突觸相關(guān)蛋白SYN及GAP-43在維生素D缺乏致大鼠學(xué)習(xí)記憶功能障礙的作用研究
本文關(guān)鍵詞:突觸相關(guān)蛋白SYN及GAP-43在維生素D缺乏致大鼠學(xué)習(xí)記憶功能障礙的作用研究
更多相關(guān)文章: 維生素D 血管性癡呆 認(rèn)知障礙 SYN GAP-43
【摘要】:目的:研究血管性癡呆與維生素D之間的關(guān)系;觀察維生素D(VitD)缺乏模型大鼠突觸相關(guān)蛋白突觸素(synaptophysin,SYN)及神經(jīng)生長相關(guān)蛋白43(growth-associatedprotein-43,GAP-43)的表達(dá)及維生素D對(duì)其表達(dá)的影響,探討維生素D對(duì)大鼠學(xué)習(xí)記憶能力的作用及其對(duì)突觸可塑性的影響。方法:1.臨床研究:部分采用平行、隨機(jī)、對(duì)照實(shí)驗(yàn)方案,選擇柳州市中醫(yī)院2014年12月至2015年12月之間,納入符合血管性癡呆診斷標(biāo)準(zhǔn)患者30例以及健康體檢中心正常者60例,比較兩組血清25(OH)D3水平。2.實(shí)驗(yàn)研究:根據(jù)李清華等方法,將50只SD大鼠隨機(jī)分為對(duì)照組(Control group,n=10)給予普通飼料,模型組即維生素D缺乏組((Model group,n=10)、低劑量治療組(Low dose group,n=10)、中劑量治療組(Middle dose group,n=10)、高劑量治療組(High dose group,n=10)給予維生素D缺乏飼料飼養(yǎng)9周,光照采用無紫外線光的白熾燈,晝夜節(jié)律12小時(shí)/12小時(shí)。在第10周開始予以維生素D補(bǔ)充劑灌胃2周,第13周采用Morris水迷宮試驗(yàn)檢測(cè)大鼠的學(xué)習(xí)及記憶能力,并在規(guī)定的時(shí)間段內(nèi)處死大鼠取其腦組織。采用ELISA法檢測(cè)1,25DHVD3水平;Western blot檢測(cè)SNY和GAP-43蛋白表達(dá)。所得數(shù)據(jù)采用SPSS23.0統(tǒng)計(jì)學(xué)分析軟件,數(shù)據(jù)采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差()表示,兩樣本均數(shù)間比較采用t檢驗(yàn),組間比較用單因素方差分析(one-way ANOVA)。方差齊時(shí)采用LSD法,方差不齊采用Dunnett's T3法,以p0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)果:1.臨床研究:與對(duì)照組比較,VaD組血清25(OH)D3降低(p0.05);2.行為學(xué)測(cè)試:在訓(xùn)練第2、3、4、5天中,與對(duì)照組比較,模型組逃避潛伏期長(p㩳0.05)。與對(duì)照組比較,模型組第1次穿越目標(biāo)象限(第三象限)時(shí)間、目標(biāo)象限(第三象限)穿越次數(shù)均有顯著差異(p㩳0.05)。與模型組比較,高劑量組第2天逃避潛伏期有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p㩳0.05)。高劑量組和模型組僅僅在目標(biāo)象限(第三象限)穿越次數(shù)上存在顯著差異(p㩳0.05)。3.SNY和GAP-43表達(dá):與空白組對(duì)照比較,模型組SYN蛋白表達(dá)升高(p㩳0.05);與模型組比較,高劑量組SYN蛋白表達(dá)均升高(p0.05);與空白組對(duì)照組比較,模型組GAP-43蛋白表達(dá)升高(p0.05);與模型組比較,高劑量組GAP-43蛋白表達(dá)均升高(p0.05)。結(jié)論:1.VaD患者血清25(OH)D3水平降低。2.維生素D缺乏會(huì)造成大鼠學(xué)習(xí)記憶能力減退。3.長時(shí)間補(bǔ)充維生素D可能有益于突觸重塑,可以改善維生素D缺乏大鼠的學(xué)習(xí)及記憶能力。4.維生素D改善大鼠學(xué)習(xí)及記憶能力的作用,可能與增加突觸相關(guān)蛋白SNY及GAP-43蛋白的表達(dá)有關(guān)。
【關(guān)鍵詞】:維生素D 血管性癡呆 認(rèn)知障礙 SYN GAP-43
【學(xué)位授予單位】:廣西中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類號(hào)】:R749.1
【目錄】:
- 中文摘要3-5
- ABSTRACT5-11
- 引言11-13
- 第一部分:臨床觀察 血管性癡呆患者維生素 D 水平分析13-17
- 1 研究對(duì)象13-15
- 1.1 病例來源13
- 1.2 VaD組病例選擇13-14
- 1.2.1 癡呆診斷標(biāo)準(zhǔn)13
- 1.2.2 VaD診斷標(biāo)準(zhǔn)13
- 1.2.3 癡呆分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)13
- 1.2.4 VaD組納入標(biāo)準(zhǔn)13-14
- 1.2.5 VaD組排除標(biāo)準(zhǔn)14
- 1.3 對(duì)照組病例選擇14
- 1.4 倫理學(xué)要求14-15
- 2 研究方法15
- 2.1 基線評(píng)估15
- 2.2 血清25(OH)D3水平檢測(cè)15
- 2.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析15
- 3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果15-17
- 3.1 兩組人口學(xué)特征比較15-16
- 3.2 血清 25(OH)D3含量16-17
- 第二部分:實(shí)驗(yàn)研究 突觸相關(guān)蛋白SYN及GAP-43在維生素D缺乏致大鼠學(xué)習(xí)記憶功能障礙的作用研究17-36
- 1 實(shí)驗(yàn)材料17-21
- 1.1 研究對(duì)象17-18
- 1.2 主要試劑18-21
- 1.3 主要儀器設(shè)備及耗材21
- 2 實(shí)驗(yàn)方法21-29
- 2.1 建立維生素D缺乏大鼠模型21-22
- 2.2 技術(shù)路線22
- 2.3 行為學(xué)測(cè)試22-24
- 2.3.1 Morris水迷宮裝置簡介23
- 2.3.2 定位航行實(shí)驗(yàn)23
- 2.3.3 空間探索實(shí)驗(yàn)23-24
- 2.3.4 具體操作注意事項(xiàng)24
- 2.4 實(shí)驗(yàn)分組及藥物干預(yù)24-25
- 2.5 大鼠處死及取材25
- 2.6 酶聯(lián)免疫吸附(ELISA)法檢測(cè) 1,25DHVD3含量25-26
- 2.7 采用Western blot檢測(cè)SYN和GAP-43 蛋白表達(dá)26-29
- 2.8 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析29
- 3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果29-36
- 3.1 各組別 1,25DHVD3含量檢測(cè)29
- 3.2 各組別行為學(xué)測(cè)試結(jié)果29-33
- 3.2.1 維生素D缺乏對(duì)大鼠學(xué)習(xí)記憶能力的影響29-30
- 3.2.2 維生素D補(bǔ)充處理后大鼠學(xué)習(xí)記憶能力的影響30-33
- 3.3 突觸相關(guān)蛋白SYN蛋白表達(dá)33
- 3.4 GAP-43蛋白含量表達(dá)比較33-36
- 討論36-46
- 1 中醫(yī)對(duì)認(rèn)知障礙、維生素D的認(rèn)識(shí)36-37
- 2 現(xiàn)代醫(yī)學(xué)對(duì)認(rèn)知障礙的認(rèn)識(shí)37-39
- 3 維生素D對(duì)神經(jīng)系統(tǒng)疾病的作用39-42
- 4 維生素D對(duì)突觸相關(guān)蛋白SYN及GAP-43 蛋白作用機(jī)制42-46
- 結(jié)論46-47
- 局限性及展望47-48
- 參考文獻(xiàn)48-55
- 附錄55-61
- 英文縮略詞表61-62
- 綜述62-71
- 參考文獻(xiàn)67-71
- 致謝71-72
- 個(gè)人簡歷及攻讀學(xué)位期間獲得的科研成果72
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