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不同濃度熊果酸對破骨細胞增殖分化的作用及其意義

發(fā)布時間:2018-04-11 12:08

  本文選題:熊果酸 + 破骨細胞 ; 參考:《吉林大學(xué)》2017年碩士論文


【摘要】:目的:研究熊果酸(UA)對破骨樣細胞(OC)增殖分化的影響,探討其在正畸牙根吸收過程中的作用及與OC之間的關(guān)系。方法:對小鼠單核/巨噬細胞系RAW264.7細胞進行破骨樣細胞誘導(dǎo),采用抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色法及骨吸收陷窩實驗鑒定誘導(dǎo)是否成功。采用CCK-8法選取對RAW264.7細胞無細胞生物毒性的適宜濃度的UA,觀察其對RAW264.7增殖分化影響。實驗組在培養(yǎng)液中加入梯度濃度1.0、2.5、5.0、10.0、20.0和40.0μmol·L~(-1) UA,對照組不加UA。采用RT-PCR方法檢測適宜濃度UA(5.0μmol·L~(-1))與OC培養(yǎng)第5d時OC標志性基因TRAP、NFATc1水平表達,觀察其對OC分化的影響。結(jié)果:TRAP染色及骨吸收陷窩觀察,誘導(dǎo)培養(yǎng)RAW264.7細胞5d后,可見TRAP染色陽性細胞;掃描電鏡下吸收陷窩呈圓形、橢圓形等,底壁較粗糙,邊界較清晰。表明RAW264.7細胞成功向破骨樣細胞分化。CCK-8檢測表明,高濃度UA(10.0μmol·L~(-1))顯著抑制OC增殖;適宜濃度UA(5.0μmol·L~(-1)),既在生物安全濃度范圍內(nèi),又抑制OC增殖;低濃度UA(2.5μmol·L~(-1))無作用;且第5d時,中濃度UA可顯著抑制OC標志性基因的表達水平,說明UA可抑制OC分化。結(jié)論:UA與OC增殖分化有關(guān)聯(lián),其在適宜濃度(5.0μmol·L~(-1))下對OC起抑制作用,且呈時間依賴性。
[Abstract]:Aim: to study the effect of ursolic acid (UAA) on the proliferation and differentiation of osteoclasts (OCs), and to explore the role of UAA in the root resorption of orthodontic teeth and its relationship with OC.Methods: osteoclast-like cells were induced from mouse mononuclear / macrophage RAW264.7 cells. The results of tartrate-resistant acid phosphatase staining and bone resorption trap test were used to determine whether the induction was successful or not.CCK-8 method was used to select the appropriate concentration of RAW264.7 cells without cytotoxicity and to observe the effect of UAU on the proliferation and differentiation of RAW264.7 cells.In the experimental group, the gradient concentration of 1.0 渭 mol / L and 40.0 渭 mol / L ~ (-1) UAA was added to the culture medium, while the control group was not added with UA.The RT-PCR method was used to detect the expression of OC signature gene TRAPN ATC1 at the 5th day of culture with the appropriate concentration of UA(5.0 渭 mol L ~ (-1) and OC, and to observe its effect on the differentiation of OC.Results the positive cells of TRAP staining were found in RAW264.7 cells after 5 days of induction and culture, and the absorptive lacunae were round, elliptical, rough in bottom wall and clear in boundary under scanning electron microscope.The medium concentration of UA could significantly inhibit the expression of OC signature gene, indicating that UA could inhibit the differentiation of OC.Conclusion there is a correlation between the proliferation and differentiation of OC at the appropriate concentration of 5.0 渭 mol / L ~ (-1), and it has a time-dependent inhibitory effect on OC.
【學(xué)位授予單位】:吉林大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2017
【分類號】:R783.5

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本文編號:1735955


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