血鏈球菌細(xì)菌素對念珠菌細(xì)胞表面疏水性和細(xì)胞膜鈣離子通透性的影響
發(fā)布時間:2018-04-09 04:08
本文選題:血鏈素 切入點:白色念珠菌 出處:《佳木斯大學(xué)》2014年碩士論文
【摘要】:目的: 研究研究血鏈球菌細(xì)菌素(Streptococcus sanguis bacteriocin)對單獨及混合培養(yǎng)的白色念珠菌(Candida albicans, C.albicans)及熱帶念珠菌(Candida tropicalis,C.tropicalis)細(xì)胞表面疏水性的影響;研究血鏈球菌細(xì)菌素對單獨及混合培養(yǎng)的白色念珠菌及熱帶念珠菌細(xì)胞膜鈣離子通透性的影響。進(jìn)一步探討血鏈球菌細(xì)菌素對念珠菌的抑制作用。 方法: 1.復(fù)蘇并傳代血鏈球菌標(biāo)準(zhǔn)株ATCC10556,通過低溫高速離心、超聲破碎等方法提取血鏈球菌細(xì)菌素,即血鏈素。 2.采用二倍稀釋法將血鏈素稀釋成不同濃度,并使其作用于單獨及混合培養(yǎng)的白色念珠菌及熱帶念珠菌,于37℃,,80rpm恒溫振蕩培養(yǎng),12小時后,采用平板菌落計數(shù)法觀察血鏈素的最小抑菌濃度(MIC)。 3.運用微生物黏著碳?xì)浠衔颷1]的方法,將1g/L的血鏈素分別作用于單獨及混合培養(yǎng)的白色念珠菌及熱帶念珠菌,共同于37℃,80rpm恒溫振蕩培養(yǎng),12小時后測定菌懸液OD值,并計算白色念珠菌及熱帶念珠菌的疏水率。 4.分別向單獨及混合培養(yǎng)的白色念珠菌及熱帶念珠菌菌懸液中裝載鈣離子熒光探針(Fluo-3AM),利用激光共聚焦顯微鏡,觀察血鏈素作用12小時后,細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度的變化。 結(jié)果: 1.血鏈素對單獨培養(yǎng)的白色念珠菌及熱帶念珠菌的MIC為0.25g/L,血鏈素對等量混合培養(yǎng)的白色念珠菌及熱帶念珠菌的MIC為0.5g/L。 2.血鏈素作用后,單獨及混合培養(yǎng)的白色念珠菌及熱帶念珠菌的細(xì)胞表面疏水率均明顯降低,與對照組相比具有顯著差異(P0.05)。 3.在血鏈素的作用下,單獨及混合的白色念珠菌及熱帶念珠菌細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度均明顯降低,與對照組相比具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。 結(jié)論: 1.血鏈素對單獨及混合培養(yǎng)的白色念珠菌及熱帶念珠菌具有顯著抑制作用。 2.血鏈素可以導(dǎo)致白色念珠菌及熱帶念珠菌細(xì)胞表面疏水性降低。 3.血鏈素可以導(dǎo)致白色念珠菌及熱帶念珠菌細(xì)胞膜鈣離子通透性增強(qiáng)。
[Abstract]:Objective:To study the effect of Streptococcus sanguis on the surface hydrophobicity of Candida albicanss (C. albicansi) and Candida tropicalis-C. tropicalis cells cultured separately and in mixture.To study the effect of streptococcus sanguis bacteriocin on the calcium permeability of Candida albicans and Candida tropicalis cultured separately and in mixture.To further investigate the inhibitory effect of streptococcus sanguis bacteriocin on Candida.Methods:1.The standard strain ATCC 10556 of Streptococcus sanguis was resuscitated and subcultured. Streptococcus sanguis bacteriocin was extracted by low temperature and high speed centrifugation and ultrasonic fragmentation.2.The hemoglobin was diluted into different concentrations by double dilution method and acted on Candida albicans and Candida tropicalis cultured separately and in mixture. After 12 hours of shaking culture at 37 鈩
本文編號:1724766
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