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不同加載頻率拉應(yīng)力對(duì)兔髁突軟骨細(xì)胞增殖分化的影響

發(fā)布時(shí)間:2017-11-05 02:01

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【摘要】:實(shí)驗(yàn)?zāi)康模禾接懖煌虞d頻率的拉應(yīng)力對(duì)兔髁突軟骨細(xì)胞增殖、分化的影響,進(jìn)而明確其對(duì)軟骨內(nèi)成骨過程的作用,以期為臨床上尋找快速、高效的促進(jìn)顳下頜關(guān)節(jié)改建及下頜骨生長的方法提供理論依據(jù)。 實(shí)驗(yàn)方法:體外分離2周齡新西蘭兔髁突軟骨細(xì)胞,取第2代細(xì)胞接種于特制加力板上,采用四點(diǎn)彎曲細(xì)胞力學(xué)加載儀對(duì)細(xì)胞進(jìn)行加載,根據(jù)加載頻率分為靜止性(即加載頻率為0HZ)加力組,周期性(加載頻率分別為0.1HZ,0.5HZ,1HZ)加力組,每天加力2h,共3天,力值均為2000μ,相當(dāng)于細(xì)胞發(fā)生0.2%的形變量。同時(shí)設(shè)置未加力組細(xì)胞作為空白對(duì)照,其余條件相同。細(xì)胞行力學(xué)加載,倒置相差顯微鏡觀察細(xì)胞形態(tài)、排列。采用CCK8檢測(cè)細(xì)胞增殖水平,流式細(xì)胞儀測(cè)定細(xì)胞DNA含量(S期細(xì)胞百分?jǐn)?shù)),計(jì)算增殖指數(shù)(PI)。實(shí)時(shí)熒光定量RT-PCR檢測(cè)成軟骨相關(guān)基因(Sox9,col2a1)及老化相關(guān)基因(Runx2,col10a1)的表達(dá)水平。 實(shí)驗(yàn)結(jié)果:靜止性(0HZ)加力組細(xì)胞增殖速率顯著提高,周期性(0.1,0.5,1HZ)加力組細(xì)胞的增殖速率顯著性降低(P0.01);靜止性(0HZ)加力組與其他加力組及對(duì)照組相比,DNA合成量增多(P<0.05),增殖指數(shù)顯著性升高(P<0.01)。Sox9,Runx2的表達(dá)具有一致性,表現(xiàn)為在較高頻率組即0.5HZ組和1HZ組表達(dá)最高,0.1HZ組次之,靜止性(0HZ)加力組最低(與對(duì)照組相比P<0.01)。周期性(0.1,,0.5,1HZ)加力組的col2a1的表達(dá)高于靜止性加力(0HZ)組和對(duì)照組,而col10a1的表達(dá)在高頻率組即1HZ組最高,靜止性(0HZ)加力組最低。 結(jié)論:不同加載頻率拉應(yīng)力對(duì)髁突軟骨細(xì)胞增殖分化有差異性影響。提示可以通過改變加載模式調(diào)控髁突軟骨細(xì)胞軟骨內(nèi)成骨過程。
【學(xué)位授予單位】:吉林大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號(hào)】:R782

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本文編號(hào):1142079

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