量子點(diǎn)熒光探針檢測(cè)人舌鱗狀細(xì)胞癌荷瘤裸鼠模型早期下頜下淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的研究
本文選題:舌鱗狀細(xì)胞癌 切入點(diǎn):量子點(diǎn) 出處:《華西口腔醫(yī)學(xué)雜志》2014年03期
【摘要】:目的利用量子點(diǎn)標(biāo)記的特異性細(xì)胞角蛋白抗體QDs605-CK(AE1/AE3)免疫熒光探針檢測(cè)人舌鱗狀細(xì)胞癌荷瘤裸鼠早期下頜下淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移率及微轉(zhuǎn)移率,并與傳統(tǒng)的免疫組織化學(xué)(IHC)染色及蘇木精-伊紅(HE)染色方法進(jìn)行比較,為舌鱗狀細(xì)胞癌的早期診斷與治療提供一種新的檢測(cè)方法。方法傳代培養(yǎng)人舌鱗狀細(xì)胞癌Tca8113細(xì)胞,接種于18只裸鼠舌體內(nèi)(不過(guò)中線),建立人舌癌荷瘤裸鼠下頜下淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移模型。接種6周后,處死裸鼠,解剖下頜下淋巴結(jié),將同一淋巴結(jié)分為兩份。一份作石蠟包埋半連續(xù)切片,行HE染色和IHC檢測(cè);另一份即刻液氮冷凍,制作冰凍切片行QDs605-CK(AE1/AE3)熒光探針檢測(cè)。分別計(jì)算3種方法檢測(cè)出的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移率和微轉(zhuǎn)移率。結(jié)果量子點(diǎn)標(biāo)記的免疫熒光染色檢測(cè)出裸鼠下頜下淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移率為66.7%,其中微轉(zhuǎn)移率為38.9%;IHC染色檢測(cè)的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移率為61.1%,其中微轉(zhuǎn)移率為33.3%;HE染色檢測(cè)的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移率為27.8%。經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,3種方法的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=6.379,P0.05),量子點(diǎn)標(biāo)記的免疫熒光染色和IHC檢測(cè)都優(yōu)于HE染色,但是量子點(diǎn)標(biāo)記的免疫熒光染色和IHC染色間的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=0.120,P0.05)。結(jié)論量子點(diǎn)標(biāo)記的QDs605-CK(AE1/AE3)免疫熒光探針能準(zhǔn)確定位于下頜下淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的腫瘤細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)內(nèi),發(fā)出紅色熒光,其特異性強(qiáng),分辨率高,背景清晰,能夠用于淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移灶及微轉(zhuǎn)移灶的檢測(cè)。
[Abstract]:Objective to detect the submandibular lymph node metastasis rate and micrometastasis rate in nude mice bearing human tongue squamous cell carcinoma by using QDs605-CKAE1 / AE3 immunofluorescence probe labeled with QDS-605-CKAE3 specific cytokeratin antibody (QDs605-CKAE1 / AE3). Compared with the traditional immunohistochemical staining and hematoxylin-eosin (HEH) staining, a new method for the early diagnosis and treatment of tongue squamous cell carcinoma (TSCC) was provided. Methods Human tongue squamous cell carcinoma (Tca8113) cells were subcultured. The submandibular lymph node metastasis model of human tongue cancer bearing nude mice was established by inoculating in 18 nude mice tongue (but midline). Six weeks after inoculation, nude mice were killed and submandibular lymph nodes were dissected. The same lymph node was divided into two parts. One was paraffin-embedded semi-continuous section, HE staining and IHC detection, and the other was immediately frozen liquid nitrogen. Frozen sections were made and detected with QDs605-CKAE1 / AE3 fluorescence probe. The lymph node metastasis rate and micrometastasis rate detected by three methods were calculated respectively. Results the submandibular lymph node metastasis rate of nude mice detected by quantum dot immunofluorescence staining was 66.7%, and that of QDs605-CKAE1 / AE3 fluorescence probe was determined by QDs605-CKAE1 / AE3 fluorescence probe. The median micrometastasis rate was 38.9% and the lymph node metastasis rate detected by IHC staining was 61.1%, of which the micrometastasis rate was 33.3% and the lymph node metastasis rate detected by HE staining was 27.80.The difference among the three methods was statistically significant (蠂 26.379U P0.05G, QDS-labeled immunofluorescence). Light staining and IHC detection were better than HE staining. But there was no significant difference between QDS-labeled immunofluorescence staining and IHC staining (蠂 ~ 2 = 0.120, P 0.05). Conclusion the QDs605-CKAE1 / AE3 probe can accurately locate in the cytoplasm of tumor cells with submandibular lymph node metastasis and emit red fluorescence. It has strong specificity, high resolution and clear background. It can be used to detect lymph node metastasis and micrometastasis.
【作者單位】: 廣東省深圳市寶安區(qū)婦幼保健院口腔科;廣東醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院口腔科;
【基金】:湛江市科技專項(xiàng)分配基金資助項(xiàng)目(201020301)
【分類號(hào)】:R739.8
【參考文獻(xiàn)】
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,本文編號(hào):1661768
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