本文關(guān)鍵詞：氯胺酮對培養(yǎng)海馬神經(jīng)元microRNA-206和BDNF表達影響的實驗研究

  更多相關(guān)文章： 氯胺酮 海馬神經(jīng)元 miRNA-206 BDNF

【摘要】：背景與目的：近年研究報道氯胺酮具有明顯的抗抑郁樣作用，且發(fā)現(xiàn)氯胺酮誘發(fā)腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(Brain-derivedneurotrophic factor，BDNF)表達是其抗抑郁作用的機制之一，然而氯胺酮是通過什么途徑誘發(fā)BDNF表達目前仍不清楚；近年研究發(fā)現(xiàn)microRNAs（miRNAs）可與目標(biāo)mRNA的3’-非編碼區(qū)結(jié)合通過降解或抑制mRNA翻譯達到對它們的靶目標(biāo)mRNA的負反饋調(diào)控作用,因此miRNAs涉及幾乎所有主要細胞功能活動，包括正常發(fā)育、生理以及疾病，，氯胺酮誘導(dǎo)BDNF表達是否與miRNA調(diào)控有關(guān)不清楚。計算機分析及其他相關(guān)研究發(fā)現(xiàn)miRNA-206（miR-206）可明顯調(diào)控BDNF蛋白質(zhì)表達，且前期我們用miRNA芯片以及動物實驗檢測發(fā)現(xiàn)氯胺酮可致大鼠腦海馬組織miR-206表達明顯下調(diào)而BDNF表達明顯增加；因此本研究的主要目的是：擬從細胞水平進一步驗證不同濃度氯胺酮對鼠海馬神經(jīng)元miR-206和BDNF表達的影響。方法:分離新生SD大鼠海馬并行海馬神經(jīng)元的原代培養(yǎng)，將培養(yǎng)7天的海馬神經(jīng)元隨機分為正常對照、50、100和300μM氯胺酮四組，50、100和300μM氯胺酮組在培養(yǎng)基中分別加入終濃度為50、100和300μM的氯胺酮，各組神經(jīng)元繼續(xù)分別培養(yǎng)0.5、1、3、6、12h后提取RNA；不同濃度氯胺酮處理6h后換為正常培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)24、48h后提取蛋白質(zhì)；分別用qRT-PCR和WesternBlot檢測各組各時間點神經(jīng)元miR-206、BDNF mRNA及BDNF蛋白質(zhì)表達含量變化；每組每個時間點重復(fù)3次。結(jié)果：（1）正常對照或300μM氯胺酮組組內(nèi)及組間各時間點miR-206、BDNF mRNA相對表達量均無統(tǒng)計學(xué)差異（P0.05）；（2）50或100μM氯胺酮組組內(nèi)各時間點miR-206和BDNF mRNA相對表達量存在統(tǒng)計學(xué)差異（P0.05），進一步S-N-K法分析發(fā)現(xiàn): miR-206相對表達量在1,3,6，12h時間點逐漸降低（P0.05），而BDNF mRNA相對表達量在3、6、12h時間點明顯升高（P0.05）；（3）50和100μM氯胺酮組組間各時間點miR-206和BDNF mRNA相對表達量無明顯統(tǒng)計學(xué)差異（P0.05）；（4）四組在24和48h時BDNF蛋白質(zhì)相對表達量存在統(tǒng)計學(xué)差異（P0.05），進一步S-N-K法分析發(fā)現(xiàn)50或100μM氯胺酮組BDNF蛋白質(zhì)相對表達量均明顯高于相應(yīng)正常對照組（P0.05）。結(jié)論:1.50或100μM氯胺酮可致海馬神經(jīng)元miR-206表達降低和BDNF mRNA表達升高，峰值在氯胺酮處理后6至12h，且miR-206和BDNF mRNA表達在50和100μM氯胺酮組間無差異。2.50或100μM氯胺酮可致培養(yǎng)海馬神經(jīng)元BDNF蛋白質(zhì)表達明顯增加。
【關(guān)鍵詞】：氯胺酮 海馬神經(jīng)元 miRNA-206 BDNF
【學(xué)位授予單位】：瀘州醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號】：R749.4
【目錄】：

• 摘要4-6
• Abstract6-9
• 前言9-10
• 材料與方法10-23
• 結(jié)果23-30
• 討論30-35
• 結(jié)論35-36
• 參考文獻36-40
• 英漢縮略詞對照表40-41
• 致謝41-42
• 綜述42-53
• 參考文獻48-53

【參考文獻】

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 黃立寧;氯胺酮對發(fā)育期海馬神經(jīng)元凋亡的影響及機制研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2012年

本文編號：707716