本文選題：骨保護素　切入點：聚乳酸羥基乙酸　出處：《鄭州大學(xué)》2017年碩士論文

【摘要】：背景與目的骨量不足一直是制約口腔種植適用性和成功率的重要因素。隨著破骨細(xì)胞骨吸收機制相關(guān)研究的不斷深入,抑制破骨細(xì)胞分化形成的骨代謝平衡調(diào)控可能為骨量不足問題的解決提供了一種可行方案。目前研究顯示,骨保護素/核因子-κB受體活化因子配體/核因子-κB受體活化因子(OPG/RANKL/RANK)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路在破骨細(xì)胞的激活過程中發(fā)揮關(guān)鍵作用,OPG可以與RANKL競爭性結(jié)合,阻斷其與破骨細(xì)胞前體、成熟破骨細(xì)胞表面的RANK受體結(jié)合,從而抑制破骨細(xì)胞的分化形成并加快其凋亡。OPG在預(yù)防口腔正畸效果反彈、治療絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松、體外RAW264.7細(xì)胞系誘導(dǎo)培養(yǎng)等方面的研究也確認(rèn)了其抑制破骨細(xì)胞分化形成、減少骨量丟失的作用。由于OPG全身給藥可能引發(fā)心血管、骨硬化癥等系統(tǒng)并發(fā)癥,局部直接用藥又容易藥物流失,目前有學(xué)者提出OPG局部緩釋給藥的用藥途徑以提高其利用率,降低用藥風(fēng)險。PLGA作為最常用的生物降解型材料,以其為載體構(gòu)建的藥物緩釋給藥系統(tǒng)具有良好的生物相容性。本課題擬通過PLGA包裹rh OPG構(gòu)建微球緩釋系統(tǒng),對比分析傳統(tǒng)和改良球/液分離方法所得緩釋微球在形態(tài)結(jié)構(gòu)、載釋藥特性方面的差異;通過體外破骨細(xì)胞誘導(dǎo)培養(yǎng),驗證rh OPG/PLGA微球緩釋系統(tǒng)的生物安全性、生物有效性,為下一步的動物實驗提供支持。方法1、復(fù)乳溶劑揮發(fā)法配合球/液傳統(tǒng)分離法和改良分離法制備空白PLGA微球和rh OPG-PLGA微球,并通過激光粒徑分析儀、光學(xué)和電子顯微鏡、rh OPG-ELISA檢測對比分析微球粒徑、形態(tài)、載藥率、包封率以及釋藥特性。2、處死4周齡SD大鼠,分離、提純脛、股骨全骨髓細(xì)胞,隨機設(shè)置空白PLGA組、rh OPG/PLGA組和對照組進行實驗因素處理,倒置顯微鏡下觀察及HE染色、TRAP染色分析細(xì)胞生長狀態(tài)、細(xì)胞類型和數(shù)量,SPSS 21.0對實驗數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析。結(jié)果1、傳統(tǒng)分離組:空白PLGA微球粒徑(152±13)um,rh OPG-PLGA微球粒徑(151±21)um,微球形態(tài)不規(guī)整,有粘連,空白PLGA微球鏡下見中央透光或折光圓形亮區(qū);rh OPG載藥率5.25*10-7,包封率62.49*10-2,1d突釋率為27.25*10-2,28d累計釋藥89.91*10-2。2、改良分離組:空白PLGA微球粒徑(142±19)um,rh OPG-PLGA微球粒徑(157±16)um,形態(tài)圓整,無粘連,微球表面微孔均勻;rh OPG載藥率7.69*10-7,包封率51.72*10-2,1d突釋率為37.96*10-2,28d累計釋藥98.27*10-2。3、細(xì)胞培養(yǎng):空白PLGA組和對照組可見TRAP陽性的破骨細(xì)胞或破骨樣細(xì)胞,胞漿紅染、有大小不等的空泡,胞膜邊緣不規(guī)則、有偽足樣突起。rh OPG-PLGA組觀察到相對較多單核細(xì)胞生成,TRAP陽性細(xì)胞較少或者無。4、TRAP陽性細(xì)胞計數(shù):空白PLGA組和對照組差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);rh OPG-PLGA組與其余兩組差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論1、復(fù)乳溶劑揮發(fā)法制備的rh OPG/PLGA緩釋微球在粒徑分布、載藥率、包封率以及釋藥特性方面均達到了預(yù)期效果,改良球/液分離相較于傳統(tǒng)分離法可以提高藥物利用率、減少微球粘連。2、rh OPG/PLGA微球緩釋系統(tǒng)可以在體外抑制全骨髓細(xì)胞向破骨細(xì)胞的分化形成,具有良好的生物活性、生物安全性。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：鄭州大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號】：R783.6

【參考文獻】

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本文編號：1691841