尼古丁調(diào)控人牙周膜細胞自噬水平的實驗研究
發(fā)布時間:2018-05-07 14:28
本文選題:人牙周膜細胞 + 尼古丁 ; 參考:《華西口腔醫(yī)學雜志》2017年02期
【摘要】:目的探討尼古丁對人牙周膜細胞(hPDLCs)自噬水平的影響。方法選取因正畸治療而拔除的前磨牙,采用組織塊法分離培養(yǎng)hPDLCs。通過Western blot法篩選尼古丁影響hPDLCs自噬的最佳作用時間及濃度,使用透射電子顯微鏡(TEM)和免疫熒光染色法檢測該作用時間及濃度下hPDLCs自噬體形成情況和自噬標志蛋白LC3的表達情況。結果 LC3Ⅱ蛋白表達在尼古丁作用的12 h內(nèi)持續(xù)升高,從而確定12 h為最佳作用時間;LC3Ⅱ蛋白表達上調(diào)具有尼古丁濃度依賴性,1×10~(-5) mol·L~(-1)為尼古丁最佳作用濃度。TEM和免疫熒光染色證實尼古丁在此濃度及作用時間下hPDLCs細胞質(zhì)內(nèi)自噬體的數(shù)量增加,自噬標志蛋白LC3表達升高。結論在一定條件下,尼古丁能夠上調(diào)hPDLCs自噬水平,為進一步研究細胞自噬與吸煙相關牙周炎的關系奠定了基礎。
[Abstract]:Objective to investigate the effect of nicotine on autophagy of human periodontal ligament cells (hPDLCs). Methods premolars extracted by orthodontic treatment were isolated and cultured by tissue mass method. The best effect time and concentration of nicotine on hPDLCs autophagy were screened by Western blot method. The formation of hPDLCs autophagy and the expression of autophagy marker LC3 were detected by transmission electron microscopy (TEM) and immunofluorescence staining. Results the expression of LC3 鈪,
本文編號:1857285
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