本文關(guān)鍵詞：Egr-1對APP基因表達(dá)的調(diào)控作用，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：該研究構(gòu)建了含有APP啟動子的熒光素酶報告質(zhì)粒以及缺失突變的報告質(zhì)粒,將該質(zhì)粒與Egr-1真核表達(dá)載體p CDNA3-Egr-1共轉(zhuǎn)染到HEK293與U87MG細(xì)胞中進(jìn)行熒光素酶活性測定,以確定Egr-1對APP基因表達(dá)的調(diào)控作用。通過染色質(zhì)免疫共沉淀實驗(chromatin immunoprecipitation assay,Ch IP)和凝膠電泳遷移實驗(electrophoretic mobility shift assay,EMSA)確定Egr-1蛋白在APP啟動子上的結(jié)合部位,同時利用組蛋白去乙酰化酶抑制劑TSA(trichostatin A)和butyrate誘導(dǎo)內(nèi)源性Egr-1的表達(dá)以及Egr-1抑制劑suramin來作用于細(xì)胞,通過蛋白免疫印跡分析(Western blot)檢測Egr-1對APP蛋白表達(dá)的作用。結(jié)果顯示,Egr-1蛋白在APP基因啟動子上5′UTR區(qū)域有特異性的結(jié)合部位,去除該結(jié)合部位則Egr-1失去對APP基因啟動子的調(diào)控作用,Ch IP和EMSA的結(jié)果也證實了該結(jié)合位點;通過HDAC抑制劑和suramin干擾內(nèi)源性Egr-1的表達(dá)則顯著影響了Egr-1對APP基因表達(dá)的調(diào)控作用。
【作者單位】： 寧夏顱腦疾病重點實驗室 省部共建國家重點實驗室培育基地;寧夏醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院;
【關(guān)鍵詞】： Egr- 淀粉樣前體蛋白 阿爾茨海默病 基因表達(dá)調(diào)控
【基金】：國家重點基礎(chǔ)研究發(fā)展計劃(973計劃)(批準(zhǔn)號:2012CB722408) 國家自然科學(xué)基金(批準(zhǔn)號:81260197)資助的課題~~
【分類號】：R749.16
【正文快照】： #共同第一作者網(wǎng)絡(luò)出版時間:2014-12-19 11:55 URL:http://www.cnki.net/kcms/detail/31.2035.Q.20141219.1155.001.html阿爾茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)是一種不可逆轉(zhuǎn)的、漸進(jìn)性的神經(jīng)損害性疾病,緩慢地引起記憶和思維能力的衰退[1]。AD的發(fā)病機理至今尚未明確,但經(jīng)

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本文編號：499871