海藻酸鈉殼聚糖支架復(fù)合成骨細(xì)胞特異性多肽修復(fù)兔顱骨缺損
本文選題:成骨細(xì)胞特異性識(shí)別多肽 + 顱骨缺損。 參考:《安徽醫(yī)科大學(xué)》2017年碩士論文
【摘要】:成骨細(xì)胞特異性識(shí)別多肽是以人牙齦成纖維細(xì)胞為陰性吸附細(xì)胞,人顱骨成骨細(xì)胞為陽(yáng)性靶細(xì)胞,對(duì)噬菌體展示十二肽庫(kù)進(jìn)行全細(xì)胞差減篩選,獲得的與人成骨細(xì)胞有高度親和性的多肽分子。其氨基酸序列為VLAVPWSEPGYL(纈氨酸-亮氨酸-丙氨酸-纈氨酸-脯氨酸-色氨酸-絲氨酸-谷氨酸-脯氨酸-甘氨酸-絡(luò)氨酸-亮氨酸)。本實(shí)驗(yàn)依據(jù)組織工程學(xué)的原理,采用殼聚糖、海藻酸鈉為支架,成骨細(xì)胞特異性識(shí)別多肽為信號(hào)因子,將二者復(fù)合植入兔顱骨極限骨缺損模型中,以評(píng)價(jià)該特異性多肽的促成骨效應(yīng)。為臨床上解決顱頜面部骨缺損及口腔種植中普遍存在的骨質(zhì)、骨量不足問(wèn)題提供新的研究思路和治療方法。具體內(nèi)容如下:第一部分:海藻酸鈉/殼聚糖/多肽復(fù)合凝膠的制備在無(wú)菌條件下將海藻酸鈉/多肽混懸液與殼聚糖溶液混合,維持二者為非凝膠化的溶液狀態(tài),并通過(guò)攪拌反應(yīng)使得多肽均勻分布于混合液中,調(diào)節(jié)多肽到目的終濃度160μg/ml,在一定溫度條件下制備成海藻酸鈉/殼聚糖/多肽復(fù)合凝膠。同時(shí)制備不加載成骨細(xì)胞特異性識(shí)別多肽的復(fù)合凝膠,在實(shí)驗(yàn)中用作對(duì)照組。第二部分:制備兔顱骨極限骨缺損動(dòng)物模型選取健康新西蘭兔12只,制備兔顱骨雙側(cè)15 mm直徑圓形極限骨缺損。實(shí)驗(yàn)組缺損處植入海藻酸鈉/殼聚糖/多肽水凝膠,對(duì)照組植入海藻酸鈉/殼聚糖復(fù)合水凝膠,空白組不植入任何載體及藥物,隨機(jī)分組。術(shù)后8周活體行CBCT掃描、高頻鉬靶X線掃描、HE染色檢測(cè)成骨效果。結(jié)果表明:影像學(xué)及組織形態(tài)學(xué)結(jié)果可見,實(shí)驗(yàn)組缺損區(qū)成骨量明顯多于對(duì)照組及空白組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論:成骨細(xì)胞特異性識(shí)別多肽可促進(jìn)兔顱骨缺損的骨修復(fù)。
[Abstract]:Human gingival fibroblasts were used as negative adsorption cells and human skull osteoblasts as positive target cells. The phage display dodecapeptide library was screened by whole cell subtractive screening. Polypeptide molecules with high affinity to human osteoblasts were obtained. Its amino acid sequence is VLAVPWSEPGYL (valine-leucine-alanine -valine-proline-tryptophan-serine-glutamate-proline-glycine-complex acid-leucine). According to the principle of tissue engineering, chitosan and sodium alginate were used as scaffolds, and osteoblast specific recognition polypeptide was used as signal factor. To evaluate the bone-promoting effect of the specific polypeptide. To provide a new way of thinking and treatment for the clinical solution of craniomaxillofacial bone defects and oral implants. The main contents are as follows: the preparation of sodium alginate / chitosan / polypeptide composite gel in aseptic condition mixed sodium alginate / polypeptide suspensions with chitosan solution to maintain a non-gelatinized solution state. The polypeptide was evenly distributed in the mixed solution by stirring reaction, and the final concentration of the polypeptide was adjusted to 160 渭 g / ml. The sodium alginate / chitosan / polypeptide composite gel was prepared under certain temperature. At the same time, the composite gel without loading osteoblast specific recognition polypeptide was prepared and used as control group. In the second part, 12 healthy New Zealand rabbits were selected to establish the animal model of rabbit cranial limit bone defect. The bilateral 15mm diameter circular limited bone defect of rabbit skull was prepared. Sodium alginate / chitosan / polypeptide hydrogel was implanted in the defect of the experimental group, and sodium alginate / chitosan hydrogel was implanted in the control group. 8 weeks after operation, CBCT scanning was performed in vivo, and high frequency molybdenum target X-ray scanning was used to detect the osteogenic effect by HE staining. The results showed that the amount of osteogenesis in the experimental group was significantly higher than that in the control group and the blank group, and the difference was statistically significant (P 0.05). Conclusion: osteoblast specific recognition peptide can promote bone repair of rabbit skull defect.
【學(xué)位授予單位】:安徽醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2017
【分類號(hào)】:R782
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本文編號(hào):1837948
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