本文關(guān)鍵詞：JAK-STAT通路介導(dǎo)的gx-50對(duì)神經(jīng)元的抗氧化保護(hù)作用

  更多相關(guān)文章： 阿爾茨海默病 神經(jīng)元 氧化應(yīng)激 JAK-STAT信號(hào)通路

【摘要】：阿爾茨海默病(Alzheimer's disease,AD)是一種多發(fā)于老年人的常見神經(jīng)退行性疾病。其發(fā)病機(jī)制錯(cuò)綜復(fù)雜,不僅涉及了細(xì)胞內(nèi)多種相互作用的分子機(jī)制和信號(hào)通路,還與復(fù)雜多變的環(huán)境因素密切相關(guān)。目前臨床上尚未發(fā)現(xiàn)針對(duì)阿爾茨海默病的有效預(yù)防手段和治療方式。阿爾茨海默病的重要病理特征之一老年斑的主要成分為β淀粉樣蛋白(Aβ)。Aβ不僅是阿爾茨海默病的主要形成原因,還能促進(jìn)腦組織中自由基的生成并導(dǎo)致大量神經(jīng)元細(xì)胞因此受到氧化損傷。本實(shí)驗(yàn)室的前期研究中發(fā)現(xiàn),四川花椒中的一種天然活性化合物gx-50在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中針對(duì)阿爾茨海默病顯現(xiàn)了積極的治療作用。因此從氧化應(yīng)激的角度研究gx-50對(duì)阿爾茨海默病的發(fā)生和發(fā)展過程的作用具有重要的意義。研究目的:前期研究的結(jié)果顯示,gx-50的主要生物學(xué)功能表現(xiàn)為對(duì)癡呆小鼠認(rèn)知和記憶功能的改善,對(duì)體外培養(yǎng)的原代神經(jīng)元細(xì)胞的保護(hù)作用和抑制巨噬細(xì)胞釋放炎性因子等。雖然gx-50已被證明在阿爾茨海默病中具有強(qiáng)大的神經(jīng)保護(hù)功能,然而其抗氧化機(jī)制在很大程度上仍然是未知的。本研究的主要目的是探討gx-50針對(duì)神經(jīng)元細(xì)胞的抗氧化保護(hù)作用。研究方法:本研究使用dcfh-da熒光探針檢測(cè)gx-50預(yù)處理對(duì)pc12細(xì)胞內(nèi)活性氧(ros)水平的影響。采用wst-8法檢測(cè)gx-50對(duì)pc12細(xì)胞內(nèi)總超氧化物歧化酶(sod)活性的影響。并使用tba法檢測(cè)pc12細(xì)胞分泌的丙二醛(mda)的水平來衡量gx-50抵抗脂質(zhì)氧化的能力。使用westernblot的方法檢測(cè)gx-50預(yù)處理對(duì)于jak-stat信號(hào)通路中的關(guān)鍵蛋白jak和stat3的磷酸化水平以及對(duì)caspase-3蛋白活化水平的影響。通過免疫組織化學(xué)的方法檢測(cè)gx-50在組織水平上對(duì)jak-stat通路的影響。研究結(jié)果:對(duì)pc12細(xì)胞內(nèi)ros的含量檢測(cè)結(jié)果顯示,使用gx-50對(duì)pc12細(xì)胞進(jìn)行30min預(yù)處理,再使用同樣的aβ刺激,pc12細(xì)胞分泌的ros水平明顯被降低到了與對(duì)照組相近的水平。在aβ存在的情況下,gx-50可以顯著地增強(qiáng)pc12細(xì)胞內(nèi)總sod酶活性,減弱aβ對(duì)sod的毒性作用。gx-50還可以使aβ刺激下的pc12細(xì)胞分泌的mda水平降低。westernblot的實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,與單獨(dú)使用aβ刺激相比,gx-50與aβ共處理可以明顯增強(qiáng)jak-stat通路中關(guān)鍵蛋白jak2和stat3的磷酸化水平。并且免疫組織化學(xué)的結(jié)果表明,在app轉(zhuǎn)基因陽(yáng)性小鼠(app+)和app轉(zhuǎn)基因陰性小鼠(app-)的腦組織海馬區(qū)中,gx-50都上調(diào)了p-stat3的表達(dá)水平。而在h2o2誘導(dǎo)的氧化環(huán)境下,gx-50降低了pc12細(xì)胞內(nèi)caspase-3蛋白活性亞基的相對(duì)表達(dá)水平。使用jak2的特異性抑制劑對(duì)pc12細(xì)胞進(jìn)行預(yù)處理,可以有效逆轉(zhuǎn)gx-50的上述抗氧化保護(hù)作用。結(jié)論:gx-50可以使在β淀粉樣蛋白(aβ)刺激下的pc12細(xì)胞分泌的ros和mda水平降低,并保護(hù)其胞內(nèi)總sod酶活性;gx-50可以在細(xì)胞和組織水平活化jak-stat信號(hào)通路。在氧化環(huán)境下,gx-50可以顯著降低PC12細(xì)胞內(nèi)caspase-3蛋白的活化水平;而JAK2的特異性抑制劑,AG-490,逆轉(zhuǎn)了gx-50的上述抗氧化保護(hù)作用。這表明gx-50可以通過活化JAK-STAT通路,在一定程度上減弱神經(jīng)元受到的氧化損傷,對(duì)神經(jīng)元起到保護(hù)作用,因此在阿爾茨海默病的預(yù)防和治療方面具有一定的應(yīng)用前景。
【關(guān)鍵詞】：阿爾茨海默病 神經(jīng)元 氧化應(yīng)激 JAK-STAT信號(hào)通路
【學(xué)位授予單位】：上海交通大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R749.16
【目錄】：

• 摘要6-9
• Abstract9-14
• 符號(hào)與縮寫說明14-17
• 第一章 緒論17-42
• 1.1 阿爾茨海默病的臨床特征17-19
• 1.2 阿爾茨海默病對(duì)社會(huì)經(jīng)濟(jì)的影響19-20
• 1.3 阿爾茨海默病的發(fā)生機(jī)制20-24
• 1.4 Aβ 在阿爾茨海默病中的作用24-35
• 1.4.1 Aβ 對(duì)于神經(jīng)元的毒害作用25-28
• 1.4.2 Aβ 通過激活小膠質(zhì)細(xì)胞參與阿爾茨海默病的形成與發(fā)展28-33
• 1.4.3 Aβ 與神經(jīng)纖維纏結(jié)33-35
• 1.5 氧化應(yīng)激在阿爾茨海默病中的作用35-40
• 1.6 gx-50與阿爾茨海默病40-42
• 第二章 gx-50對(duì)淀粉樣蛋白誘導(dǎo)PC12細(xì)胞氧化應(yīng)激狀態(tài)的影響42-71
• 2.1 實(shí)驗(yàn)儀器和材料介紹42-44
• 2.2 實(shí)驗(yàn)試劑配制44-49
• 2.3 實(shí)驗(yàn)方法49-57
• 2.3.1 PC12細(xì)胞培養(yǎng)和加藥處理49-50
• 2.3.2 檢測(cè)PC12細(xì)胞內(nèi)ROS含量50
• 2.3.3 檢測(cè)PC12細(xì)胞內(nèi)SOD含量50-51
• 2.3.4 測(cè)量PC12細(xì)胞分泌的MDA含量51-52
• 2.3.5 Western blot分析PC12細(xì)胞中JAK2、STAT3和caspase-3 蛋白的表達(dá)量52-54
• 2.3.6 免疫組織化學(xué)實(shí)驗(yàn)54-56
• 2.3.7 統(tǒng)計(jì)分析56-57
• 2.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果57-68
• 2.4.1 gx-50降低了PC12細(xì)胞內(nèi)ROS的表達(dá)水平57-59
• 2.4.2 gx-50減弱了Aβ 對(duì)于SOD的毒性59-61
• 2.4.3 gx-50減少PC12細(xì)胞分泌的MDA61-63
• 2.4.4 gx-50活化了JAK-STAT通路63-66
• 2.4.5 gx-50下調(diào)了氧化應(yīng)激狀態(tài)下PC12細(xì)胞內(nèi)活化的caspase-3 蛋白的表達(dá)水平66-68
• 2.5 討論68-71
• 第三章 結(jié)論71-72
• 參考文獻(xiàn)72-79
• 致謝79-81
• 攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文81

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前9條

1 于永燕;于丁;;黃連素預(yù)處理對(duì)家兔心肌缺血再灌注損傷的抗氧化保護(hù)作用[J];湖南中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào);2011年10期

2 吳純啟,王治喬;褪黑素抗氧化保護(hù)作用機(jī)制及應(yīng)用的研究進(jìn)展[J];國(guó)外醫(yī)學(xué)(藥學(xué)分冊(cè));2004年04期

3 樊廷俊;趙君;李凌;楊秀霞;于苗苗;王晶;;人角膜內(nèi)皮細(xì)胞體外氧化損傷及黃酮抗氧化保護(hù)作用的機(jī)制[J];國(guó)際眼科雜志;2008年08期

4 肖峰;姜正林;李霞;陳建;潘永進(jìn);顧永健;石中瑗;;中藥合劑對(duì)缺氧性腦損害的抗氧化保護(hù)作用[J];時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥;2007年02期

5 楊俊何;抗氧化維生素預(yù)防冠心病的抗氧化保護(hù)作用[J];國(guó)外醫(yī)藥.合成藥.生化藥.制劑分冊(cè);1996年02期

6 田偉;畢玉婷;周啟龍;薛艷紅;仇敏;但飛君;劉士平;;沒食子酸酯對(duì)神經(jīng)細(xì)胞的抗氧化保護(hù)作用研究[J];天然產(chǎn)物研究與開發(fā);2013年10期

7 肖峰,姜正林,石中瑗,李霞,陳建,潘永進(jìn);人參銀杏合劑對(duì)缺氧大鼠腦組織的抗氧化保護(hù)作用[J];中西醫(yī)結(jié)合心腦血管病雜志;2005年10期

8 馬菲菲;譚永星;林高翔;;氫氣治療心肌缺血-再灌注損傷相關(guān)機(jī)制的研究進(jìn)展[J];廣東醫(yī)學(xué);2014年03期

9 ;[J];;年期

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前2條

1 陳yN;JAK-STAT通路介導(dǎo)的gx-50對(duì)神經(jīng)元的抗氧化保護(hù)作用[D];上海交通大學(xué);2015年

2 馬素敏;食品體系中2,6-二叔丁基對(duì)苯甲酚（BHT）抗氧化活性及揮發(fā)、遷移規(guī)律的研究[D];河南工業(yè)大學(xué);2014年

，

本文編號(hào)：755762