情況。結(jié)果:酶解組織塊法可獲得成集落狀生長(zhǎng)的人乳牙牙髓細(xì)胞;免疫組化確定細(xì)胞為間充質(zhì)而非造血來(lái)源;細(xì)胞具有成脂、成骨及成牙本質(zhì)等多向分化能力。3種標(biāo)記物濃度均未對(duì)細(xì)胞乳酸脫氫酶釋放及細(xì)胞增殖產(chǎn)生顯著的不利影響;隨體外多次傳代,標(biāo)記熒光強(qiáng)度逐漸減退。結(jié)論:CM-DiI操作簡(jiǎn)便、染色速度快,可有效的標(biāo)記人乳牙牙髓干細(xì)胞,其中3mg/L的標(biāo)記濃度細(xì)胞毒性極小,標(biāo)記效率高,在體外多次傳代后熒光信號(hào)仍能穩(wěn)定表達(dá)。
[Abstract]:Aim: to screen the optimal concentration of CM-DiI for labeling human deciduous dental pulp stem cells and evaluate the biological behavior of the labeled cells in order to lay a foundation for the next step of cell transplantation and in vivo tracer. Methods: human deciduous dental pulp cells were cultured and purified by enzymolysis tissue block method. The origin of cells was identified by immunohistochemistry and the ability of inducing differentiation in vitro was studied. The third passage cells were labeled with CM-DiI of 2 mg / L 3 mg / L and 4mg/L, respectively. The release rate of lactate dehydrogenase and cell proliferation were compared, and the fluorescence expression of the cells was observed after several passages in vitro. Results: colony forming human primary dental pulp cells could be obtained by enzymatic tissue block method. The cells were identified by immunohistochemistry as mesenchymal rather than hematopoietic sources. The concentration of 3 markers of osteogenesis and odontogenic ability had no significant adverse effect on the release of lactate dehydrogenase and cell proliferation, but the fluorescence intensity decreased gradually with the passage in vitro. Conclusion the 3mg/L labeled human dental pulp stem cells was easy to operate and stained quickly. The labeling concentration of 3mg/L was minimal and the labeling efficiency was high. The fluorescence signal could still be expressed stably after several passages in vitro.
【作者單位】： 陜西省牙頜面疾病臨床研究中心;西安交通大學(xué)口腔醫(yī)院兒童牙病科;西安交通大學(xué)法醫(yī)學(xué)院;
【基金】：陜西省科學(xué)技術(shù)研究發(fā)展計(jì)劃項(xiàng)目(編號(hào):2013K12-16-04)
【分類號(hào)】：R788

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本文編號(hào)：1903523