本文選題：Notch信號通路　切入點：人DLL　出處：《暨南大學學報(自然科學與醫(yī)學版)》2017年03期

【摘要】：目的:構建人全長DLL1基因真核表達質粒及過表達DLL1對人口腔鱗癌細胞增殖的影響.方法:PCR擴增人全長DLL1基因,酶切和測序鑒定后克隆至真核表達載體pCMV-Tag4并構建真核重組質粒DLL1/pC MVTag4,瞬時轉染HEK293T細胞并通過實時熒光定量PCR(Q-PCR)和Western blot鑒定DLL1的表達;進一步檢測DLL1在SCC15等3株人口腔鱗癌細胞中的表達;DLL1/pCMV-Tag4瞬時轉染SCC15細胞,Q-PCR和Western blot檢測過表達及MTT檢測DLL1過表達對細胞SCC15增殖的影響.結果:真核重組質粒DLL1/pCMV-Tag4在HEK293T細胞中成功表達;DLL1在口腔鱗癌細胞中的表達高于正�？谇患毎�;DLL1/pCMV-Tag4在SCC15細胞中獲得表達且過表達DLL1抑制SCC15細胞的增殖.結論:人全長DLL1分子在HEK293T及SCC15細胞中獲得表達,過表達DLL1抑制口腔鱗癌細胞SCC15的增殖.
[Abstract]:Aim: to construct the eukaryotic expression plasmid of human full-length DLL1 gene and the effect of overexpression of DLL1 on the proliferation of human oral squamous cell carcinoma cells.Methods the full-length human DLL1 gene was amplified by 1: PCR and cloned into eukaryotic expression vector pCMV-Tag4 after restriction endonuclease digestion and sequencing. The eukaryotic recombinant plasmid DLL1/pC MV Tag4 was constructed. The recombinant plasmid DLL1/pC MV Tag4 was transiently transfected into HEK293T cells. The expression of DLL1 was identified by real-time fluorescence quantitative PCR PCR Q-PCR and Western blot.The expression of DLL1 in three human oral squamous cell carcinoma (SCC15) cells was further detected by Q-PCR, Western blot and DLL1 overexpression in SCC15 cells transfected with DLL1 / pCMV-Tag4 and the effect of MTT on SCC15 proliferation.Results: the expression of DLL1 in HEK293T cells was higher than that in normal oral squamous cell carcinoma cells (DL1 / pCMV-Tag4), and the overexpression of DLL1 inhibited the proliferation of SCC15 cells.Conclusion: human full-length DLL1 was expressed in HEK293T and SCC15 cells, and overexpression of DLL1 inhibited the proliferation of SCC15 in oral squamous carcinoma cells.
【作者單位】： 南方醫(yī)科大學檢驗與生物技術學院生物治療研究所;珠海南醫(yī)大生物醫(yī)藥公共服務平臺有限公司;
【基金】：國家高技術研究發(fā)展技術(863計劃)項目(2014AA020909) 國家自然科學基金-廣東省聯(lián)合基金重點項目(U1401223) 國家自然科學基金面上項目(81470831) 廣東省科技計劃創(chuàng)新載體建設項目(2013B090800036);廣東省科技計劃項目(2015A040404021;2016B090919019)
【分類號】：R739.8

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本文編號：1729259