本文關(guān)鍵詞：鈦離子對(duì)T細(xì)胞膜電位及Kv1.3通道的影響　出處：《廣西醫(yī)科大學(xué)》2016年碩士論文　論文類(lèi)型：學(xué)位論文

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【摘要】：目的：觀察鈦離子與T細(xì)胞作用后細(xì)胞膜電位的改變、細(xì)胞內(nèi)鈣離子含量的變化及Kv1.3通道表達(dá)情況之間的關(guān)系。探討鈦離子對(duì)T細(xì)胞活化過(guò)程中膜電位及Kv1.3通道的影響。方法：1、體外培養(yǎng)Jurkat T細(xì)胞,MTT比色法檢測(cè)鈦離子對(duì)T細(xì)胞的增殖效應(yīng),確定對(duì)T細(xì)胞具有最大增殖效應(yīng)的鈦離子濃度和作用時(shí)間。2、根據(jù)是否用植物血凝素(PHA)預(yù)活化將Jurkat T細(xì)胞分為PHA(+)及PHA(-)兩個(gè)大組,兩組細(xì)胞按加入鈦離子濃度的不同分別設(shè)立低、中、高濃度組及對(duì)照組,相對(duì)應(yīng)以25μmol/L,50μmol/L,100μmol/L,0μmol/L的鈦離子進(jìn)行干預(yù),24h后離心收集各組細(xì)胞,流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞膜電位及胞漿鈣離子濃度的變化。實(shí)時(shí)熒光定量多聚酶鏈反應(yīng)(Real-time PCR)檢測(cè)鈦離子與T細(xì)胞作用24h后Kv1.3通道的mRNA的表達(dá)情況。同時(shí)觀察細(xì)胞外有無(wú)鈣離子時(shí)細(xì)胞膜電位及鈣離子濃度的變化。結(jié)果：1、100μmol/L的鈦離子與T細(xì)胞作用24h能使之產(chǎn)生最大的增殖效應(yīng)(P0.05),當(dāng)鈦離子的濃度在0-100μmol/L之間時(shí),這種增殖效應(yīng)具有濃度依賴(lài)性,當(dāng)鈦離子濃度大于100μmol/L時(shí),鈦離子對(duì)T細(xì)胞的效應(yīng)由增殖轉(zhuǎn)為抑制。2、在胞外含Ca2+或不含Ca2+的狀態(tài)下,低、中、高三個(gè)濃度組的鈦離子使PHA(+)及PHA(-)T細(xì)胞膜電位去極化,與對(duì)照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。對(duì)于PHA (+)T細(xì)胞,各濃度組之間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。對(duì)于PHA (-)T細(xì)胞,當(dāng)胞外不含Ca2+時(shí),各濃度組之間比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。3、在胞外含Ca2+的情況下,低、中、高三個(gè)濃度組的鈦離子使PHA(+)及PHA(-)T細(xì)胞內(nèi)游離的Ca2+濃度上升,與對(duì)照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。當(dāng)胞外不含Ca2+時(shí),各濃度組的PHA(+)T細(xì)胞內(nèi)Ca2+濃度上升高于對(duì)照組(P0.05)。各濃度組的PHA(-)T細(xì)胞內(nèi)濃度上升的幅度與對(duì)照組比較無(wú)明顯差異(P0.05)。4、低、中、高三個(gè)濃度組的鈦離子使PHA(+)T細(xì)胞胞膜表面的Kv1.3通道m(xù)RNA的相對(duì)表達(dá)量逐步上調(diào)(P0.05),與對(duì)照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。中、高濃度組的鈦離子使PHA(-)T細(xì)胞Kv1.3mRNA的相對(duì)表達(dá)量高于對(duì)照組(P0.05),低濃度組與對(duì)照組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論：1、鈦離子的濃度在0-100μmol/L之間時(shí)能使體外培養(yǎng)的T細(xì)胞產(chǎn)生增殖效應(yīng)。2.25μM/L,50μM/L,100μM/L的鈦離子可以使T細(xì)胞胞膜電位出現(xiàn)去極化改變,同時(shí)胞膜表面Kv1.3通道的mRNA表達(dá)增加,促進(jìn)胞外的Ca2+內(nèi)流,使胞內(nèi)游離的Ca2+濃度上升。3、鈦離子對(duì)于預(yù)活化狀態(tài)下T細(xì)胞的膜電位、胞內(nèi)Ca2+濃度及胞膜表面Kv1.3通道的影響更為顯著。
【學(xué)位授予單位】：廣西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類(lèi)號(hào)】：R783.6

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本文編號(hào)：1314380