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Apelin-13激活PI3K和ERKs信號(hào)通路拮抗皮質(zhì)酮誘導(dǎo)的PC12細(xì)胞凋亡

發(fā)布時(shí)間:2017-08-27 23:35

  本文關(guān)鍵詞:Apelin-13激活PI3K和ERKs信號(hào)通路拮抗皮質(zhì)酮誘導(dǎo)的PC12細(xì)胞凋亡


  更多相關(guān)文章: Apelin 皮質(zhì)酮 凋亡 PI3K ERK PC12細(xì)胞


【摘要】:研究背景及目的:眾所周知,環(huán)境應(yīng)激是精神障礙的風(fēng)險(xiǎn)因素之一。糖皮質(zhì)激素在生理應(yīng)激反應(yīng)的調(diào)節(jié)中起重要的作用。有研究報(bào)道糖皮質(zhì)激素的水平升高與抑郁癥有關(guān),皮質(zhì)酮可以引起神經(jīng)細(xì)胞退行性變甚至凋亡。Apelin和它的受體APJ廣泛分布于中樞神經(jīng)系統(tǒng),其中包括與應(yīng)激反應(yīng)有關(guān)的邊緣結(jié)構(gòu)。Apelin通過與APJ結(jié)合來發(fā)揮保護(hù)神經(jīng)細(xì)胞、心肌細(xì)胞、調(diào)控血壓、HPA軸等多種作用。然而,Apelin在應(yīng)激相關(guān)的疾病中的作用卻不為人所知。PI3K/Akt和ERKs信號(hào)通路被公認(rèn)在細(xì)胞增殖、分化、生存、凋亡中有重要的作用。近來有研究報(bào)道皮質(zhì)酮參與調(diào)節(jié)PI3K/Akt和ERK1/2信號(hào)通路。因此,我們使用PC12細(xì)胞作為神經(jīng)細(xì)胞模型,探討Apelin是否通過激活PI3K/Akt和ERKs信號(hào)通路拮抗皮質(zhì)酮誘導(dǎo)的PC12細(xì)胞的凋亡。方法:使用MTT染色酶標(biāo)儀法檢測(cè)細(xì)胞活力;Hoechst染色法、雙染流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞的凋亡率;Western-Blot法檢測(cè)磷酸化Akt(p-Akt)、Akt、ERKs和胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶(p-ERKs)以及活化的caspase-3的表達(dá)。結(jié)果:1.Apelin-13拮抗皮質(zhì)酮誘導(dǎo)的PC12細(xì)胞的活力下降PC12細(xì)胞予以皮質(zhì)酮(200,400,600,800和1000μM)處理24h,結(jié)果顯示,隨著皮質(zhì)酮損傷濃度升高,PC12細(xì)胞活力逐漸下降。當(dāng)不同濃度的Apelin-13(0.25,0.5,1,2和4μM)預(yù)處理細(xì)胞30min,然后再暴露于皮質(zhì)酮(600μM)損傷環(huán)境中24h,結(jié)果顯示:Apelin-13預(yù)處理后的PC12細(xì)胞活力較皮質(zhì)酮損傷組明顯改善。2.Apelin-13拮抗皮質(zhì)酮誘導(dǎo)的PC12細(xì)胞的凋亡PC12細(xì)胞予以皮質(zhì)酮(600μM)處理24h,皮質(zhì)酮(600μM)顯著的增加了PC12細(xì)胞凋亡率。用Apelin-13(4μM)預(yù)處理PC12細(xì)胞30min,然后再暴露于皮質(zhì)酮(600μM)損傷環(huán)境中24h,結(jié)果顯示:Apelin-13(4μM)明顯減少了由皮質(zhì)酮誘導(dǎo)的PC12細(xì)胞的凋亡。3.Apelin-13拮抗皮質(zhì)酮對(duì)p-Akt和p-ERKs蛋白表達(dá)的抑制作用PC12細(xì)胞予以皮質(zhì)酮(600μM)孵育24h后,皮質(zhì)酮誘導(dǎo)的神經(jīng)毒性顯著的下調(diào)了p-Akt和p-ERKs在PC12細(xì)胞中的表達(dá)。Apelin-13(4μM)預(yù)處理細(xì)胞30min,然后暴露于皮質(zhì)酮(600μM)損傷環(huán)境中24h則明顯提升了p-Akt和p-ERKs在神經(jīng)細(xì)胞中的活性。4.LY294002和PD98059阻斷Apelin-13對(duì)皮質(zhì)酮損傷PC12細(xì)胞的神經(jīng)保護(hù)作用LY294002(10μM)和PD98059(20μM)預(yù)處理PC12細(xì)胞30min后,加入4μM Apelin-13預(yù)處理30min,再加入600μM皮質(zhì)酮共處理24h。Apelin對(duì)皮質(zhì)酮誘導(dǎo)的PC12細(xì)胞凋亡的保護(hù)作用被逆轉(zhuǎn)。5.Apelin-13通過PI3K/Akt和ERKs信號(hào)通路拮抗皮質(zhì)酮誘導(dǎo)的caspase-3的上調(diào)皮質(zhì)酮(600μM)孵育PC12細(xì)胞24h后明顯上調(diào)了caspase-3的表達(dá)水平。Apelin-13(4μM)預(yù)處理細(xì)胞30min,然后暴露于皮質(zhì)酮(600μM)損傷環(huán)境中24h后逆轉(zhuǎn)了皮質(zhì)酮誘導(dǎo)的caspase-3的上調(diào)。在加入Apelin-13之前預(yù)處理LY294002或PD98059 30min阻斷了Apelin-13誘導(dǎo)的caspase-3的下調(diào)。結(jié)論:Apelin-13激活PI3K/Akt和ERKs信號(hào)通路拮抗皮質(zhì)酮誘導(dǎo)的PC12細(xì)胞的凋亡。
【關(guān)鍵詞】:Apelin 皮質(zhì)酮 凋亡 PI3K ERK PC12細(xì)胞
【學(xué)位授予單位】:南華大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類號(hào)】:R749.4
【目錄】:
  • 摘要5-8
  • Abstract8-12
  • 主要縮略詞中英文對(duì)照索引12-14
  • 第1章 緒論14-18
  • 第2章 材料和方法18-24
  • 第3章 結(jié)果24-32
  • 第4章 討論32-36
  • 第5章 結(jié)論36-38
  • 參考文獻(xiàn)38-44
  • 綜述44-51
  • 參考文獻(xiàn)48-51
  • 作者攻讀學(xué)位期間的科研成果51-52
  • 致謝52

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 李云峰,劉艷芹,黃文超,羅質(zhì)璞;細(xì)胞保護(hù)作用是抗抑郁劑作用的共同通路之一(英文)[J];Acta Pharmacologica Sinica;2003年10期

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本文編號(hào):746378

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