本文關(guān)鍵詞：跑步鍛煉對轉(zhuǎn)基因AD小鼠海馬作用的研究

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【摘要】：第一部分 跑步鍛煉對不同時(shí)期轉(zhuǎn)基因AD小鼠空間學(xué)習(xí)和記憶能力的作用目的:研究跑步鍛煉對行為學(xué)改變前和行為學(xué)改變后的APP/PS1轉(zhuǎn)基因小鼠空間學(xué)習(xí)和記憶能力的作用,為深入研究跑步鍛煉延緩AD發(fā)生發(fā)展的神經(jīng)生物學(xué)基礎(chǔ)提供理論依據(jù)。方法:6月齡和12月齡雄性APP/PS1轉(zhuǎn)基因小鼠各20只,以及相應(yīng)月齡雄性野生型小鼠各10只。同一月齡的APP/PS1轉(zhuǎn)基因小鼠隨機(jī)分為對照組(AD Control)和跑步組(AD Runner),野生型小鼠則作為野生組(Wild-type)。分別對6月齡和12月齡的AD Runner小鼠進(jìn)行溫和、規(guī)律的跑步鍛煉,AD Control小鼠和Wild-type小鼠則不進(jìn)行跑步鍛煉。跑步鍛煉第一周上午按50 mg/kg的劑量對12月齡小鼠進(jìn)行Brdu腹腔注射,持續(xù)7天;下午分別對6月齡和12月齡的AD Runner小鼠進(jìn)行跑步鍛煉干預(yù),時(shí)間為20 min/天,速度從5m/min逐漸提高至10 m/min,持續(xù)5天,休息2天。自跑步鍛煉第二周開始,停止對12月齡小鼠注射Brdu,繼續(xù)對6月齡和12月齡的AD Runner小鼠進(jìn)行跑步鍛煉干預(yù),時(shí)間為20 min/天,速度維持在10 m/min,每周鍛煉5天,休息2天,為期4個(gè)月。運(yùn)用Morris水迷宮測試小鼠的空間學(xué)習(xí)和記憶能力,第1~6天為定位航行實(shí)驗(yàn),記錄和分析小鼠每天的逃避潛伏期;第7天為空間探索實(shí)驗(yàn),記錄小鼠的穿臺(tái)次數(shù)和小鼠在目標(biāo)象限游泳的時(shí)間。結(jié)果:1、10月齡Wild-type小鼠,AD Control小鼠和AD Runner小鼠的逃避潛伏期存在顯著性差異(p=0.007),其中,AD Control小鼠的逃避潛伏期較Wild-type小鼠的逃避潛伏期顯著性延長(p=0.004),AD Runner小鼠的逃避潛伏期較AD Control小鼠的逃避潛伏期顯著性縮短(p=0.009);2、10月齡Wild-type小鼠,AD Control小鼠和AD Runner小鼠穿越平臺(tái)的次數(shù)和目標(biāo)象限游泳的時(shí)間均存在顯著性差異(p=0.003和p=0.000),其中,AD Control小鼠穿越平臺(tái)的次數(shù)與Wild-type小鼠相比沒有顯著性差異(p=0.12),AD Runner小鼠穿越平臺(tái)的次數(shù)較AD Control小鼠顯著性增加(p=0.001);AD Control小鼠目標(biāo)象限游泳的時(shí)間較Wild-type小鼠顯著性縮短(p=0.000),AD Runner小鼠目標(biāo)象限游泳的時(shí)間較AD Control小鼠顯著性增加(p=0.006)。3、16月齡的Wild-type小鼠,AD Control小鼠和AD Runner小鼠的逃避潛伏期存在顯著性差異(p=0.000),其中,AD Control小鼠的逃避潛伏期較Wild-type小鼠顯著性延長(p=0.000),AD Runner小鼠的逃避潛伏期較AD Control小鼠的逃避潛伏期顯著性縮短(p=0.002);4、16月齡的Wild-type小鼠,AD Control小鼠和AD Runner小鼠穿越平臺(tái)的次數(shù)和目標(biāo)象限游泳的時(shí)間均存在顯著性差異(p=0.006和p=0.004),其中,AD Control小鼠穿越平臺(tái)的次數(shù)較Wild-type小鼠顯著性減少(p=0.002),AD Runner小鼠穿越平臺(tái)的次數(shù)與AD Control小鼠相比沒有顯著性差異(p=0.050),AD Control小鼠目標(biāo)象限游泳的時(shí)間較Wild-type小鼠顯著性縮短(p=0.004),AD Runner小鼠目標(biāo)象限游泳的時(shí)間較AD Control小鼠顯著性增加(p=0.005)。結(jié)論:1、10月齡和16月齡的雄性APP/PS1轉(zhuǎn)基因AD小鼠的空間學(xué)習(xí)和記憶能力均顯著性減退。2、跑步鍛煉不僅能夠延緩早期轉(zhuǎn)基因AD小鼠空間學(xué)習(xí)和記憶能力的減退,而且能夠改善晚期轉(zhuǎn)基因AD小鼠空間學(xué)習(xí)和記憶障礙。第二部分 跑步鍛煉對早期轉(zhuǎn)基因AD小鼠海馬及海馬有髓神經(jīng)纖維的作用目的:研究跑步鍛煉對行為學(xué)改變前的APP/PS1轉(zhuǎn)基因小鼠海馬結(jié)構(gòu)改變的影響,以期找到跑步鍛煉影響轉(zhuǎn)基因AD小鼠空間學(xué)習(xí)和記憶能力的神經(jīng)生物學(xué)基礎(chǔ),為今后尋找早期干預(yù)AD的行為學(xué)和藥物手段提供理論依據(jù)。方法:對6月齡的APP/PS1轉(zhuǎn)基因AD小鼠進(jìn)行跑步鍛煉干預(yù)后,從AD Runner小鼠、AD Control小鼠和Wild-type小鼠中各隨機(jī)選取6只小鼠進(jìn)行麻醉灌注,隨機(jī)抽取一側(cè)大腦半球,O.C.T包埋后于低溫冷凍切片機(jī)中從頭側(cè)至尾側(cè)依次切取40μm厚的連續(xù)冠狀切片,按照體視學(xué)抽樣方法對含有海馬結(jié)構(gòu)的組織切片進(jìn)行7次隨機(jī)等距離抽樣,獲取7組海馬結(jié)構(gòu)的連續(xù)等距離切片。選擇第1組等距離組織切片進(jìn)行尼氏染色,并通過體視學(xué)分析軟件計(jì)算海馬及海馬CA1區(qū)和DG區(qū)的體積;余下的組織切片經(jīng)過組織化學(xué)和免疫組織化學(xué)染色觀察海馬內(nèi)老年斑的情況以及海馬內(nèi)有髓神經(jīng)纖維髓鞘的分布情況。另一側(cè)大腦半球進(jìn)行1 mm等距連續(xù)腦組織切片,分別在海馬CA1區(qū)和DG區(qū)內(nèi)各隨機(jī)抽取3個(gè)組織塊制成電鏡標(biāo)本,運(yùn)用體視學(xué)方法計(jì)算海馬CA1區(qū)和DG區(qū)內(nèi)有髓神經(jīng)纖維總長度、總體積以及有髓神經(jīng)纖維髓鞘的體積。結(jié)果:1、10月齡AD Control小鼠海馬體積、海馬CA1區(qū)體積和DG區(qū)體積均較相同月齡Wild-type小鼠海馬的體積顯著性減小(p=0.000,p=0.026和p=0.000);10月齡AD Runner小鼠海馬體積、海馬CA1區(qū)體積和DG區(qū)體積均顯著性小于相同月齡AD Control小鼠(p=0.000,p=0.010和p=0.006)。2、10月齡Wild-type小鼠海馬內(nèi)沒有老年斑沉積,而相同月齡AD Control小鼠和AD Runner小鼠海馬內(nèi)均有少量的老年斑沉積,但AD Runner小鼠海馬內(nèi)沉積的斑塊數(shù)量少于AD Control小鼠海馬內(nèi)沉積的斑塊數(shù)量。3、10月齡AD Control小鼠和AD Runner小鼠海馬神經(jīng)纖維髓鞘分布均較相同月齡Wild-type小鼠稀疏,而AD Control小鼠海馬神經(jīng)纖維髓鞘的分布較AD Runner小鼠海馬神經(jīng)纖維髓鞘的分布更為稀疏。4、10月齡AD Control小鼠海馬CA1區(qū)內(nèi)有髓神經(jīng)纖維總長度與相同月齡Wild-type小鼠相比沒有顯著性差異(p=0.949),但其有髓神經(jīng)纖維的體積及其髓鞘的體積較相同月齡Wild-type小鼠顯著性減小(p=0.033和p=0.018);10月齡AD Runner小鼠CA1區(qū)內(nèi)有髓神經(jīng)纖維的總長度和總體積與相同月齡AD Control小鼠相比沒有顯著性改變(p=0.070和p=0.063),但其髓鞘的體積顯著性大于相同月齡的AD Control小鼠(p=0.018)。5、10月齡AD Control小鼠海馬DG區(qū)內(nèi)有髓神經(jīng)纖維的總長度與相同月齡Wild-type小鼠相比沒有顯著性差異(p=0.482),但有髓神經(jīng)纖維及其髓鞘體積較相同月齡Wild-type小鼠顯著性減小(p=0.037和p=0.007);10月齡AD Runner小鼠DG區(qū)內(nèi)有髓神經(jīng)纖維的總長度、有髓神經(jīng)纖維及其髓鞘的體積均顯著性大于AD Control小鼠(p=0.013,p=0.018和p=0.006)。結(jié)論:1、10月齡時(shí),APP/PS1轉(zhuǎn)基因AD小鼠海馬及海馬CA1區(qū)和DG區(qū)明顯萎縮,跑步鍛煉能夠延緩早期APP/PS1轉(zhuǎn)基因AD小鼠海馬及海馬CA1區(qū)和DG區(qū)萎縮。2、10月齡時(shí),APP/PS1轉(zhuǎn)基因AD小鼠海馬內(nèi)有少量的老年斑沉積,跑步鍛煉能夠減少早期APP/PS1轉(zhuǎn)基因AD小鼠海馬內(nèi)老年斑的沉積。3、10月齡時(shí),APP/PS1轉(zhuǎn)基因AD小鼠海馬CA1區(qū)內(nèi)有髓神經(jīng)纖維及其髓鞘的體積顯著性減少,跑步鍛煉可以延緩轉(zhuǎn)基因AD小鼠海馬CA1區(qū)有髓神經(jīng)纖維髓鞘體積的下降。4、10月齡時(shí),APP/PS1轉(zhuǎn)基因AD小鼠海馬DG區(qū)內(nèi)有髓神經(jīng)纖維及其髓鞘的體積均顯著性減少,跑步鍛煉不僅可以延緩轉(zhuǎn)基因AD小鼠海馬DG區(qū)有髓神經(jīng)纖維及其髓鞘的體積丟失,還能延緩轉(zhuǎn)基因AD小鼠海馬DG區(qū)有髓神經(jīng)纖維的總長度丟失。第三部分 跑步鍛煉對晚期轉(zhuǎn)基因AD小鼠海馬及海馬神經(jīng)元的作用目的:研究跑步鍛煉對行為學(xué)已經(jīng)發(fā)生改變的APP/PS1轉(zhuǎn)基因小鼠海馬結(jié)構(gòu)改變的影響,以期找到跑步鍛煉改善轉(zhuǎn)基因AD小鼠空間學(xué)習(xí)和記憶能力的神經(jīng)生物學(xué)基礎(chǔ),為今后尋找緩解和治療AD的行為學(xué)和藥物手段提供結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)。方法:對12月齡的APP/PS1轉(zhuǎn)基因AD小鼠進(jìn)行跑步鍛煉干預(yù)后,從AD Runner小鼠、AD Control小鼠和Wild-type小鼠中各隨機(jī)選取6只小鼠進(jìn)行麻醉灌注,隨機(jī)抽取一側(cè)大腦半球,O.C.T包埋后于低溫冷凍切片機(jī)中從頭側(cè)至尾側(cè)依次切取50μm厚的連續(xù)冠狀切片,按照體視學(xué)抽樣方法對含有海馬結(jié)構(gòu)的組織切片進(jìn)行6次隨機(jī)等距離抽樣,獲取6組海馬結(jié)構(gòu)的連續(xù)等距離切片。選擇第1組等距離組織切片進(jìn)行尼氏染色,并通過體視學(xué)分析軟件計(jì)算海馬及海馬CA1區(qū)和DG區(qū)的體積;余下的5組冰凍組織切片則隨機(jī)選擇2組分別進(jìn)行甲苯胺藍(lán)染色和anti-Brdu抗體免疫組織化學(xué)染色,運(yùn)用體視學(xué)分析軟件計(jì)算海馬及海馬CA1區(qū)和DG區(qū)內(nèi)神經(jīng)元的數(shù)目和Brdu+細(xì)胞的數(shù)目,余下的冰凍組織切片則經(jīng)過組織化學(xué)染色、免疫組織化學(xué)染色和免疫熒光雙標(biāo)等方法觀察海馬內(nèi)老年斑的情況以及海馬內(nèi)新生神經(jīng)元的情況。結(jié)果:1、16月齡時(shí),Wild-type小鼠、AD Control小鼠、AD Runner小鼠海馬體積、海馬CA1區(qū)體積和DG區(qū)體積均沒有顯著性差異。2、16月齡Wild-type小鼠海馬內(nèi)沒有老年斑沉積,而相同月齡AD Control小鼠和AD Runner小鼠海馬內(nèi)均有大量的老年斑沉積,且AD Runner小鼠海馬內(nèi)沉積的斑塊數(shù)量與AD Control小鼠相比有所減少。3、16月齡AD Control小鼠海馬及海馬CA1區(qū)、DG區(qū)內(nèi)神經(jīng)元的總數(shù)量均較相同月齡Wild-type小鼠顯著性減少(p=0.003,p=0.020和p=0.010),16月齡AD Runner小鼠海馬及DG區(qū)內(nèi)神經(jīng)元的總數(shù)量與相同月齡AD Control小鼠相比均顯著性增加(p=0.005和p=0.013),但其海馬CA1區(qū)內(nèi)神經(jīng)元的數(shù)量與AD Control小鼠相比沒有顯著性差異(p=0.200)。4、16月齡AD Control小鼠海馬及DG區(qū)內(nèi)Brdu+細(xì)胞的總數(shù)量均較相同月齡Wild-type小鼠顯著性減少(p=0.027和p=0.004),而CA1區(qū)內(nèi)Brdu+細(xì)胞的總數(shù)量與相同月齡Wild-type小鼠相比沒有顯著性差異(p=0.198);16月齡AD Runner小鼠海馬及海馬DG區(qū)內(nèi)Brdu+細(xì)胞的總數(shù)量較相同月齡AD Control小鼠均顯著性增加(p=0.040和p=0.004),而海馬CA1區(qū)內(nèi)Brdu+細(xì)胞的總數(shù)量與AD Control小鼠相比沒有顯著性差異(p=0.078)。5、16月齡Wild-type小鼠和AD Runner小鼠海馬CA1區(qū)內(nèi)可見少量新生神經(jīng)元分布,而相同月齡AD Control小鼠海馬CA1區(qū)內(nèi)幾乎觀察不到有新生神經(jīng)元分布。但是16月齡Wild-type小鼠、AD Control小鼠和AD Runner小鼠海馬DG區(qū)內(nèi)均可見新生神經(jīng)元分布,其中以AD Control小鼠海馬DG區(qū)內(nèi)新生神經(jīng)元分布最少。結(jié)論:1、野生型小鼠16月齡時(shí)海馬及海馬CA1區(qū)和DG區(qū)體積與相同月齡APP/PS1轉(zhuǎn)基因AD小鼠沒有顯著性差異,跑步鍛煉對晚期APP/PS1轉(zhuǎn)基因AD小鼠海馬及海馬CA1區(qū)和DG區(qū)的萎縮沒有延緩作用。2、16月齡時(shí),APP/PS1轉(zhuǎn)基因AD小鼠海馬內(nèi)有大量的老年斑沉積,跑步鍛煉能夠減少晚期APP/PS1轉(zhuǎn)基因AD小鼠海馬內(nèi)老年斑的沉積。3、16月齡時(shí),APP/PS1轉(zhuǎn)基因AD小鼠海馬及海馬CA1區(qū)、DG區(qū)內(nèi)神經(jīng)元顯著性丟失,跑步鍛煉可以減少轉(zhuǎn)基因AD小鼠海馬及海馬DG區(qū)內(nèi)神經(jīng)元的丟失。4、16月齡時(shí),APP/PS1轉(zhuǎn)基因AD小鼠海馬DG區(qū)內(nèi)新生神經(jīng)元形成能力和存活能力減弱,跑步鍛煉可以促進(jìn)轉(zhuǎn)基因AD小鼠海馬DG區(qū)內(nèi)新生神經(jīng)元的形成和存活。
【關(guān)鍵詞】：空間學(xué)習(xí)和記憶能力 Morris水迷宮 轉(zhuǎn)基因AD小鼠 跑步鍛煉 有髓神經(jīng)纖維 髓鞘 海馬 轉(zhuǎn)基因AD小鼠 跑步鍛煉 神經(jīng)元 Brdu+細(xì)胞 新生神經(jīng)元 海馬 轉(zhuǎn)基因AD小鼠 跑步鍛煉
【學(xué)位授予單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R749.16
【目錄】：

• 英漢縮略語名詞對照4-5
• 中文摘要5-14
• 英文摘要14-26
• 前言26-29
• 第一部分 跑步鍛煉對不同時(shí)期轉(zhuǎn)基因AD小鼠空間學(xué)習(xí)和記憶能力的作用29-40
• 1 材料與方法30-32
• 2 結(jié)果32-37
• 3 討論37-40
• 第二部分 跑步鍛煉對早期AD小鼠海馬及海馬內(nèi)有髓神經(jīng)纖維的作用40-64
• 1 材料和方法41-50
• 2 結(jié)果50-58
• 3 討論58-64
• 第三部分 跑步鍛煉對晚期AD小鼠海馬及海馬內(nèi)神經(jīng)元的作用64-88
• 1 材料和方法65-71
• 2 結(jié)果71-82
• 3 討論82-88
• 全文結(jié)論88-89
• 參考文獻(xiàn)89-98
• 文獻(xiàn)綜述98-116
• 參考文獻(xiàn)106-116
• 致謝116-117
• 攻讀博士期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文及論文摘要目錄117-121

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1 魏海,黃敬耀;海馬與學(xué)習(xí)記憶關(guān)系的實(shí)驗(yàn)研究概況[J];江西中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);1999年01期

2 段艷平;;β-神經(jīng)生長因子基因在海馬回神經(jīng)原中的表達(dá)[J];國外醫(yī)學(xué)(分子生物學(xué)分冊);1989年03期

3 李紅,王彩霞,劉秀琴,趙延yP,吳新彥;兒童期海馬病變的臨床意義(附21例臨床分析)[J];中國實(shí)用兒科雜志;1999年12期

4 盧守祥;任惠民;白乃剛;;貓海馬傳入纖維的來源—HRP法研究[J];西安交通大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);1987年03期

5 易傳安;岳曉玲;王濱;;5-羥色胺與海馬的學(xué)習(xí)記憶關(guān)系[J];中國老年學(xué)雜志;2009年23期

6 相守武，，楊巍偉，劉杰;短暫性全面遺忘癥（附3例報(bào)告）[J];中風(fēng)與神經(jīng)疾病雜志;1994年01期

7 王群,阮旭中,張?zhí)K明,吳建平,吳愛國;雌孕激素對鼠腦皮層及海馬N-甲基-D-天冬氨酸受體亞單位1mRNA表達(dá)的影響[J];中華神經(jīng)科雜志;2000年03期

8 陽生光;蘇科;涂燕喜;張興毅;唐驊;李峰;;改良式大鼠全腦缺血再灌注模型的制作及海馬回核因子-κB的表達(dá)研究[J];中國全科醫(yī)學(xué);2010年18期

9 劉佩;劉U

本文編號(hào)：881126