本文關(guān)鍵詞：急性多重應(yīng)激致認(rèn)知損傷的機(jī)制及防治研究

  更多相關(guān)文章： 急性多重應(yīng)激 樹突結(jié)構(gòu) LW-AFC PCR芯片 蛋白-蛋白相互作用網(wǎng)絡(luò)

【摘要】：應(yīng)激(stress)是在內(nèi)外環(huán)境變化的刺激下,機(jī)體出現(xiàn)的非特異性全身反應(yīng),包括精神、神經(jīng)、內(nèi)分泌和免疫等方面。在眾多應(yīng)激的人群中,軍人是一個(gè)特殊的群體。軍人的職業(yè)特點(diǎn)就意味著要經(jīng)常面對高強(qiáng)度的應(yīng)激。戰(zhàn)場應(yīng)激反應(yīng),是軍人在戰(zhàn)爭時(shí)期極易發(fā)生的一種應(yīng)激反應(yīng),包括急性應(yīng)激和慢性應(yīng)激。急性戰(zhàn)場應(yīng)激反應(yīng)多在軍人進(jìn)入突發(fā)、意外、恐怖、緊張、危險(xiǎn)、殘酷的環(huán)境中即刻或幾分鐘內(nèi)出現(xiàn)。其主要表現(xiàn)為生理性的過度激起,可能發(fā)生威脅生命的行為,該行為持續(xù)數(shù)分鐘到數(shù)小時(shí)。發(fā)生急性戰(zhàn)場應(yīng)激反應(yīng)時(shí)易出現(xiàn)記憶力下降、注意力不集中、反應(yīng)能力下降、視覺敏感力和言語交談能力下降、無目的的動(dòng)作、判斷能力下降、很難執(zhí)行甚至是簡單的任務(wù)、軍事作業(yè)能力下降,后期甚至出現(xiàn)創(chuàng)傷后應(yīng)激障礙(post-traumatic stress disorder, PTSD)等現(xiàn)象。慢性戰(zhàn)場應(yīng)激反應(yīng)是軍人長期處于戰(zhàn)爭環(huán)境中所產(chǎn)生的一種應(yīng)激反應(yīng),表現(xiàn)為低活度的狀態(tài)、脫離群體、抑郁、違反紀(jì)律、酗酒和物質(zhì)濫用等現(xiàn)象。因此戰(zhàn)場應(yīng)激使部隊(duì)?wèi)?zhàn)斗力受到嚴(yán)重影響,也是造成非戰(zhàn)斗性減員的主要原因之一。對軍人來說,急性應(yīng)激反應(yīng)所持續(xù)的時(shí)間正是其執(zhí)行作戰(zhàn)、救援、維穩(wěn)、閱兵等任務(wù)的關(guān)鍵期。而在現(xiàn)代高科技下,認(rèn)知能力所占的權(quán)重越來越大。故如果能預(yù)防急性戰(zhàn)場應(yīng)激所造成的認(rèn)知損傷,將能極大地提高部隊(duì)的戰(zhàn)斗力。而目前對于應(yīng)激敏感人員的篩查尚缺乏特異性的生物學(xué)指標(biāo),主要為臨床評定量表。但是該方法存在主觀性強(qiáng)、重復(fù)率低、準(zhǔn)確性和特異性均不高等問題。另一方面,對于戰(zhàn)場急性應(yīng)激,主要的干預(yù)措施為心理咨詢、心理治療,且為事后干預(yù),尚缺乏防治藥物。本研究從急性戰(zhàn)場應(yīng)激所造成的認(rèn)知損傷入手,一方面尋找篩查抗應(yīng)激人員的生物標(biāo)志物,另一方面發(fā)現(xiàn)預(yù)防急性應(yīng)激致認(rèn)知損傷的藥物。為了達(dá)到以上兩方面的目的,本研究首先模擬戰(zhàn)場中突發(fā)的急性復(fù)雜的應(yīng)激因素,建立了急性多重應(yīng)激致認(rèn)知損傷的動(dòng)物模型,并對模型的學(xué)習(xí)記憶能力和血漿皮質(zhì)酮濃度進(jìn)行了檢測；其次,采用高爾基染色技術(shù)對所建立的急性多重應(yīng)激致認(rèn)知損傷模型的神經(jīng)元數(shù)目、樹突以及突觸結(jié)構(gòu)的變化進(jìn)行了檢測;進(jìn)而,采用PCR芯片技術(shù)檢測了急性多重應(yīng)激致認(rèn)知損傷模型的海馬、皮層和血液中可能與應(yīng)激和認(rèn)知有關(guān)分子的mRNA表達(dá)變化,接著將不同部位差異表達(dá)分子及其樹突結(jié)構(gòu)的變化進(jìn)行了相關(guān)性分析,并對其功能進(jìn)行了生物信息學(xué)解析,發(fā)現(xiàn)了急性多重應(yīng)激致認(rèn)知損傷的標(biāo)志性分子；最后,考察了組分中藥LW-AFC對急性多重應(yīng)激致認(rèn)知損傷的預(yù)防作用,發(fā)現(xiàn)LW-AFC具有改善被動(dòng)回避反應(yīng)能力和調(diào)節(jié)皮層相關(guān)分子表達(dá)變化的作用。具體研究結(jié)果如下：一、急性多重應(yīng)激致認(rèn)知損傷的機(jī)制研究1.急性多重應(yīng)激致認(rèn)知損傷動(dòng)物模型的建立模擬戰(zhàn)場中突發(fā)的急性復(fù)雜的應(yīng)激因素,如槍、炮、地雷等武器形成的震波和行軍顛簸、高分貝的噪聲、爆炸引起的強(qiáng)光、饑餓、缺水、裝備束縛、人員擁擠、看到戰(zhàn)友傷亡的場面、發(fā)生于數(shù)小時(shí)內(nèi)。本研究對應(yīng)給予BALB/c小鼠5hr的搖床振蕩、噪音、強(qiáng)光刺激、禁食、禁水、束縛、振蕩時(shí)相互碰撞、看到同伴不舒服狀態(tài)的刺激。其中,根據(jù)光強(qiáng)、振蕩速度及噪音強(qiáng)度參數(shù)的不同將應(yīng)激分為輕、中和重度三個(gè)應(yīng)激程度,檢測三種條件下模型動(dòng)物學(xué)習(xí)記憶能力及應(yīng)激激素水平的變化。結(jié)果如下：1.1急性多重應(yīng)激致認(rèn)知損傷動(dòng)物模型的學(xué)習(xí)記憶能力1.1.1被動(dòng)回避反應(yīng)能力給予BALB/c小鼠三種程度的應(yīng)激后,采用跳臺(tái)實(shí)驗(yàn)方法檢測動(dòng)物被動(dòng)回避反應(yīng)能力。結(jié)果發(fā)現(xiàn),應(yīng)激后成功小鼠的百分率和潛伏期出現(xiàn)程度依賴性地下降,其中重度應(yīng)激組的潛伏期與對照組相比下降明顯(P0.05)。而應(yīng)激后的錯(cuò)誤次數(shù)出現(xiàn)程度依賴性地升高,其中重度應(yīng)激組的錯(cuò)誤次數(shù)與對照組相比差異明顯(P0.05)。這些結(jié)果顯示,急性多重應(yīng)激可以程度依賴性地導(dǎo)致小鼠被動(dòng)回避反應(yīng)能力損傷。1.1.2物體識(shí)別記憶能力采用新異物體識(shí)別實(shí)驗(yàn)方法檢測動(dòng)物的物體識(shí)別記憶能力。結(jié)果發(fā)現(xiàn),對照組及輕度應(yīng)激組動(dòng)物探索新物體的時(shí)間明顯長于探索舊物體的時(shí)間,即對新、舊兩物體探索時(shí)間有明顯差別,說明動(dòng)物仍具有對新異物體感興趣的特性,即對舊物體有記憶能力；而中度應(yīng)激組和重度應(yīng)激組的動(dòng)物對新、舊兩物體的探索時(shí)間無明顯差別,說明應(yīng)激明顯損害了動(dòng)物對舊物體的記憶能力。結(jié)果提示急性多重應(yīng)激程度依賴性地?fù)p傷了受試動(dòng)物的物體識(shí)別記憶能力。1.2急性多重應(yīng)激致認(rèn)知損傷動(dòng)物模型的血漿皮質(zhì)酮含量為檢測不同程度急性多重應(yīng)激條件下受試小鼠血漿皮質(zhì)酮水平的變化,在應(yīng)激開始后30、60、90和120min以及應(yīng)激結(jié)束后4、8和16min,我們對受試動(dòng)物采血,取血漿,并用ELISA的方法檢測了它們血漿皮質(zhì)酮的含量。結(jié)果顯示,無論是在應(yīng)激開始過程中還是結(jié)束后均檢測到三個(gè)應(yīng)激組的血漿皮質(zhì)酮濃度明顯高于對照組,但三者之間無明顯區(qū)別。結(jié)果提示,應(yīng)激可引起血漿皮質(zhì)酮濃度升高,但其濃度變化幅度與應(yīng)激程度的大小無明顯關(guān)系。2.急性多重應(yīng)激對樹突和突觸結(jié)構(gòu)的影響為觀察急性多重應(yīng)激對受試動(dòng)物學(xué)習(xí)記憶相關(guān)腦區(qū)樹突和突觸結(jié)構(gòu)的影響,本研究在給予受試小鼠輕、中和重度應(yīng)激后30min,取一半腦用于高爾基染色觀察腦組織樹突結(jié)構(gòu)和透射電子顯微鏡觀察腦組織突觸超微結(jié)構(gòu)(另一半腦用于分子檢測),并對整個(gè)半腦腦區(qū)及海馬和皮層高爾基染色顯示的樹突長度、分支數(shù)目和樹突棘密度進(jìn)行定量分析。結(jié)果顯示,急性多重應(yīng)激對整個(gè)半腦腦區(qū)、海馬和皮層的神經(jīng)元數(shù)目均無明顯影響,但卻顯著地?fù)p傷了海馬和皮層的樹突和突觸結(jié)構(gòu)。大腦皮層以及其各功能分區(qū)包括視皮層、聽覺皮層和嗅皮層的樹突長度、分支數(shù)目和樹突棘密度測量結(jié)果顯示：與對照組相比,重度應(yīng)激組的整個(gè)大腦皮層的樹突棘密度明顯降低,中度和重度應(yīng)激組視皮層樹突長度明顯縮短,而輕度應(yīng)激組聽覺皮層樹突分支數(shù)目明顯增加。不同應(yīng)激程度組比較的結(jié)果顯示,重度應(yīng)激組聽覺皮層樹突棘密度減少程度顯著高于輕度和中度應(yīng)激組。海馬以及其各分區(qū)包括齒狀回、CA1、CA2和CA3的樹突長度、分支數(shù)目和樹突棘密度測定的結(jié)果顯示,與對照組相比,三種程度的應(yīng)激均降低了海馬和海馬CA1區(qū)的樹突棘密度；輕度應(yīng)激降低了海馬CA1的樹突長度；重度應(yīng)激使海馬CA3區(qū)的樹突分支數(shù)目減少。采用透射電子顯微鏡觀察了不同程度的急性多重應(yīng)激對大腦皮層及海馬突觸結(jié)構(gòu)的影響,結(jié)果發(fā)現(xiàn),急性多重應(yīng)激降低了突觸囊泡的數(shù)目、增加了突觸間隙、降低了突觸的曲率并減少了突觸后膜致密質(zhì)的厚度。其中重度應(yīng)激組與對照組相比對突觸囊泡的數(shù)目以及突觸的曲率降低最明顯,這些結(jié)果顯示,急性多重應(yīng)激程度依賴性地?fù)p傷了海馬的突觸結(jié)構(gòu)。3.急性多重應(yīng)激對中樞和外周mRNA表達(dá)的影響為探索急性多重應(yīng)激對受試小鼠海馬、皮層和外周血中與應(yīng)激和認(rèn)知有關(guān)的基因表達(dá)情況,采用PCR芯片的方法檢測了有文獻(xiàn)報(bào)道的90個(gè)可能與應(yīng)激和認(rèn)知功能有關(guān)分子mRNA的表達(dá)情況,結(jié)果發(fā)現(xiàn)：3.1海馬mRNA的表達(dá)在海馬中,輕度應(yīng)激引起ACHE、NEFH和BACE1等12個(gè)分子的mRNA表達(dá)上調(diào),而KCNA4、GRIA2、GRIA3、PSEN2和ROCKl的mRNA表達(dá)下調(diào)：中度應(yīng)激引起ACHE、 APBB1和UBQLN1等20個(gè)分子的mRNA表達(dá)上調(diào),而KCNA4、GRIA3和PSEN1的mRNA表達(dá)下調(diào)；重度應(yīng)激引起SNCA、NTRK3、KCNA4和NOTCH3的mRNA表達(dá)下調(diào),這些基因的表達(dá)變化隨著應(yīng)激程度的增加出現(xiàn)7種不同的變化形式。而KCNA4、 NOTCH3、NTRK3和SNCA的mRNA表達(dá)呈現(xiàn)應(yīng)激程度依賴性的表達(dá)下降。3.2皮層mRNA的表達(dá)在皮層中,輕度應(yīng)激引起APBB1、CLSTN1和KCNA4等50個(gè)分子的mRNA表達(dá)下調(diào),而KCNA1的mRNA表達(dá)上調(diào)；中度應(yīng)激引起GSN、ITM2C和APBB1等26個(gè)分子的mRNA表達(dá)下調(diào),而KCNA1的mRNA表達(dá)上調(diào)；重度應(yīng)激引起APBB1、CLSTNl和KCNA4等8個(gè)分子的mRNA表達(dá)下調(diào),而KCNA1的mRNA表達(dá)上調(diào),這些基因的表達(dá)變化隨著應(yīng)激程度的增加出現(xiàn)了5種不同的變化形式。3.3外周血mRNA的表達(dá)在外周血中,輕度應(yīng)激引起B(yǎng)ACE1、CRYAB和FGF2等7個(gè)分子的mRNA表達(dá)下調(diào),而FOS的mRNA表達(dá)上調(diào)；中度應(yīng)激引起B(yǎng)ACE1、CRYAB和FGF2等5個(gè)分子的mRNA表達(dá)下調(diào),而AGER、APP和PSEN1等5個(gè)分子的mRNA表達(dá)上調(diào)；重度應(yīng)激引起B(yǎng)ACE1、CRYAB和FGF2等5個(gè)分子的mRNA表達(dá)下調(diào),而FOS的mRNA表達(dá)上調(diào),這些基因的表達(dá)變化隨著應(yīng)激程度的增加出現(xiàn)了5種不同的變化形式。應(yīng)激組BACE1的表達(dá)明顯下調(diào),FOS的表達(dá)明顯上調(diào),二者均與應(yīng)激程度密切相關(guān)。隨著應(yīng)激程度的增加,BACE1下調(diào)程度逐漸增加,而FOS上調(diào)程度逐漸增加。該結(jié)果提示,BACE1和FOS表達(dá)變化的程度與應(yīng)激程度密切相關(guān),而有可能與認(rèn)知損傷程度相關(guān),有作為應(yīng)激程度指示劑或認(rèn)知損傷標(biāo)志物進(jìn)行深入研究的必要。3.4差異表達(dá)分子與樹突結(jié)構(gòu)的相關(guān)性分析為探索差異表達(dá)分子與樹突結(jié)構(gòu)變化之間的相關(guān)性,本研究用Pearson相關(guān)性分析的方法來考察海馬和皮層中樹突結(jié)構(gòu)的改變與差異表達(dá)分子之間的相關(guān)性。結(jié)果發(fā)現(xiàn),在皮層中,應(yīng)激所引起的CLSTN1、PLAU和NOTCH3的表達(dá)變化與聽覺皮層樹突分支數(shù)目的變化呈負(fù)相關(guān)；而TGFB1的表達(dá)變化與視覺皮層中樹突棘數(shù)目的變化呈正相關(guān)。在海馬中,NOTCH3的表達(dá)變化與其CA3區(qū)樹突的分支數(shù)目變化呈正相關(guān)。這些結(jié)果提示,CLSTN1、PLAU, NOTCH3和TGFB1可能是應(yīng)激致認(rèn)知損傷相關(guān)的重要分子。3.5各部位間差異表達(dá)分子的相關(guān)性分析為了探索中樞和外周血之間差異表達(dá)分子的關(guān)系,本研究用Pearson相關(guān)性分析的方法來分析皮層與外周血以及海馬與外周血差異表達(dá)分子之間的相關(guān)性。結(jié)果發(fā)現(xiàn),BACE1在皮層和外周血中的表達(dá)變化呈正相關(guān),提示外周血中BACE1的變化可以反映其在腦中的變化,有作為認(rèn)知損傷標(biāo)志物進(jìn)行深入研究的必要。4.急性多重應(yīng)激致樹突結(jié)構(gòu)損傷相關(guān)分子網(wǎng)絡(luò)為了找出應(yīng)激致樹突結(jié)構(gòu)損傷的分子網(wǎng)絡(luò),本研究用與樹突結(jié)構(gòu)變化具有相關(guān)性的四個(gè)差異表達(dá)變化分子CLSTN1、PLAU、NOTCH3和TGFB1作為種子構(gòu)建PPI網(wǎng)絡(luò)。結(jié)果,我們得到了一個(gè)具有59個(gè)節(jié)點(diǎn)、136個(gè)邊,網(wǎng)絡(luò)直徑為6的PPI網(wǎng)絡(luò)。其中,TGFB1、 PLAU和NOTCH3度數(shù)(degree)分別為28、12和9,處于網(wǎng)絡(luò)的核心位置。綜合實(shí)驗(yàn)和網(wǎng)絡(luò)分析的結(jié)果提示,TGFB1、PLAU和NOTCH3可能是急性多重應(yīng)激致樹突結(jié)構(gòu)損傷的關(guān)鍵分子。進(jìn)而,我們采用DAVID平臺(tái)上的GO功能注釋和KEGG通路富集的方法分別對PPI網(wǎng)絡(luò)中的分子進(jìn)行功能分析。GO功能注釋結(jié)果顯示,跨膜受體蛋白絲氨酸／蘇氨酸激酶信號傳導(dǎo)通路(transmembrane receptor protein serine/threonine kinase signaling pathway).轉(zhuǎn)化生長因子p受體信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路(TGF-beta receptor signaling pathway)、Notch信號傳導(dǎo)通路(notch signaling pathway)排列在前三位。KEGG通路富集的方法所得到的前三位通路分別為：Notch信號傳導(dǎo)通路(notch signaling pathway)、補(bǔ)體和凝血級聯(lián)(complement and coagulation cascades)、轉(zhuǎn)化生長因子p受體信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路(TGF-beta signaling pathway).兩個(gè)方法的結(jié)果提示Notch和轉(zhuǎn)化生長因子p受體信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路與急性多重應(yīng)激致樹突結(jié)構(gòu)損傷關(guān)系最為密切,進(jìn)而提示急性多重應(yīng)激引起樹突結(jié)構(gòu)損傷且最終導(dǎo)致認(rèn)知損傷的最可能的通路是Notch和TGF-beta信號通路。二.LW-AFC對急性多重應(yīng)激致認(rèn)知損傷的預(yù)防作用研究1.LW-AFC對急性多重應(yīng)激模型被動(dòng)回避反應(yīng)能力損傷的作用本研究采用跳臺(tái)實(shí)驗(yàn)檢測了急性多重應(yīng)激后小鼠的被動(dòng)回避反應(yīng)能力。結(jié)果發(fā)現(xiàn),應(yīng)激組的成功小鼠百分率明顯低于對照組,而陽性藥和LW-AFC給藥后對應(yīng)激造成的成功小鼠百分率下降現(xiàn)象均有改善作用,其中LW-AFC中劑量和高劑量效果最好。應(yīng)激組的潛伏期與對照組相比明顯下降,而給予陽性藥和LW-AFC后對應(yīng)激造成的潛伏期下降現(xiàn)象均有改善作用,其中陽性藥和LW-AFC中劑量和高劑量效果較為明顯。另外,應(yīng)激組的錯(cuò)誤次數(shù)明顯高于對照組,而陽性藥、LW-AFC中劑量和高劑量對應(yīng)激所造成的錯(cuò)誤次數(shù)升高現(xiàn)象均有改善作用,其中LW-AFC中劑量和高劑量效果最好。結(jié)果提示LW-AFC預(yù)防給藥對急性多重應(yīng)激造成的被動(dòng)回避反應(yīng)能力損傷具有明顯的改善作用。2. LW-AFC對急性多重應(yīng)激模型mRNA表達(dá)變化的調(diào)節(jié)作用跳臺(tái)實(shí)驗(yàn)結(jié)束后,小鼠斷頭取腦,并分離出皮層,進(jìn)而用PCR芯片的方法檢測了皮層中90個(gè)與應(yīng)激和認(rèn)知功能相關(guān)的分子。結(jié)果發(fā)現(xiàn),應(yīng)激使皮層中NEFHvNEFM、 NSF、PLAU、PRKCA、STAT3、STUB1、APBB1、NTRK3、GRIA2和NOTCH3的表達(dá)下調(diào)。而給予LW-AFC后,NEFH、PLAU、STAT3和STUB1有明顯的上調(diào)的趨勢。3. LW-AFC所調(diào)節(jié)的能夠改善急性多重應(yīng)激模型認(rèn)知損傷的分子網(wǎng)絡(luò)特征應(yīng)激致認(rèn)知損傷是通過擾動(dòng)具有多個(gè)生理功能的網(wǎng)絡(luò)而引起的,LW-AFC是通過調(diào)節(jié)怎樣的分子網(wǎng)絡(luò)而改善急性多重應(yīng)激致認(rèn)知功能的損傷。本研究首先得到了在皮層中LW-AFC所調(diào)節(jié)的4個(gè)應(yīng)激引起差異表達(dá)的分子,即NEFH、PLAU、STAT3和STUB1,以它們作為種子來構(gòu)建PPI網(wǎng)絡(luò),得到了一個(gè)具有9個(gè)節(jié)點(diǎn)、10個(gè)邊,網(wǎng)絡(luò)直徑為4的特異的PPI網(wǎng)絡(luò)。其中網(wǎng)絡(luò)中的9個(gè)分子為MAPK1、STAT3、AR、STUB1、NEFH、 PLAT、PLAU、MET和HGF。提示,LW-AFC可能通過調(diào)節(jié)由MAPK1、STAT3、AR、 STUB1、NEFH、PLAT、PLAU、MET和HGF多個(gè)分子組成的相互作用網(wǎng)絡(luò),進(jìn)而改善急性多重應(yīng)激所引起的被動(dòng)回避反應(yīng)能力損傷。隨后結(jié)合DAVID平臺(tái)上的GO功能注釋和KEGG通路富集的方法分別對LW-AFC所調(diào)節(jié)的PPI網(wǎng)絡(luò)中的分子進(jìn)行功能分析,GO功能注釋結(jié)果顯示酶聯(lián)受體蛋白信號通路(enzyme linked receptor protein signaling pathway)排在首位。而KEGG通路富集的方法發(fā)現(xiàn)癌癥途徑(Pathways in cancer)排在首位。結(jié)果提示,LW-AFC所調(diào)節(jié)的相互作用分子可能參與酶聯(lián)受體蛋白信號通路和癌癥途徑。通過以上研究,得到以下結(jié)論：1.不同程度的急性多重應(yīng)激程度依賴性地引起受試小鼠被動(dòng)回避反應(yīng)能力、物體識(shí)別記憶能力的損傷以及海馬和皮層中樹突和突觸結(jié)構(gòu)的損傷。其所涉及的關(guān)鍵分子為PLAU、NOTCH3和TGFB1,而關(guān)鍵的信號通路為Notch和TGF-beta信號通路。2.外周血中BACE1和FOS的表達(dá)可以反映應(yīng)激程度的改變,有望成為應(yīng)激致認(rèn)知損傷的生物標(biāo)志物。3. LW-AFC對急性多重應(yīng)激所致的認(rèn)知損傷具有保護(hù)作用。其發(fā)揮該作用的途徑可能是調(diào)節(jié)PLAU、NEFH、STAT3和STUB1等所組成的分子相互作用網(wǎng)絡(luò)以及其所涉及的酶聯(lián)受體蛋白信號通路和癌癥途徑。
【關(guān)鍵詞】：急性多重應(yīng)激 樹突結(jié)構(gòu) LW-AFC PCR芯片 蛋白-蛋白相互作用網(wǎng)絡(luò)
【學(xué)位授予單位】：中國人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R749.1
【目錄】：

• 縮略詞表6-9
• 中文摘要9-15
• 英文摘要15-24
• 前言24-29
• 材料與方法29-44
• —、 實(shí)驗(yàn)材料29-35
• 二、 實(shí)驗(yàn)方法35-44
• 實(shí)驗(yàn)結(jié)果44-90
• 第一部分 急性多重應(yīng)激致認(rèn)知損傷的機(jī)制研究44-84
• 1. 急性多重應(yīng)激致認(rèn)知損傷模型的制備44-48
• 1.1 急性多重應(yīng)激致認(rèn)知損傷模型的學(xué)習(xí)記憶能力44-47
• 1.1.1 自主活動(dòng)性篩查44-45
• 1.1.2 應(yīng)激后情緒恢復(fù)45
• 1.1.3 被動(dòng)回避反應(yīng)能力45-46
• 1.1.4 物體識(shí)別記憶能力46-47
• 1.2 急性多重應(yīng)激致認(rèn)知損傷模型血漿的皮質(zhì)酮含量47-48
• 2. 急性多重應(yīng)激對樹突和突觸結(jié)構(gòu)的影響48-59
• 2.1 神經(jīng)元數(shù)目49-50
• 2.2 樹突結(jié)構(gòu)50-58
• 2.2.1 海馬樹突結(jié)構(gòu)50-53
• 2.2.2 皮層樹突結(jié)構(gòu)53-58
• 2.3 突觸結(jié)構(gòu)58-59
• 3. 急性多重應(yīng)激對中樞和外周mRNA表達(dá)的影響59-81
• 3.1 海馬mRNA的表達(dá)60-66
• 3.2 皮層mRNA的表達(dá)66-75
• 3.3 外周血mRNA的表達(dá)75-79
• 3.4 差異表達(dá)變化分子與樹突結(jié)構(gòu)的相關(guān)性分析79-80
• 3.5 各部位間差異表達(dá)變化分子間的相關(guān)性分析80-81
• 4. 急性多重應(yīng)激所致樹突結(jié)構(gòu)損傷相關(guān)分子網(wǎng)絡(luò)81-84
• 第二部分 LW-AFC對急性多重應(yīng)激致認(rèn)知損傷的預(yù)防作用研究84-90
• 1. LW-AFC對急性多重應(yīng)激模型體重的影響84-85
• 2. LW-AFC對急性多重應(yīng)激模型被動(dòng)回避反應(yīng)能力損傷的作用85
• 3. LW-AFC對急性多重應(yīng)激模型mRNA表達(dá)變化的調(diào)節(jié)作用85-88
• 4. LW-AFC調(diào)節(jié)的急性多重應(yīng)激模型的分子網(wǎng)絡(luò)88-90
• 討論90-97
• 結(jié)論97-98
• 參考文獻(xiàn)98-111
• 代表性論著111-125
• 個(gè)人簡歷125-126
• 致謝126

，

本文編號：983650