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牙周膜干細(xì)胞對口腔表皮樣癌KB細(xì)胞增殖影響的研究

發(fā)布時間:2017-10-22 08:19

  本文關(guān)鍵詞:牙周膜干細(xì)胞對口腔表皮樣癌KB細(xì)胞增殖影響的研究


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【摘要】:目的探討牙周膜干細(xì)胞(periodontal ligament stem cells,PDLSCs)對口腔表皮樣癌細(xì)胞系KB細(xì)胞增殖的影響及其機制。方法取拔除的阻生第三磨牙和正畸減數(shù)牙,采用酶消化法分離PDLSCs。應(yīng)用Transwell培養(yǎng)小室將PDLSCs和KB細(xì)胞以不同的比例混合培養(yǎng),建立共培養(yǎng)體系。48h后,應(yīng)用MTT法觀察KB細(xì)胞增殖情況。在部分實驗的培養(yǎng)體系中加入抗IL-6抗體,同法觀察KB細(xì)胞增殖。收集共培養(yǎng)48h的KB細(xì)胞,通過流式細(xì)胞術(shù)檢測其凋亡情況,RT-PCR法檢測其Caspase-3的表達(dá),蛋白質(zhì)印跡法檢測其β-catenin表達(dá)情況。收集PDLSCs,采用RT-PCR法檢測其IL-6的表達(dá)。結(jié)果 PDLSCs與KB細(xì)胞共培養(yǎng)48h,PDLSCs∶KB細(xì)胞數(shù)量比為1∶1時,吸光度值為1.33±0.18,與單獨KB細(xì)胞組的2.65±0.33相比,差異有統(tǒng)計學(xué)意義,P=0.041;PDLSCs∶KB細(xì)胞數(shù)量比為5∶1時,吸光度值為1.06±0.18,與單獨KB細(xì)胞組相比,差異有統(tǒng)計學(xué)意義,P=0.001。表明PDLSCs能夠顯著抑制KB細(xì)胞的增殖。PDLSCs∶KB細(xì)胞數(shù)量比為1∶1時,KB細(xì)胞的凋亡率為(39±5)%,與單獨KB細(xì)胞組的(15±4)%相比,P=0.022;PDLSCs∶KB細(xì)胞數(shù)量比為5∶1時,KB細(xì)胞的凋亡率為(51±7)%,與單獨KB細(xì)胞組相比,P=0.001。在PDLSCs與KB細(xì)胞的共培養(yǎng)體系中,加入抗IL-6抗體后,PDLSCs抑制KB細(xì)胞的增殖作用顯著減輕。RT-PCR實驗發(fā)現(xiàn),共培養(yǎng)48h后的PDLSCs的IL-6表達(dá)升高。蛋白質(zhì)印跡法檢測結(jié)果發(fā)現(xiàn),培養(yǎng)48h后的KB細(xì)胞β-catenin表達(dá)無明顯變化。結(jié)論 PDLSCs能抑制口腔表皮樣癌KB細(xì)胞的增殖和促進(jìn)KB細(xì)胞凋亡。
【作者單位】: 濰坊醫(yī)學(xué)院附屬益都中心醫(yī)院藥劑科;濰坊醫(yī)學(xué)院附屬益都中心醫(yī)院口腔科;濰坊市人民醫(yī)院牙科;
【關(guān)鍵詞】牙周膜 間充質(zhì)干細(xì)胞 口腔癌 細(xì)胞增殖
【基金】:國家自然科學(xué)基金(81070799) 山東省優(yōu)秀中青年科學(xué)家科研獎勵基金(BS2010SW033)
【分類號】:R739.8
【正文快照】: 中華腫瘤防治雜志,2015,22(7):502-506Chin J Cancer Prev Treat,2015,22(7):502-506牙周膜干細(xì)胞(periodontal ligament stem cells,PDLSCs)是來源于牙周膜組織的間充質(zhì)干細(xì)胞(mes-enchymal stem cells,MSCs),具有較高的克隆形成率和細(xì)胞增殖率,能夠骨向、脂肪向和軟骨向分化

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本文編號:1077517


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