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探究牙髓干細胞在殼聚糖-纖維蛋白原復合支架上的黏附與增殖

發(fā)布時間:2018-03-09 14:22

  本文選題:殼聚糖 切入點:纖維蛋白原 出處:《新疆醫(yī)科大學》2017年碩士論文 論文類型:學位論文


【摘要】:目的:檢測牙髓干細胞在殼聚糖-纖維蛋白原復合支架材料上的黏附與增殖情況。方法:(1)采用改良酶消化法分離提取C57乳鼠牙髓干細胞,傳代培養(yǎng)至第3代,體外成脂成骨誘導分化對細胞進行鑒定;(2)測定殼聚糖-纖維蛋白原復合支架材料的孔徑及孔隙率;(3)將殼聚糖-纖維蛋白原復合支架材料與第3代小鼠牙髓干細胞共培養(yǎng),MTT法檢測細胞1~8天的增殖情況;(4)掃描電鏡觀察殼聚糖-纖維蛋白原復合支架材料的形態(tài),細胞黏附、增殖及基質(zhì)分泌情況。結果:(1)成功分離培養(yǎng)C57小鼠牙髓干細胞,經(jīng)成脂成骨誘導分化后結果呈陽性;(2)殼聚糖-纖維蛋白原復合支架材料孔徑為(105.32±22.10)μm,孔隙率為(87.714±1.276)%;(3)牙髓干細胞在殼聚糖-纖維蛋白原復合支架材料上的增殖曲線與對照組基本一致,均為“S”型,培養(yǎng)第4~8天實驗組增殖速度顯著快于對照組,差異有顯著性意義(P0.05);(4)掃描電鏡下細胞接種第2天與殼聚糖-纖維蛋白原復合支架材料黏附緊密,生長狀態(tài)良好,接種第4天,細胞明顯開始增殖,體積增大,有豐富的細胞外基質(zhì),接種第6天,鋪滿與整個材料表面及空隙。結論:(1)牙髓干細胞提取便捷,并表現(xiàn)出成脂成骨的生物學特性,是適合牙髓組織工程的種子細胞。(2)殼聚糖-纖維蛋白原復合材料是一種適宜牙髓干細胞黏附與增殖的支架材料。
[Abstract]:Objective: to investigate the adhesion and proliferation of dental pulp stem cells on chitosan / fibrinogen composite scaffolds. Methods: C57 dental pulp stem cells were isolated and cultured to the third generation by modified enzyme digestion method. Determination of pore size and porosity of chitosan / fibrinogen composite scaffold material by in vitro adipogenic osteogenic induction and differentiation) the chitosan / fibrinogen composite scaffold material and the third generation mouse dental pulp stem cells were used for the determination of pore size and porosity of chitosan / fibrinogen composite scaffold. MTT assay was used to detect the proliferation of cells for 8 days. Scanning electron microscope (SEM) was used to observe the morphology of chitosan fibrinogen composite scaffold. Results the dental pulp stem cells of C57 mice were isolated and cultured successfully by cell adhesion, proliferation and matrix secretion. The results of adipogenic osteogenesis induced differentiation were positive. The pore size of chitosan / fibrinogen composite scaffold was 105.32 鹵22.10 渭 m, the porosity was 87.714 鹵1.276%. The proliferation curve of dental pulp stem cells on chitosan fibrinogen composite scaffold was basically the same as that of control group. The proliferation rate of the experimental group was significantly faster than that of the control group on the 4th day of culture. The difference was significant (P 0.05). Under the scanning electron microscope (SEM), the cells adhered closely to the chitosan / fibrinogen composite scaffold material on the 2nd day, and the growth state was good. On the 4th day of inoculation, the cells began to proliferate obviously, the volume increased, and there was abundant extracellular matrix. On the 6th day of inoculation, the cells were covered with the whole material surface and space. Conclusion the dental pulp stem cells are easy to extract and show the biological characteristics of adipogenic osteogenesis. Chitosan-fibrinogen composite is a kind of scaffold material suitable for dental pulp stem cell adhesion and proliferation.
【學位授予單位】:新疆醫(yī)科大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2017
【分類號】:R783.1

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本文編號:1588905


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