本文關(guān)鍵詞：不同鏈長飽和脂肪酸在老年大腦中的變化及對SH-SY5Y細(xì)胞Aβ代謝的影響

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【摘要】：背景：近年研究顯示,食物脂肪酸構(gòu)成比例、腦和血清脂肪酸組成及含量與老年認(rèn)知能力密切相關(guān),但是目前對衰老大腦中飽和脂肪酸的組成特征尚無明確一致認(rèn)識,亟待研究闡明。阿爾茨海默病(AD)是老年性癡呆最常見的類型,β-淀粉樣蛋白(Aβ)是AD發(fā)病機(jī)制的關(guān)鍵因子。研究顯示高飽和脂肪飲食是AD的危險(xiǎn)因素,但是碳鏈長度不同的飽和脂肪酸對Aβ代謝是否有不同作用,目前國內(nèi)外尚未見到報(bào)道。目的：研究不同碳鏈長度飽和脂肪酸在老年大腦的變化以及對SH-SY5Y細(xì)胞A β代謝的影響,以期探明不同類型飽和脂肪酸在腦老化及AD發(fā)生機(jī)制中的作用。方法：第一部分：采用22月齡和3月齡雄性SD大鼠作為實(shí)驗(yàn)對象,應(yīng)用氣相色譜方法分析老年和青年大鼠大腦皮質(zhì)飽和脂肪酸的組成和含量。第二部分：將SH-SY5Y細(xì)胞隨機(jī)分為4組,對照組(Control組)、C16：0組、C20：0組、C26：0組。細(xì)胞培養(yǎng)12h后處理細(xì)胞。先用MTT法、LDH細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)找出合適的給藥濃度范圍。用熒光倒置顯微鏡觀察細(xì)胞形態(tài),用ELISA法測定細(xì)胞培養(yǎng)液中Aβ含量,用半定量RT-PCR法測定細(xì)胞APP、ADAM10、BACE1、PS1、NEP等Aβ代謝相關(guān)因子的基因表達(dá),熒光探針DCFH-DA法檢測細(xì)胞內(nèi)活性氧(ROS)水平。結(jié)果：第一部分實(shí)驗(yàn)結(jié)果：氣相色譜分析結(jié)果顯示,老年組和青年組大腦皮質(zhì)均含有16種脂肪酸。用峰面積歸一化法對脂肪酸進(jìn)行定量。結(jié)果顯示,與青年組相比,老年組飽和脂肪酸C18：0含量明顯降低,飽和脂肪酸C20：0、C24：0水平均明顯升高,C22：0水平也有升高趨勢。第二部分實(shí)驗(yàn)結(jié)果：1.MTT實(shí)驗(yàn)、細(xì)胞形態(tài)學(xué)觀察、LDH細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)顯示,本實(shí)驗(yàn)應(yīng)選擇10μmol/L、 15μmol/L兩個相當(dāng)于生理濃度的條件進(jìn)行3種脂肪酸C16:0、C20:0、C26:0對SH-SY5Y細(xì)胞Ap代謝的研究。2.Aβ40檢測結(jié)果顯示,在10μmol/L濃度下,C26：0組Aβ40分泌量較Control組顯著增加,C20：0組Aβ40分泌量較Control組有升高趨勢,在15μmol/L濃度下,C26：0組Aβ40分泌量較Control組有升高趨勢。3. APP mRNA相對表達(dá)量：15μmol/L濃度下,C26：0組較Control組、C20：0組均顯著增加。ADAM10相對表達(dá)量：10μmol/L濃度下,C16：0組較Control組顯著降低,同時(shí)較C20：0組、C26：0組也顯著降低。BACE1目對表達(dá)量：10μmol/L濃度下,C26：0組較Control組、C16：0組均顯著升高,同時(shí)較C20：0組也有升高趨勢。PSl相對表達(dá)量：10μmol/L濃度下,C16：0組、C20：0組、C26：0組的PS1 mRNA相對量較Control組均顯著升高,15μmol/L濃度下,C20：0組顯著高于Control組和C26：0組NEP相對表達(dá)量：10μmol/L、15μmol/L濃度條件下,各組間NEP mRNA相對量的差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。4.細(xì)胞活性氧水平檢測結(jié)果顯示,在10μmol/L、15μmol/L兩個濃度下,C20：0組、C26：0組ROS水平較Control組、C16：0組均顯著升高,C26：0組ROS水平較C20：0組也顯著升高。結(jié)論1、老年大鼠大腦皮質(zhì)飽和脂肪酸組成不同于青年大鼠。老年大腦C18：0減少,而較長碳鏈的飽和脂肪酸C20：0、C24：0含量增高。2、C16:0、C20:0、C26:0三種飽和脂肪酸中,碳鏈越長的飽和脂肪酸促進(jìn)Aβ分泌、增加APP、BACE1、PS1 mRNA表達(dá)的作用越強(qiáng),但并不影響NEP mRNA表達(dá)。3、飽和脂肪酸影響Aβ代謝的機(jī)制可能與活性氧增多有關(guān)。
【關(guān)鍵詞】：阿爾茨海默病 老年大腦 飽和脂肪酸 Aβ代謝
【學(xué)位授予單位】：新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R749.16
【目錄】：

• 摘要5-7
• Abstract7-11
• 第一部分 老年大鼠大腦皮質(zhì)飽和脂肪酸組成的變化11-21
• 前言11-12
• 1 材料和方法12-15
• 2 結(jié)果15-17
• 3 討論17-18
• 4 小結(jié)18-19
• 參考文獻(xiàn)19-21
• 第二部分 不同鏈長飽和脂肪酸對SH-SY5Y細(xì)胞Aβ代謝的影響21-46
• 前言21-22
• 1 材料和方法22-36
• 2 結(jié)果36-39
• 3 討論39-42
• 4 小結(jié)42-43
• 結(jié)論43-44
• 參考文獻(xiàn)44-46
• 附圖46-53
• 綜述：APP/Aβ代謝的研究進(jìn)展53-65
• 參考文獻(xiàn)62-65
• 附錄65-68
• 攻讀學(xué)位期間發(fā)表的論文68-69
• 致謝69-70
• 個人簡歷70

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前3條

1 馬波,張建軍;與阿爾茨海默病密切相關(guān)的α-,β-和γ-分泌酶的研究進(jìn)展[J];國外醫(yī)學(xué).藥學(xué)分冊;2005年01期

2 王軍鋒;路睿;王以政;;淀粉樣前體蛋白β切割的調(diào)控(英文)[J];Neuroscience Bulletin;2010年05期

3 陳耀民;趙永波;;β-分泌酶研究[J];醫(yī)學(xué)教育探索;2010年10期

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本文編號：614869