本文選題：miR-h + 缺氧　； 參考：《實用口腔醫(yī)學(xué)雜志》2014年03期

【摘要】：目的:探討miR-520h對缺氧狀態(tài)下人牙周膜細胞(HPDLCs)MMP-2表達的影響。方法:將HPDLCs置于1%氧濃度的孵箱中培養(yǎng)0、12、24、48和72 h。用實時熒光定量RT-PCR(qRT-PCR)和Western blot檢測細胞中MMP-2 mRNA和蛋白的表達。構(gòu)建野生型和突變型MMP-2表達載體,用TargetScan和miRanda等軟件預(yù)測作用于MMP-2基因3'-UTR靶向miRNA,雙熒光素酶報告基因檢測系統(tǒng)驗證靶向MMP-2 3'-非翻譯區(qū)(3'-UTR)的miRNA。用qRT-PCR和Western blot技術(shù)檢測miR-520h對MMP-2表達的調(diào)控。結(jié)果:HPDLCs在缺氧培養(yǎng)中MMP-2 mRNA和蛋白的表達量明顯下調(diào)(P0.01)。軟件預(yù)測在MMP-2的3'-UTR 516bp位置有一個與miR-520h的結(jié)合位點,HPDLCs被轉(zhuǎn)染pre-miR-520后,其表達量增高(P0.01),MMP-2載體的熒光素酶活性降低(P0.05)。miR-520h都抑制了HPDLCs中MMP-2 mRNA和蛋白表達(P0.05)。結(jié)論:miR-520h可抑制缺氧狀態(tài)下牙周膜細胞MMP-2基因表達。
[Abstract]:Aim: to investigate the effect of miR-520h on the expression of MMP-2 in human periodontal ligament cells under hypoxia. Methods: HPDLCs was incubated in 1% oxygen incubator for 48 and 72 hours. The expression of MMP-2 mRNA and protein was detected by real-time quantitative RT-PCR and Western blot. The wild-type and mutant MMP-2 expression vectors were constructed, and TargetScan and miRanda were used to predict the effect of MMP-2 gene 3'-UTR targeting miRNAs. The double-luciferase reporter gene detection system was used to verify the MIRNAs targeting the MMP-2 _ (3) -untranslated region. The regulation of MMP-2 expression by miR-520h was detected by qRT-PCR and Western blot techniques. Results the expression of MMP-2 mRNA and protein in hypoxic culture was significantly down-regulated (P 0.01). The software predicted that at the 3'-UTR 516bp site of MMP-2, there was a binding site for miR-520h and HPDLCs were transfected into pre-miR-520, and the expression level of P0.01MMPP-2 was increased. The decrease of luciferase activity of P0.05N. MiR-520h inhibited the expression of MMP-2 mRNA and protein in HPDLCs. Conclusion the expression of MMP-2 gene in periodontal ligament cells can be inhibited by 10% miR-520h.
【作者單位】： 第三軍醫(yī)大學(xué)新橋醫(yī)院口腔科;
【基金】：國家自然科學(xué)基金(編號:81170934) 第三軍醫(yī)大學(xué)青年創(chuàng)新基金(編號:2011D274)
【分類號】：R781.4

【參考文獻】

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【共引文獻】

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本文編號：1856148