細(xì)胞間隙連接蛋白43基因在斑馬魚牙齒早期發(fā)育中的表達(dá)
本文關(guān)鍵詞:細(xì)胞間隙連接蛋白43基因在斑馬魚牙齒早期發(fā)育中的表達(dá) 出處:《華西口腔醫(yī)學(xué)雜志》2015年04期 論文類型:期刊論文
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【摘要】:目的探討細(xì)胞間隙連接蛋白43(cx43)基因在斑馬魚早期胚胎中的表達(dá)模式,為進(jìn)一步研究其在牙齒發(fā)育過程中的功能奠定基礎(chǔ)。方法提取受精后72 h的斑馬魚胚胎總RNA,逆轉(zhuǎn)錄合成c DNA,特異性擴(kuò)增cx43基因片段,連接到PGEMT載體并判斷連接方向,選擇相應(yīng)的RNA聚合酶體外轉(zhuǎn)錄,合成地高辛標(biāo)記的cx43基因反義m RNA探針。運(yùn)用全時(shí)相胚胎原位雜交技術(shù)檢測斑馬魚胚胎發(fā)育早期cx43基因在牙齒發(fā)育部位的表達(dá)分布,茜素紅染色法比較cx43原位雜交表達(dá)區(qū)域與咽齒解剖部位的關(guān)系。結(jié)果獲得了cx43基因的反義m RNA探針。cx43基因在斑馬魚受精后各個(gè)時(shí)期咽弓牙齒相應(yīng)部位均可見到強(qiáng)棕褐色陽性信號(hào)。受精后9 d時(shí)cx43原位雜交表達(dá)部位與咽齒解剖部位基本重疊一致。結(jié)論 cx43基因參與牙胚發(fā)育和礦化過程,且主要在礦化晚期發(fā)揮關(guān)鍵調(diào)控作用。
[Abstract]:Objective to investigate the expression pattern of intercellular connexin 43cx43) gene in zebrafish early embryos. Methods Total RNAs of zebrafish embryos at 72 hours after fertilization were extracted, c DNAs were synthesized by reverse transcription, and cx43 gene fragments were amplified specifically. Ligation to the PGEMT vector and determine the orientation of the ligation, select the corresponding RNA polymerase transcription in vitro. Digoxigenin-labeled antisense m RNA probe of cx43 gene was synthesized and the expression distribution of cx43 gene in the early stage of embryonic development of zebrafish was detected by in situ hybridization. The relationship between the expression region of cx43 in situ hybridization and the anatomical location of pharynx teeth was compared by alizarin red staining. Results the antisense m of cx43 gene was obtained. RNA probe. Cx43 gene can be seen in the corresponding parts of pharyngeal arch teeth of zebrafish at all stages after fertilization. The expression site of cx43 in situ hybridization was consistent with the anatomic site of pharynx tooth. Conclusion cx43 gene is involved in the development and mineralization of tooth germ. And mainly in the late mineralization play a key regulatory role.
【作者單位】: 重慶醫(yī)科大學(xué)附屬口腔醫(yī)院牙體牙髓科·口腔疾病與生物醫(yī)學(xué)重慶市重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【基金】:國家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(31371473) 重慶市醫(yī)學(xué)重點(diǎn)學(xué)科建設(shè)基金資助項(xiàng)目(《牙體牙髓病學(xué)》)
【分類號(hào)】:Q786;R78
【正文快照】: 牙齒發(fā)育是一種復(fù)雜的生理過程,主要通過上皮和間充質(zhì)間的相互作用完成,期間涉及多種生長因子和信號(hào)途徑,在特定的時(shí)空調(diào)控下共同作用最終成形。細(xì)胞間隙連接蛋白43(connexin 43,cx43)直接調(diào)控細(xì)胞間的連接通訊,進(jìn)行信息和能量的傳遞,進(jìn)而調(diào)控細(xì)胞的新陳代謝和增殖分化等一系
【參考文獻(xiàn)】
相關(guān)期刊論文 前1條
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【共引文獻(xiàn)】
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3 鄭昭t,
本文編號(hào):1375601
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