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口腔過敏綜合征小鼠模型的建立與評價

發(fā)布時間:2018-04-16 16:29

  本文選題:口腔過敏綜合征 + 食物過敏 ; 參考:《遵義醫(yī)學(xué)院》2017年碩士論文


【摘要】:目的:建立由花生提取物誘導(dǎo)的口腔過敏綜合征小鼠模型,并對該模型進行評價和深入探討。方法:將20只6~8周齡雌性BALB/c小鼠,按隨機原則分為正常對照組和模型組,每組10只。模型組小鼠在乙醚輕度麻醉下將花生粗提取物(Crude peanut extract,CPE)和霍亂毒素(Cholera Toxin,CT)以10:1(W/W)混合致敏液(浸泡在一個棉花球上)直接接觸口腔雙側(cè)頰部黏膜,每日3次,連續(xù)14天;第15天,CPE(CPE 10 mg/只)通過接觸小鼠口腔黏膜和灌胃激發(fā)。對照組小鼠同時期采用相同體積無菌PBS處理。對激發(fā)后的小鼠過敏癥狀進行評估。4h后處死小鼠,利用蘇木素-伊紅(Hematoxylin and eosin,HE)或甲苯胺藍(Toluidine blue,TB)染色法對小鼠的口腔黏膜和空腸組織進行組織染色以及嗜酸性粒細胞(Eosinophils,EOS)和肥大細胞(Mast cell,MC)浸潤情況檢測,酶聯(lián)免疫吸附法(Enzymelinked immunosorbent assay,ELISA)測定血清CPE特異性Ig E(CPE-s Ig E)水平,血清小鼠肥大細胞蛋白酶-1(Mouse mast cell protease-1,m MCP-1)以及脾細胞培養(yǎng)上清液中白細胞介素-4(Interleukin-4,IL-4)和干擾素-γ(Interferon-γ,IFN-γ)水平。結(jié)果:1.過敏癥狀評估:CPE抗原經(jīng)口腔黏膜接觸和灌胃激發(fā)小鼠后,小鼠全身過敏反應(yīng)5~15 min內(nèi)表現(xiàn)明顯,最初的反應(yīng)主要包括皮膚反應(yīng)與口腔和嘴唇周圍的浮腫,頻繁搔抓嘴巴和摩擦鼻子,腹瀉,活動減少,呼吸系統(tǒng)如氣喘和呼吸困難,而PBS處理小鼠無任何過敏反應(yīng)。CPE模型組小鼠過敏癥狀評分顯著高于PBS對照組小鼠(p0.001),差異有統(tǒng)計學(xué)意義。2.蘇木素-伊紅染色顯示,PBS對照組小鼠口腔黏膜很少見炎癥細胞,CPE模型組小鼠口腔黏膜及黏膜下層EOS浸潤,微小血管擴張、充血。甲苯胺藍染色顯示,CPE模型組小鼠口腔黏膜出現(xiàn)大量的MC,體積較大,形態(tài)不規(guī)則,部分MC呈脫顆粒狀,PBS對照組則很少看到MC。與PBS對照組相比較,CPE模型組MC、脫顆粒MC、EOS數(shù)量均顯著增多(p0.01),差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。3.蘇木素-伊紅染色顯示,CPE模型組小鼠空腸絨毛參差不齊,絨毛脫落或稀疏,結(jié)構(gòu)破壞,黏膜固有層EOS數(shù)量明顯增多;PBS對照組小鼠空腸黏膜結(jié)構(gòu)完整,層次清晰,腸絨毛排列整齊。CPE模型組小鼠空腸黏膜可見較多的MC,其中有部分MC脫顆粒。與PBS對照組相比較,CPE模型組小鼠空腸MC、脫顆粒MC和EOS計數(shù)均增多(p0.05),差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。4.與PBS對照組相比較,CPE模型組小鼠血清CPE特異性Ig E以及m MCP-1水平均有升高(p0.05),差異有統(tǒng)計學(xué)意義。5.與PBS對照組相比較,CPE模型組小鼠脾臟細胞培養(yǎng)上清液IL-4水平升高(P0.05),差異有統(tǒng)計學(xué)意義,而CPE模型組小鼠脾細胞培養(yǎng)上清液IFN-γ的表達與PBS組比較(p0.05),差異無統(tǒng)計學(xué)意義。結(jié)論:成功構(gòu)建了花生抗原誘導(dǎo)的OAS小鼠模型,其口腔黏膜過敏反應(yīng)由Ig E介導(dǎo),同時伴有腸道黏膜過敏反應(yīng)的發(fā)生。該模型模擬了人體OAS的致病過程,符合OAS的免疫學(xué)特點。
[Abstract]:The result is 1: 1.
【學(xué)位授予單位】:遵義醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2017
【分類號】:R-332;R781.2

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本文編號:1759741

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