Egr-1對APP基因表達的調控作用
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【摘要】:該研究構建了含有APP啟動子的熒光素酶報告質粒以及缺失突變的報告質粒,將該質粒與Egr-1真核表達載體p CDNA3-Egr-1共轉染到HEK293與U87MG細胞中進行熒光素酶活性測定,以確定Egr-1對APP基因表達的調控作用。通過染色質免疫共沉淀實驗(chromatin immunoprecipitation assay,Ch IP)和凝膠電泳遷移實驗(electrophoretic mobility shift assay,EMSA)確定Egr-1蛋白在APP啟動子上的結合部位,同時利用組蛋白去乙;敢种苿㏕SA(trichostatin A)和butyrate誘導內源性Egr-1的表達以及Egr-1抑制劑suramin來作用于細胞,通過蛋白免疫印跡分析(Western blot)檢測Egr-1對APP蛋白表達的作用。結果顯示,Egr-1蛋白在APP基因啟動子上5′UTR區(qū)域有特異性的結合部位,去除該結合部位則Egr-1失去對APP基因啟動子的調控作用,Ch IP和EMSA的結果也證實了該結合位點;通過HDAC抑制劑和suramin干擾內源性Egr-1的表達則顯著影響了Egr-1對APP基因表達的調控作用。
【作者單位】: 寧夏顱腦疾病重點實驗室 省部共建國家重點實驗室培育基地;寧夏醫(yī)科大學基礎醫(yī)學院;
【關鍵詞】: Egr- 淀粉樣前體蛋白 阿爾茨海默病 基因表達調控
【基金】:國家重點基礎研究發(fā)展計劃(973計劃)(批準號:2012CB722408) 國家自然科學基金(批準號:81260197)資助的課題~~
【分類號】:R749.16
【正文快照】: #共同第一作者網(wǎng)絡出版時間:2014-12-19 11:55 URL:http://www.cnki.net/kcms/detail/31.2035.Q.20141219.1155.001.html阿爾茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)是一種不可逆轉的、漸進性的神經(jīng)損害性疾病,緩慢地引起記憶和思維能力的衰退[1]。AD的發(fā)病機理至今尚未明確,但經(jīng)
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