本文關鍵詞：云南煙葉提取物輔酶Q10對實驗性牙周炎抗炎抗氧化的機制研究

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【摘要】：[目的]通過構建大鼠實驗性牙周炎模型以及RAW264.7巨噬細胞的體外炎癥模型,探討云南煙葉提取物輔酶Q10 (CoQ10)對牙周炎的治療作用及機制,為臨床上牙周炎的藥物防治提供理論依據(jù)。[方法]①選取6-8周齡清潔級SD大鼠126只。隨機抽取18只作為正常組(N組),其余108只通過雙側上頜第二磨牙絲線結扎+黏性高糖飲食復制大鼠牙周炎模型。并將成模大鼠按隨機區(qū)組的分組方法分為模型組(P組)、替硝唑組(T組)、維生素C組(VC組)、CoQ10低劑量組(LQ組)、CoQ10中劑量組(MQ組)、CoQ10高劑量組(HQ組),每組18只。LQ、MQ、HQ組分別灌胃給予15、30、60mg/kg的CoQ10;T組首日灌胃給予200mg/kg的替硝唑,次日灌胃給予100mg/kg的替硝唑；VC組灌胃給予100mg/kg的維生素C；N組、P組則按等量的CoQ10溶劑(調和油)灌胃。各組按上述劑量連續(xù)灌胃,每天一次。第2、4、6周末每組隨機抽取6只大鼠,進行腹主動脈采血+EDTA抗凝,離心血樣并收集上清血漿樣本,檢測炎癥因子IL-1β、TNF-α、PGE2和氧化應激指標SOD、GSH-Px、MDA的水平；收集上頜骨樣本,檢測牙槽骨喪失(ABL)值,以及進行HE染色和TRAP染色。②大腸桿菌脂多糖LPS刺激小鼠巨噬細胞RAW264.7構建體外炎癥模型。實驗分組為模型組；不同濃度CoQ10組(1.875、3.75、7.5、15、30μmol/L);維生素C組(200μmol/L),以上各組分別加入終濃度為1 mg/L的LPS刺激液,同時設正常組。37℃、5%CO2共同孵育24 h,而后收集細胞上清液,ELISA檢測上清液中IL-1β、TNF-α和PGE2的含量;收集細胞,檢測氧化應激指標SOD、GSH-Px、MDA。數(shù)據(jù)均由SPSS17.0數(shù)據(jù)統(tǒng)計軟件分析。[結果]1.造模4周后,造模大鼠牙齦指數(shù)、ABL值均高于N組(P0.05),HE染色觀察到造模大鼠的結合上皮與牙體分離,固有層炎性細胞浸潤,上皮釘突向結締組織伸長,膠原纖維排列紊亂,可見牙槽嵴頂?shù)钠茐奈?即造模成功。2. 在6周的觀察期內,灌胃CoQ10大鼠的ABL值及破骨細胞數(shù)與P組之間差異無統(tǒng)計學意義(P0.05)。T組、VC組的ABL值及破骨細胞數(shù)與CoQ10各劑量組相似(P0.05)。3.高、中、低劑量的CoQ10均能顯著抑制牙周炎大鼠外周血中IL-1β、TNF-α、PGE2的水平,提升牙周炎大鼠外周血中SOD、GSH-Px的活性、降低MDA含量(P0.05)。且CoQ10各劑量組對三種炎癥因子的抑制作用與T組、VC相似(P0.05)。CoQ10各劑量組對三種抗氧化指標的改善與VC組之間差異不具有統(tǒng)計學意義(P0.05)4.CoQ10能顯著抑制LPS刺激下RAW264.7細胞對IL-1β、TNF-α、PGE2的分泌,提高細胞內SOD、GSH-Px的活性和降低MDA含量(P0.05)。且效果與維生素C相似(P0.05)。[結論]1.通過對大鼠行雙側上頜第二磨牙絲線結扎+黏性高糖飲食,4周即可成功建立大鼠牙周炎模型。2.在6周的觀察期內,未發(fā)現(xiàn)CoQ10對大鼠牙槽骨喪失及相應破骨細胞數(shù)產(chǎn)生影響,尚不能認為CoQ10可改善牙周炎所導致的骨吸收。3.本實驗中發(fā)現(xiàn)通過對大鼠牙周炎模型灌胃給予CoQ10,可顯著減少大鼠血漿中IL-1β、TNF-α、PGE2的水平,顯著增加SOD、GSH-Px的活力,減少MDA的量,改善機體氧化應激狀態(tài),使炎癥反應降低。4.體外實驗表明CoQ10可抑制LPS刺激下RAW264.7細胞IL-1β、TNF-α、PGE2的釋放,增加細胞內SOD、GSH-Px的活力,減少MDA含量。表明CoQ10具有抗炎和抗氧化的能力,可抑制氧化應激,并降低炎癥反應。
【學位授予單位】：昆明醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R781.4

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本文編號：1165607