人頜骨間充質(zhì)干細(xì)胞的外泌體在巨噬細(xì)胞調(diào)控中的作用
本文關(guān)鍵詞: 頜骨間充質(zhì)干細(xì)胞(OMMSCs) 外泌體(Exo) miRNA 巨噬細(xì)胞 出處:《實(shí)用口腔醫(yī)學(xué)雜志》2017年03期 論文類型:期刊論文
【摘要】:目的:探討頜骨骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞分泌的外泌體(OMMSCs-Exo)的特性及其在調(diào)控巨噬細(xì)胞功能中可能發(fā)揮的作用。方法:體外培養(yǎng)OMMSCs,檢測(cè)其克隆形成及多向分化能力。提取上清液中外泌體,透射電鏡觀察其形態(tài),蛋白印跡法檢測(cè)其表面特異標(biāo)志CD63、CD81。將外泌體與巨噬細(xì)胞作用24 h后用共聚焦顯微鏡觀察兩者的作用方式,實(shí)時(shí)定量PCR檢測(cè)外泌體內(nèi)免疫相關(guān)miR-223和miR-let-7c表達(dá)及與共培養(yǎng)后巨噬細(xì)胞中miRNA表達(dá)。結(jié)果:人OMMSCs符合間充質(zhì)干細(xì)胞特性,OMMSCs-Exo分泌的外泌體近似圓形,直徑在60~160 nm之間,表達(dá)表面標(biāo)志CD63、CD81:內(nèi)含有與巨噬細(xì)胞調(diào)控相關(guān)的miRNA如miR-223和miR-let-7c等,能被巨噬細(xì)胞吞噬,共培養(yǎng)后巨噬細(xì)胞中miR-223含量增加。結(jié)論:人OMMSCs-Exo及其攜帶的miRNA可能參與了巨噬細(xì)胞功能的調(diào)控。
[Abstract]:Objective: to investigate the characteristics of OMMSCs-Exo) secreted by bone marrow mesenchymal stem cells (BMSCs) and its role in regulating the function of macrophages. Methods: OMMSCs was cultured in vitro. The ability of clone formation and multidirectional differentiation was detected. The supernatant secretions were extracted. The morphology of the supernatant was observed by transmission electron microscope. The surface specific marker CD63 was detected by Western blot. CD81.After the exocrine and macrophage were treated for 24 h, the mode of action was observed by confocal microscope. Real-time quantitative PCR was used to detect the expression of immune-related miR-223 and miR-let-7c in vitro and the expression of miRNA in macrophages after co-culture. Human OMMSCs accorded with the characteristics of mesenchymal stem cells. The exocrine body secreted by OMMSCs-Exo was approximately circular, with a diameter of 60 ~ 160nm, and expressed the surface marker CD63. CD81: it contains miRNA related to macrophage regulation, such as miR-223 and miR-let-7c, which can be swallowed by macrophages. Conclusion: human OMMSCs-Exo and its miRNA may be involved in the regulation of macrophage function.
【作者單位】: 廣州醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院口腔科;
【基金】:廣州市科信局科技惠民專項(xiàng)資助(編號(hào):2014Y2-00058) 廣州市屬高校科研計(jì)劃科技類一般項(xiàng)目(編號(hào):2012C096)
【分類號(hào)】:R782
【正文快照】: 頜骨來源的間充質(zhì)干細(xì)胞(orofacial bone-marrow-derived MSCs,OMMSCs)可以從頜面部整形外科手術(shù)廢棄的頜骨碎片獲得,且OMMSCs增殖及成骨能力均強(qiáng)于長(zhǎng)骨來源的間充質(zhì)干細(xì)胞(BMMSCs)[1]。間充質(zhì)干細(xì)胞具有多向分化能力并且具有免疫調(diào)節(jié)的能力,可調(diào)控巨噬細(xì)胞的功能[2-3],骨髓間
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