本文選題：miR-h + 缺氧　； 參考：《實用口腔醫(yī)學雜志》2014年03期

【摘要】：目的:探討miR-520h對缺氧狀態(tài)下人牙周膜細胞(HPDLCs)MMP-2表達的影響。方法:將HPDLCs置于1%氧濃度的孵箱中培養(yǎng)0、12、24、48和72 h。用實時熒光定量RT-PCR(qRT-PCR)和Western blot檢測細胞中MMP-2 mRNA和蛋白的表達。構建野生型和突變型MMP-2表達載體,用TargetScan和miRanda等軟件預測作用于MMP-2基因3'-UTR靶向miRNA,雙熒光素酶報告基因檢測系統(tǒng)驗證靶向MMP-2 3'-非翻譯區(qū)(3'-UTR)的miRNA。用qRT-PCR和Western blot技術檢測miR-520h對MMP-2表達的調控。結果:HPDLCs在缺氧培養(yǎng)中MMP-2 mRNA和蛋白的表達量明顯下調(P0.01)。軟件預測在MMP-2的3'-UTR 516bp位置有一個與miR-520h的結合位點,HPDLCs被轉染pre-miR-520后,其表達量增高(P0.01),MMP-2載體的熒光素酶活性降低(P0.05)。miR-520h都抑制了HPDLCs中MMP-2 mRNA和蛋白表達(P0.05)。結論:miR-520h可抑制缺氧狀態(tài)下牙周膜細胞MMP-2基因表達。
[Abstract]:Aim: to investigate the effect of miR-520h on the expression of MMP-2 in human periodontal ligament cells under hypoxia. Methods: HPDLCs was incubated in 1% oxygen incubator for 48 and 72 hours. The expression of MMP-2 mRNA and protein was detected by real-time quantitative RT-PCR and Western blot. The wild-type and mutant MMP-2 expression vectors were constructed, and TargetScan and miRanda were used to predict the effect of MMP-2 gene 3'-UTR targeting miRNAs. The double-luciferase reporter gene detection system was used to verify the MIRNAs targeting the MMP-2 _ (3) -untranslated region. The regulation of MMP-2 expression by miR-520h was detected by qRT-PCR and Western blot techniques. Results the expression of MMP-2 mRNA and protein in hypoxic culture was significantly down-regulated (P 0.01). The software predicted that at the 3'-UTR 516bp site of MMP-2, there was a binding site for miR-520h and HPDLCs were transfected into pre-miR-520, and the expression level of P0.01MMPP-2 was increased. The decrease of luciferase activity of P0.05N. MiR-520h inhibited the expression of MMP-2 mRNA and protein in HPDLCs. Conclusion the expression of MMP-2 gene in periodontal ligament cells can be inhibited by 10% miR-520h.
【作者單位】： 第三軍醫(yī)大學新橋醫(yī)院口腔科;
【基金】：國家自然科學基金(編號:81170934) 第三軍醫(yī)大學青年創(chuàng)新基金(編號:2011D274)
【分類號】：R781.4

【參考文獻】

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1 ;Comparison of microRNA profiles of human periodontal diseased and healthy gingival tissues[J];International Journal of Oral Science;2011年03期

2 李昂,陳悅,茍建重,饒國洲,韓冰;慢性牙周炎基礎治療前后齦溝液中MMP-2,TIMP-2水平的變化[J];實用口腔醫(yī)學雜志;2005年03期

3 丁巖;凌厲;林杰;卜瑞芳;;2型糖尿病合并牙周病患者齦溝液中基質金屬蛋白酶-3水平和意義[J];實用口腔醫(yī)學雜志;2013年01期

4 馬萬里;葉紅;辛建保;白明;;缺氧對肺動脈成纖維細胞MMP-2、TIMP-1表達的影響[J];中國病理生理雜志;2006年02期

5 湯楚華,施生根,牛忠英,黨平,鄭燕華,史亮;酶消化組織塊法原代培養(yǎng)人牙周膜成纖維細胞的初步研究[J];中華醫(yī)學雜志;2004年08期

【共引文獻】

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1 閆嘉晴;林崇韜;孫營營;;不同年齡供體人牙周膜細胞原代培養(yǎng)成功率的比較[J];吉林大學學報(醫(yī)學版);2010年01期

2 陳小紅;唐曉蕾;羅新宇;柏全民;;青少年與成人固定正畸牙周狀況改變的臨床研究[J];東南國防醫(yī)藥;2011年05期

3 余占海;張國英;張小恒;趙健雄;杜建東;楊倩;;玻片覆蓋組織塊法原代培養(yǎng)人牙周膜成纖維細胞及其生物活性的觀察[J];廣東醫(yī)學;2007年09期

4 劉娟;孟波;趙華;趙紅宇;謝寶儀;;人牙周膜細胞不同分離培養(yǎng)方法的比較研究[J];廣東牙病防治;2011年12期

5 王璽坤;晏潔;劉順會;劉昆云;葛秀君;劉思敏;錢聚標;陳燕;;行瘀清熱膠囊對大鼠前列腺成纖維細胞增殖及凋亡的影響[J];廣東藥學院學報;2010年05期

6 張麗;王永;張軍梅;侯豫;吳承龍;王文秀;;體外培養(yǎng)人牙周膜細胞方法的探討[J];貴陽醫(yī)學院學報;2008年05期

7 姜竹玲;王祥;張斌;關呈超;高睿;;人牙周膜成纖維細胞體外培養(yǎng)的研究進展[J];國際口腔醫(yī)學雜志;2012年05期

8 Bo Gao;Liwei Zheng;;microRNA Expression in Rat Apical Periodontitis Bone Lesion[J];Bone Research;2013年02期

9 劉墨;陳絳媛;孔祥波;阮毅;;兩種方法培養(yǎng)人牙周膜成纖維細胞成功率的比較[J];廣東牙病防治;2013年09期

10 陳新;譚新偉;劉洪臣;馮巖;;鹽酸米諾環(huán)素聯(lián)合替硝唑治療2型糖尿病合并牙周病的臨床研究[J];現(xiàn)代藥物與臨床;2014年06期

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1 張鵬;NKG2D介導的同種異體NK細胞對人腦膠質瘤細胞殺傷效應的實驗研究[D];鄭州大學;2011年

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3 侯睿;體外不同動態(tài)力學應變對人牙周膜成纖維細胞整合素α_5、α_6、β_1表達和細胞增殖、功能活性的影響的初步研究[D];四川大學;2005年

4 聶蓉蓉;微弧氧化—水熱處理法在純鈦表面制備生物陶瓷涂層及其細胞相容性的實驗研究[D];四川大學;2006年

5 朱慶黨;體外不同動態(tài)張、壓應力刺激調控人牙周膜成纖維細胞功能和結構的實驗研究[D];四川大學;2006年

6 冷斌;人牙齦成纖維細胞對口腔常用抗生素的跨膜轉運[D];中國人民解放軍軍醫(yī)進修學院;2007年

7 丁一;補腎固齒丸治療牙周炎療效和安全性臨床評價及其作用機制初探[D];四川大學;2007年

8 鐘泉;hPDGF-B基因修飾的組織工程化復合物修復牙周組織缺損的實驗研究[D];福建醫(yī)科大學;2009年

9 李文亮;中低位直腸癌放化同期治療敏感性相關生物分子標志物篩選預測研究[D];昆明醫(yī)科大學;2011年

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5 吳麗瑋;慢性牙周炎基礎治療前后齦溝液Ⅰ型前膠原羧基末端肽的變化[D];河北醫(yī)科大學;2011年

6 張欣;脂聯(lián)素對人牙周膜成纖維細胞作用的體外研究[D];復旦大學;2011年

7 申濤;動態(tài)張應力促人牙周膜干細胞向成骨細胞分化的研究[D];第三軍醫(yī)大學;2011年

8 李劍;腦膠質瘤MGMT、MRP、P-gp表達與化療藥物敏感試驗的相關性研究[D];河南科技大學;2011年

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本文編號：1856148